| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 目录 | 第5-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-17页 |
| ·精氨酸脱亚胺酶 | 第7-12页 |
| ·精氨酸脱亚胺酶简介 | 第7页 |
| ·精氨酸脱亚胺酶的结构研究 | 第7-9页 |
| ·精氨酸脱亚胺酶的主要用途 | 第9页 |
| ·精氨酸脱亚胺酶的研究进展 | 第9-12页 |
| ·毕赤酵母表达系统 | 第12-15页 |
| ·毕赤酵母的生物学特征 | 第12页 |
| ·毕赤酵母的表达菌株 | 第12-13页 |
| ·毕赤酵母的表达载体 | 第13-14页 |
| ·影响外源蛋白在毕赤酵母中表达的因素 | 第14-15页 |
| ·大肠杆菌分泌表达系统 | 第15页 |
| ·本课题研究背景、意义和课题来源 | 第15-16页 |
| ·本课题研究思路和研究内容 | 第16-17页 |
| 第二章 材料与方法 | 第17-27页 |
| ·材料 | 第17-19页 |
| ·菌种与载体 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17页 |
| ·引物 | 第17-18页 |
| ·主要设备 | 第18页 |
| ·主要培养基和溶液 | 第18-19页 |
| ·方法 | 第19-27页 |
| ·精氨酸脱亚胺酶在毕赤酵母中的分泌表达 | 第19-24页 |
| ·精氨酸脱亚胺酶在大肠杆菌中的分泌表达 | 第24-27页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第27-44页 |
| ·精氨酸脱亚胺酶在毕赤酵母中的分泌表达 | 第27-37页 |
| ·目的基因的优化与克隆 | 第27-29页 |
| ·重组载体pPIC9K-yh-ADI的构建 | 第29-30页 |
| ·表达载体的线性化与电转化毕赤酵母 | 第30-32页 |
| ·基因多拷贝重组子的筛选 | 第32-33页 |
| ·酵母重组子的鉴定 | 第33-35页 |
| ·重组子的诱导表达及发酵条件的初优化 | 第35-36页 |
| ·表达产物的检测 | 第36-37页 |
| ·精氨酸脱亚胺酶在大肠杆菌中的分泌表达 | 第37-44页 |
| ·PCR扩增及T-nx-ADI的构建 | 第37-38页 |
| ·重组载体pBAD-nx-ADI的构建 | 第38页 |
| ·重组菌E. coli TOP10F'/pBAD-nx-ADI的诱导表达及诱导条件的初步优化 | 第38-42页 |
| ·表达产物的初分离及酶活测定 | 第42-44页 |
| 主要结论与展望 | 第44-46页 |
| 1 主要结论 | 第44页 |
| 2 展望 | 第44-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-51页 |
| 附录:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第51页 |