IRES介导Pot1 N端缺失片段的翻译
| 英文缩写词表 | 第7-9页 |
| 构建克隆所使用的引物表 | 第9-10页 |
| 摘要 | 第10-11页 |
| Abstract | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第13-20页 |
| 1.1 IRES序列简介 | 第13-14页 |
| 1.2 Pot1蛋白 | 第14-16页 |
| 1.3 IRES序列介导翻译蛋白的生物学意义 | 第16-17页 |
| 1.4 课题的研究意义及技术路线 | 第17-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-27页 |
| 2.1 材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 细菌与细胞株 | 第20页 |
| 2.1.2 抗体 | 第20页 |
| 2.1.3 质粒 | 第20页 |
| 2.1.4 其它材料 | 第20-21页 |
| 2.2 方法 | 第21-27页 |
| 2.2.1 PCR体系 | 第21页 |
| 2.2.2 重组PCR体系 | 第21-22页 |
| 2.2.3 PCR程序 | 第22页 |
| 2.2.4 回收的PCR产物和载体的双酶切体系 | 第22-23页 |
| 2.2.5 连接体系 | 第23页 |
| 2.2.6 大肠杆菌转化 | 第23页 |
| 2.2.7 细胞正常传代 | 第23页 |
| 2.2.8 质粒的转染 | 第23-24页 |
| 2.2.9 慢病毒的包装与稳定克隆的形成 | 第24页 |
| 2.2.10 siRNA的转染 | 第24-25页 |
| 2.2.11 荧光检测 | 第25页 |
| 2.2.12 原核表达 | 第25页 |
| 2.2.13 Westernblot | 第25页 |
| 2.2.14 细胞周期 | 第25-27页 |
| 3 实验结果 | 第27-45页 |
| 3.1 Pot1存在IRES的发现 | 第27-34页 |
| 3.1.1 Pot1表达 | 第27-28页 |
| 3.1.2 siRNA干扰验证 | 第28-29页 |
| 3.1.3 Pot1表达特异性验证 | 第29-30页 |
| 3.1.4 N端标签的影响 | 第30-31页 |
| 3.1.5 Pot1的原核表达 | 第31-32页 |
| 3.1.6 IRES序列的发现 | 第32-34页 |
| 3.2 IRES序列所在位置与翻译起始位点的研究 | 第34-41页 |
| 3.2.1 Pot1截短突变实验 | 第34-35页 |
| 3.2.2 IRES序列定位验证 | 第35-38页 |
| 3.2.3 翻译起始密码子探索 | 第38-41页 |
| 3.3 IRES介导翻译片段功能的初步探讨 | 第41-45页 |
| 3.3.1 IRES序列介导翻译片段的稳定性 | 第41-42页 |
| 3.3.2 细胞周期同步化 | 第42-45页 |
| 4 小结与讨论 | 第45-50页 |
| 5 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
