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酸浆宿萼总皂苷对人肝癌细胞抑制机理

摘要第8-9页
前言第9-15页
    1 酸浆的研究进展第9页
        1.1 酸浆的概述第9页
        1.2 酸浆生物活性第9页
    2 皂苷的研究进展第9-12页
        2.1 皂苷的概述第9-10页
        2.2 皂苷的生物活性第10-12页
            2.2.1 抗炎活性第10页
            2.2.2 降血脂活性第10-11页
            2.2.3 抗菌和抗病毒活性第11页
            2.2.4 抗肿瘤活性第11-12页
        2.3 皂苷潜在的负面影响第12页
    3 细胞凋亡第12-13页
    4 本课题研究的目的和意义第13-14页
    5 技术路线第14-15页
第一章 酸浆宿萼总皂苷对SMMC-7721肝癌细胞增殖抑制的作用第15-25页
    1 实验材料第15-17页
        1.1 实验细胞第15页
        1.2 主要试剂及材料第15页
        1.3 主要仪器第15-16页
        1.4 主要试剂的配制第16-17页
    2 实验方法第17-19页
        2.1 SMMC-7721肝癌细胞培养第17-18页
            2.1.1 SMMC-7721肝癌细胞的复苏第17页
            2.1.2 SMMC-7721肝癌细胞的传代第17页
            2.1.3 SMMC-7721肝癌细胞的计数第17页
            2.1.4 SMMC-7721肝癌细胞的冻存第17-18页
        2.2 MTT实验第18页
        2.3 Annexin V-EGFP实验第18-19页
    3 实验结果第19-24页
        3.1 TSP不同时间对SMMC-7721肝癌细胞活力的抑制第19-22页
            3.1.1 TSP作用24h对SMMC-7721肝癌细胞活力的抑制第19-20页
            3.1.2 TSP作用48h对SMMC细胞活力的影响第20-21页
            3.1.3 TSP作用72h对SMMC细胞活力的影响第21-22页
        3.2 TSP诱导SMMC-7721肝癌细胞凋亡第22-24页
            3.2.1 TSP诱导SMMC-7721肝癌细胞凋亡第22-23页
            3.2.2 TSP作用不同时间对SMMC细胞凋亡的影响第23-24页
    4 结论第24-25页
第二章 酸浆宿萼总皂苷对人肝癌细胞生长的抑制相关基因表达的作用第25-41页
    1 实验材料第25-26页
        1.1 实验细胞第25页
        1.2 主要试剂第25-26页
        1.3 主要仪器第26页
    2 实验方法第26-30页
        2.1 实验细胞的分组与处理第26页
        2.2 RNA的提取与纯度鉴定第26-27页
            2.2.1 RNA提取前实验耗材预处理第26-27页
            2.2.2 RNA的提取第27页
            2.2.3 RNA浓度分析第27页
            2.2.4 RNA纯度分析第27页
        2.3 聚合酶链式反应(RT-PCR)第27-30页
            2.3.1 反转录反应第27-28页
            2.3.2 反转录的PCR扩增第28-29页
            2.3.3 数据处理与分析第29-30页
    3 实验结果第30-40页
        3.1 RNA纯度及浓度的检测第30页
        3.2 普通PCR电泳验证目的基因的片段第30-31页
        3.3 荧光定量PCR检测结果第31-35页
            3.3.1 目的基因标准曲线的建立第31-33页
            3.3.2 目的基因的扩增动力学和熔解曲线第33-35页
        3.4 TSP对SMMC细胞中目的基因mRNA活性的影响第35-40页
            3.4.1 TSP对apaf-1基因mRNA表达量的影响第35-36页
            3.4.2 TSP对caspase-9基因mRNA表达量的影响第36-37页
            3.4.3 TSP对caspase-3基因mRNA表达量的影响第37-38页
            3.4.4 TSP对细胞色素CmRNA表达量的影响第38-39页
            3.4.5 TSP对p53基因mRNA表达量的影响第39-40页
            3.4.6 TSP对Bax基因mRNA表达的影响第40页
    4 结论第40-41页
第三章 TSP对SMMC-7721肝癌细胞增殖抑制相关蛋白活性的变化第41-49页
    1 实验材料第41-42页
        1.1 实验细胞第41页
        1.2 主要试剂第41-42页
        1.3 实验仪器第42页
    2 实验方法第42-45页
        2.1 实验细胞的分组与处理第42页
        2.2 细胞总蛋白的提取与浓度测定第42-43页
            2.2.1 细胞总蛋白的提取第42页
            2.2.2 BCA法测定蛋白浓度第42页
            2.2.3 蛋白样品的处理第42-43页
        2.3 所提蛋白的SDS-PAGE电泳第43页
        2.4 Western Blot第43-45页
            2.4.1 Western Blot试剂的配制第43页
            2.4.2 十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第43-44页
            2.4.3 转膜第44页
            2.4.4 免疫反应第44-45页
            2.4.5 显色与曝光第45页
            2.4.6 数据分析第45页
    3 实验结果第45-48页
        3.1 BCA蛋白浓度测定结果第45-46页
        3.2 蛋白免疫印迹结果第46-48页
            3.2.1 caspase-3蛋白表达量第46-47页
            3.2.2 细胞色素C蛋白表达量第47-48页
    4 结论第48-49页
全文讨论与结论第49-51页
参考文献第51-56页
Abstract第56-57页
致谢第58页

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