| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 主要符号表 | 第14-15页 |
| 第1章 绪论 | 第15-25页 |
| 1.1 基因治疗 | 第15-17页 |
| 1.1.1 基因治疗的概述 | 第15页 |
| 1.1.2 microRNA治疗 | 第15-16页 |
| 1.1.3 基因载体的种类 | 第16-17页 |
| 1.2 MIR-21、MIR-221和PTEN基因 | 第17-19页 |
| 1.2.1 miR-21的介绍 | 第17-18页 |
| 1.2.2 miR-221的介绍 | 第18页 |
| 1.2.3 PTEN基因的介绍 | 第18-19页 |
| 1.3 银纳米簇 | 第19-21页 |
| 1.3.1 银纳米簇简介 | 第19-20页 |
| 1.3.2 银纳米簇的合成 | 第20页 |
| 1.3.3 银纳米簇的应用 | 第20-21页 |
| 1.4 聚乙烯亚胺(PEI)用于基因载体的研究 | 第21-23页 |
| 1.4.1 PEI的基本性质 | 第21页 |
| 1.4.2 影响PEI转染效率的参数 | 第21-22页 |
| 1.4.3 PEI的作用机理 | 第22页 |
| 1.4.4 PEI最新研究进展 | 第22-23页 |
| 1.5 本文的研究内容和意义 | 第23-25页 |
| 第2章 材料与方法 | 第25-42页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-29页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第25页 |
| 2.1.2 细菌菌株 | 第25页 |
| 2.1.3 质粒 | 第25页 |
| 2.1.4 仪器设备 | 第25-26页 |
| 2.1.5 试剂及耗材 | 第26-27页 |
| 2.1.6 所用试剂的配制 | 第27-29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-42页 |
| 2.2.1 聚乙烯亚胺银簇(PEI-AgNC)的制备 | 第29-30页 |
| 2.2.2 PEI-AgNCs特性研究 | 第30页 |
| 2.2.3 细胞培养及基因转染 | 第30-31页 |
| 2.2.4 凝胶阻滞电泳实验 | 第31页 |
| 2.2.5 原子力显微镜检测PEI-AgNCs/DNA复合物的特性 | 第31-32页 |
| 2.2.6 细胞存活率的检测(MTT法) | 第32页 |
| 2.2.7 绿色荧光蛋白质粒DNA转染效率的评价 | 第32-34页 |
| 2.2.8 TaqMan探针法检测microRNA的表达水平 | 第34-36页 |
| 2.2.9 miRNA mimics转染效率的评价 | 第36页 |
| 2.2.10 Western Blotting检测蛋白表达量 | 第36-40页 |
| 2.2.11 共聚焦显微镜检测PEI-AgNCs在细胞成像方面的研究 | 第40页 |
| 2.2.12 抗菌实验 | 第40-41页 |
| 2.2.13 实验数据的处理 | 第41-42页 |
| 第3章 实验结果及分析 | 第42-53页 |
| 3.1 PEI-AGNCS的合成及性质研究 | 第42-44页 |
| 3.1.1 PEI-AgNCs合成条件的优化 | 第42-43页 |
| 3.1.2 PEI-AgNCs的性质研究 | 第43-44页 |
| 3.2 凝胶阻滞实验及PEI-AGNCs/DNA复合物的特性 | 第44-45页 |
| 3.2.1 凝胶电泳阻滞实验 | 第44页 |
| 3.2.2 PEI-AgNCs/DNA复合物的特性 | 第44-45页 |
| 3.3 PEI-AGNCS的毒性实验 | 第45-46页 |
| 3.4 绿色荧光蛋白报告基因的表达 | 第46-47页 |
| 3.5 体外MIR-21/221的表达 | 第47-50页 |
| 3.5.1 荧光定量PCR检测细胞内miRNA的表达 | 第47-48页 |
| 3.5.2 荧光素标记法检测PEI-AgNCs的转染效率 | 第48-50页 |
| 3.5.3 Western Blotting检测PTEN蛋白表达 | 第50页 |
| 3.6 检测PEI-AGNCS的抗菌活性 | 第50-51页 |
| 3.7 共聚焦显微镜检测PEI-AGNCS在细胞成像方面的研究 | 第51-53页 |
| 第4章 讨论 | 第53-57页 |
| 参考文献 | 第57-65页 |
| 附录 | 第65-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
