| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-22页 |
| 1.油菜高油酸研究进展 | 第11-13页 |
| ·高油酸的优点 | 第11页 |
| ·高油酸油菜的育种方法 | 第11-13页 |
| ·传统的育种方法 | 第11-12页 |
| ·诱变育种 | 第12页 |
| ·物理诱变 | 第12页 |
| ·化学诱变 | 第12页 |
| ·复合诱变 | 第12页 |
| ·基因工程途径 | 第12-13页 |
| 2.油酸脱氢酶FAD2的研究进展 | 第13-14页 |
| ·FAD2和fad2基因家族 | 第13-14页 |
| ·FAD2活性调节 | 第14页 |
| ·前景展望 | 第14页 |
| 3.RNA干扰研究进展 | 第14-19页 |
| ·RNAi现象及其系统组成 | 第14-15页 |
| ·RNAi现象的发现 | 第14-15页 |
| ·RNAi系统的组成 | 第15页 |
| ·dsRNA和siRNA | 第15页 |
| ·Dicer酶 | 第15页 |
| ·RISC | 第15页 |
| ·RdRP | 第15页 |
| ·RNAi的作用机制及特征 | 第15-17页 |
| ·RNAi的作用机制 | 第15-16页 |
| ·RNAi的作用特点 | 第16-17页 |
| ·RNAi的应用 | 第17-18页 |
| ·RNAi在植物研究中的应用 | 第17页 |
| ·在植物抗病毒研究中的应用 | 第17页 |
| ·在作物品质改良中的应用 | 第17页 |
| ·RNAi在基因治疗领域中的应用 | 第17-18页 |
| ·RNA干扰的应用方法 | 第18页 |
| ·目的片段的选择和干扰载体的构建 | 第18页 |
| ·植物中RNAi载体的导入方法 | 第18页 |
| ·RNAi的优缺点 | 第18页 |
| ·前景展望 | 第18-19页 |
| 4.油菜遗传转化研究进展 | 第19-22页 |
| ·农杆菌介导法 | 第19-20页 |
| ·种质系统介导法 | 第20页 |
| ·直接导入法 | 第20-22页 |
| ·化学导入法 | 第20-21页 |
| ·物理导入法 | 第21-22页 |
| 第二章 目的基因片段的克隆与RNA干扰载体的构建 | 第22-34页 |
| 1 材料与方法 | 第22-31页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·试验品种 | 第22页 |
| ·菌株、载体与质粒 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-31页 |
| ·油菜叶片总DNA的提取 | 第22-23页 |
| ·目的基因片段的PCR扩增 | 第23-24页 |
| ·PCR产物回收 | 第24-25页 |
| ·PCR回收产物与T载体的连接 | 第25页 |
| ·T载体转入大肠杆菌DH5α | 第25-26页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备 | 第25-26页 |
| ·连接产物的转化 | 第26页 |
| ·质粒的提取 | 第26-27页 |
| ·RNA干扰载体的构建 | 第27-30页 |
| ·干扰片段反向插入pFGC5941.Na质粒 | 第27-29页 |
| ·扰片段正向插入带有反向干扰片段的pFGC5941.Na质粒 | 第29-30页 |
| ·工程菌转化 | 第30-31页 |
| ·热激法转化大肠杆菌 | 第30页 |
| ·冻熔法转化根癌农杆菌 | 第30-31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-34页 |
| ·目的片段PCR扩增检测结果 | 第31页 |
| ·菌落PCR检测结果 | 第31-32页 |
| ·干扰载体的验证结果 | 第32页 |
| ·质粒转入农杆菌菌落PCR检测 | 第32-34页 |
| 第三章 甘蓝型油菜湘油15的遗传转化及转化子的筛选 | 第34-42页 |
| 1 材料与方法 | 第34-39页 |
| ·材料 | 第34-36页 |
| ·供试品种 | 第34页 |
| ·菌株和载体 | 第34页 |
| ·培养基 | 第34-36页 |
| ·YEB培养基 | 第35页 |
| ·MS培养基 | 第35-36页 |
| ·PPT稀释液 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-39页 |
| ·外植体的准备 | 第36页 |
| ·种子灭菌 | 第36页 |
| ·无菌苗的培养 | 第36页 |
| ·外植体的获取 | 第36页 |
| ·预培养 | 第36页 |
| ·根癌农杆菌工作液的准备 | 第36-37页 |
| ·农杆菌侵染外植体 | 第37页 |
| ·PPT浓度筛选 | 第37页 |
| ·诱导生根和移栽 | 第37-38页 |
| ·转化子的筛选 | 第38-39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-42页 |
| ·培养供筛选用试管苗 | 第39-40页 |
| ·PPT浓度梯度筛选 | 第40-42页 |
| 第四章 讨论 | 第42-44页 |
| 1 载体构建部分 | 第42-43页 |
| ·引物的设计 | 第42页 |
| ·干扰载体的验证 | 第42-43页 |
| 2 甘蓝型油菜湘油15的转化再生体系 | 第43-44页 |
| ·外植体的选择 | 第43页 |
| ·PPT的筛选 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 作者简介 | 第51页 |