中文摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
前言 | 第10-11页 |
第一部分 实验材料 | 第11-14页 |
1.1 研究对象 | 第11-12页 |
1.2 主要实验试剂 | 第12-13页 |
1.3 主要仪器 | 第13页 |
1.4 实验试剂配制 | 第13-14页 |
第二部分 实验方法 | 第14-27页 |
2.1 实验前准备 | 第14页 |
2.2 SD大鼠髓核细胞分离获取、接种与观察 | 第14-15页 |
2.3 髓核间质干细胞传代培养、换液 | 第15页 |
2.4 髓核间质干细胞的冻存 | 第15页 |
2.5 髓核间质干细胞的复苏 | 第15-16页 |
2.6 流式细胞术鉴定鼠NP-MSC的细胞表面标记物 | 第16页 |
2.6.1 实验原理 | 第16页 |
2.6.2 实验步骤 | 第16页 |
2.7 RT-PCR检测鼠NP-MSC的干细胞基因表达 | 第16-19页 |
2.7.1 实验原理 | 第17页 |
2.7.2 RT-PCR过程 | 第17-19页 |
2.8 NPMSC的诱导分化培养 | 第19-23页 |
2.8.1 实验原理 | 第19-20页 |
2.8.2 成骨分化 | 第20页 |
2.8.3 成脂肪分化 | 第20-21页 |
2.8.4 成软骨分化 | 第21-23页 |
2.9 CCK-8检测IL-1β作用于NPMSC的最佳作用浓度与作用时间 | 第23页 |
2.9.1 实验原理 | 第23页 |
2.9.2 实验步骤 | 第23页 |
2.10 流式细胞仪检测细胞凋亡率 | 第23-24页 |
2.10.1 实验原理 | 第23-24页 |
2.10.2 实验步骤 | 第24页 |
2.11 实时荧光定量PCR检测NPMSC的Ⅱ型胶原、蛋白多糖、SOX9的mRNA表达变化 | 第24-26页 |
2.11.1 实验原理 | 第24页 |
2.11.2 RNA的提取 | 第24-25页 |
2.11.3 cDNA 的合成 | 第25页 |
2.11.4 荧光定量PCR检测 | 第25-26页 |
2.12 统计学分析 | 第26-27页 |
第三部分 实验结果 | 第27-32页 |
3.1 NPMSC的分离与培养 | 第27页 |
3.2 髓核间质干细胞鉴定 | 第27-30页 |
3.3 IL-1β对NPMSC的增殖活性的影响 | 第30页 |
3.4 IL-1β对NPMSC凋亡的影响 | 第30-31页 |
3.5 RT-PCR检测髓核间质干细胞mRNA表达变化 | 第31-32页 |
第四部分 讨论 | 第32-33页 |
第五部分 实验结论 | 第33页 |
参考文献 | 第33-37页 |
综述 | 第37-42页 |
参考文献 | 第39-42页 |
个人简介 | 第42-43页 |
致谢 | 第43页 |