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利用抑制消减杂交技术分离油菜抗菌核病基因

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
第一章 文献综述第10-23页
 1. 油菜菌核病抗病育种研究进展第10-12页
 2. 病原菌其生物学特性及侵染过程第12-13页
   ·病原菌生物学特性第12页
   ·菌核菌侵染方式及过程第12-13页
   ·菌核菌的致病机制第13页
 3. 油菜的抗病机理第13-14页
   ·预存防卫系统和诱导防卫系统第13-14页
   ·避病第14页
 4. 油菜抗菌核病育种途径第14-16页
   ·无花瓣育种和诱导抗性育种第14-15页
   ·杂交育种第15页
   ·组织培养育种第15页
   ·蛋白质组学研究第15-16页
 5. 牙签接种法第16页
 6. 抑制消减杂交(Suppression Subtractive Hybridization,SSH)第16-22页
   ·SSH的原理第16-18页
   ·SSH的主要流程第18页
   ·SSH技术的优、缺点第18-19页
     ·SSH技术的优点第18页
     ·SSH技术的缺点第18-19页
   ·SSH技术的应用第19-22页
     ·SSH技术在植物生长发育过程中的应用第19-20页
     ·SSH技术在作物抗病育种研究中的应用第20-21页
     ·SSH技术在非生物逆境胁迫中基因表达的应用第21-22页
 7. 反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)第22-23页
第二章 牙签接种法鉴定油菜品种菌核病抗性等级第23-29页
 1. 材料与方法第23-27页
   ·实验所用材料第23页
   ·实验所用试剂和仪器第23页
   ·实验方法与数据处理第23-27页
     ·实验方法第23-26页
    PDA固体培养基的制备第23-24页
    菌丝牙签的制作第24-25页
    田间接种第25-26页
     ·数据处理第26-27页
    病情指数分级第26页
    病情指数计算第26-27页
 2 结果与分析第27-29页
   ·实验结果第27页
   ·实验结果分析第27-29页
第三章 抑制消减杂交构建油菜抗菌核病文库第29-46页
 1. 材料与方法第29-40页
   ·实验所用材料第29页
   ·实验所用试剂和仪器第29-30页
     ·主要试剂第29页
     ·主要仪器第29-30页
   ·实验方法第30-40页
     ·菌核菌菌丝的培养及接种第30页
     ·总RNA提取第30-32页
     ·抑制消减杂交第32-37页
     ·正向消减文库的构建第37-38页
     ·差异表达基因cDNA片段的测序和分析第38-39页
     ·差异表达基因的RT-PCR第39-40页
 2 实验结果与分析第40-46页
   ·实验结果第40-45页
     ·RNA提取结果第40页
     ·cDNA的合成第40-41页
     ·抑制消减杂交第41页
     ·消减文库的构建第41-42页
     ·RT-PCR扩增第42页
     ·测序结果及部分片段的序列第42-45页
   ·结论第45-46页
第四章 讨论第46-50页
 1. 油菜与菌核菌之间的相互作用第46页
 2. 抑制消减杂交(SSH)第46-47页
 3. RT-PCR第47页
 4. 部分已知功能的cDNA片段分析第47-50页
参考文献第50-56页
致谢第56-57页
作者简介第57页

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