| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 综述 | 第12-17页 |
| 1.1 蜱类简介 | 第12页 |
| 1.2 蜱的唾液腺退化研究 | 第12-13页 |
| 1.3 蛋白质组学 | 第13-15页 |
| 1.3.1 蛋白质组学 | 第13-14页 |
| 1.3.2 定量蛋白质组学 | 第14页 |
| 1.3.3 磷酸化蛋白质组学 | 第14-15页 |
| 1.4 RNA干扰在生物领域的应用和发展 | 第15-16页 |
| 1.5 基因干扰率的检测 | 第16-17页 |
| 第二章 长角血蜱雌蜱饱血后唾液腺组织全部蛋白质的动态变化 | 第17-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第17页 |
| 2.1.1 实验对象 | 第17页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第17页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第17页 |
| 2.2 实验方法 | 第17-21页 |
| 2.2.1 蜱唾液腺的解剖 | 第17页 |
| 2.2.2 提取蛋白质 | 第17-18页 |
| 2.2.3 蛋白酶解 | 第18-19页 |
| 2.2.4 脱盐 | 第19页 |
| 2.2.5 高效液相色谱(HPLC)反相分离 | 第19-20页 |
| 2.2.6 LC-MS/MS分析 | 第20-21页 |
| 2.2.7 蛋白质鉴定 | 第21页 |
| 2.2.8 生物信息学分析 | 第21页 |
| 2.3 实验结果 | 第21-34页 |
| 2.3.1 蛋白质鉴定 | 第21-22页 |
| 2.3.2 实验数据分析与筛选 | 第22-23页 |
| 2.3.3 差异表达蛋白热图分析 | 第23-24页 |
| 2.3.4 差异表达蛋白聚类分析 | 第24-25页 |
| 2.3.5 所有差异表达蛋白GO分析 | 第25-31页 |
| 2.3.6 差异表达蛋白KEGG通路分析 | 第31-33页 |
| 2.3.7 差异表达蛋白的蛋白互作分析 | 第33-34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-37页 |
| 第三章 饱血后雌蜱唾液腺蛋白磷酸化修饰的动态变化 | 第37-59页 |
| 3.1 实验材料 | 第37页 |
| 3.1.1 实验对象 | 第37页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第37页 |
| 3.1.3 实验仪器 | 第37页 |
| 3.2 实验方法 | 第37-42页 |
| 3.2.1 蜱唾液腺的解剖 | 第37-38页 |
| 3.2.2 提取蛋白质 | 第38页 |
| 3.2.3 蛋白酶解 | 第38-39页 |
| 3.2.4 脱盐 | 第39页 |
| 3.2.5 利用TiO_2 Beads富集磷酸化肽段 | 第39-40页 |
| 3.2.6 样品高效液相色谱(HPLC)反相分离 | 第40-41页 |
| 3.2.7 LC-MS/MS分析 | 第41页 |
| 3.2.8 蛋白质鉴定 | 第41-42页 |
| 3.2.9 生物信息学分析 | 第42页 |
| 3.3 实验结果 | 第42-55页 |
| 3.3.1 磷酸化肽段鉴定结果 | 第42页 |
| 3.3.2 实验数据重现性 | 第42-43页 |
| 3.3.3 实验数据分析与筛选 | 第43-44页 |
| 3.3.4 磷酸化修饰位点统计 | 第44-45页 |
| 3.3.5 差异磷酸化肽段热图分析 | 第45-46页 |
| 3.3.6 磷酸化Clusrer聚类分析 | 第46-47页 |
| 3.3.7 磷酸化蛋白GO分析 | 第47-53页 |
| 3.3.8 磷酸化蛋白KEGG通路分析 | 第53-55页 |
| 3.4 讨论 | 第55-59页 |
| 第四章 基因功能验证 | 第59-69页 |
| 4.1 实验材料 | 第59页 |
| 4.1.1 实验对象 | 第59页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第59页 |
| 4.1.3 实验仪器 | 第59页 |
| 4.2 实验方法 | 第59-64页 |
| 4.2.1 提取饥饿成蜱总RNA | 第59-60页 |
| 4.2.2 合成cDNA | 第60页 |
| 4.2.3 目的片段扩增 | 第60-61页 |
| 4.2.4 PCR产物电泳检测及胶回收 | 第61-62页 |
| 4.2.5 目的基因连接与转化 | 第62页 |
| 4.2.6 基因比对 | 第62页 |
| 4.2.7 含强启动子基因的扩增 | 第62-63页 |
| 4.2.8 合成大量的dsRNA | 第63页 |
| 4.2.9 注射dsRNA | 第63-64页 |
| 4.2.10 荧光定量PCR | 第64页 |
| 4.3 实验结果 | 第64-68页 |
| 4.3.1 RNA干扰结果 | 第64-67页 |
| 4.3.2 定量结果 | 第67-68页 |
| 4.4 讨论 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 致谢 | 第74页 |