| 中文摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 符号说明 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-21页 |
| 1 G蛋白偶联受体研究进展 | 第10-13页 |
| 1.1 GPCR的分类 | 第10页 |
| 1.2 GPCR的结构 | 第10-11页 |
| 1.3 GPCR研究现状 | 第11-12页 |
| 1.4 GPCR的异源表达 | 第12-13页 |
| 2 β2受体及其激动剂的研究进展 | 第13-16页 |
| 2.1 β2受体研究进展 | 第13页 |
| 2.2 β2受体激动剂研究进展 | 第13-16页 |
| 3 β2受体激动剂残留现状 | 第16-18页 |
| 3.1 色谱法检测β2受体激动剂残留 | 第17-18页 |
| 3.2 免疫学方法检测β2受体激动剂残留 | 第18页 |
| 4 受体分析法检测兽药残留 | 第18-19页 |
| 4.1 受体概述 | 第18-19页 |
| 4.2 受体分析法概述 | 第19页 |
| 4.3 受体分析应用于β受体激动剂检测 | 第19页 |
| 5 本研究的目的及意义 | 第19-21页 |
| 第二章 猪β2受体基因及其突变体真核表达载体的构建 | 第21-40页 |
| 1 试验材料 | 第21-23页 |
| 1.1 主要仪器设备 | 第21页 |
| 1.2 主要试剂 | 第21-22页 |
| 1.3 主要溶液的配置 | 第22-23页 |
| 2 试验方法 | 第23-32页 |
| 2.1 β2AR基因的克隆及其真核表达载体的构建 | 第23-27页 |
| 2.2 阳性克隆的质粒大提 | 第27-28页 |
| 2.3 β2AR突变体的构建 | 第28-29页 |
| 2.4 HEK293T细胞的复苏、传代培养与铺板 | 第29页 |
| 2.5 真核表达载体及突变体转染HEK293T细胞 | 第29-30页 |
| 2.6 Western blot鉴定真核表达载体和突变体在HEK293T中的表达 | 第30-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-36页 |
| 3.1 猪β2AR基因的PCR扩增结果 | 第32页 |
| 3.2 克隆质粒的菌落PCR鉴定 | 第32-33页 |
| 3.3 克隆质粒的双酶切鉴定 | 第33页 |
| 3.4 β2AR突变体的测序鉴定 | 第33-35页 |
| 3.5 Western blot鉴定真核表达载体和突变体在HEK293T中的表达 | 第35-36页 |
| 4 讨论 | 第36-38页 |
| 4.1 β2AR基因在不同的表达系统中的研究 | 第36-37页 |
| 4.2 β2AR真核表达载体的构建 | 第37页 |
| 4.3 突变位点的选择 | 第37-38页 |
| 4.4 PCR介导的定点突变 | 第38页 |
| 4.5 Western blotting检测蛋白表达水平 | 第38页 |
| 5 小结 | 第38-40页 |
| 第三章 不同配体对β2AR野生型及其突变体的MAPK、PKA信号通路相关蛋白磷酸化的影响 | 第40-64页 |
| 1 实验材料 | 第40-42页 |
| 1.1 主要仪器设备 | 第40-41页 |
| 1.2 主要试剂 | 第41页 |
| 1.3 主要溶液的配制 | 第41-42页 |
| 2 试验方法 | 第42-45页 |
| 2.1 野生型和突变体β2AR转染HEK293T细胞 | 第42页 |
| 2.2 目的蛋白的制备和提取 | 第42页 |
| 2.3 SNAP i.d. 2.0 Protein Detection System的使用 | 第42-43页 |
| 2.4 不同时间下在异丙肾上腺素刺激下ERK1/2磷酸化水平变化情况 | 第43页 |
| 2.5 不同激动剂刺激下ERK1/2,p38,JNK1/2,CREB磷酸化水平变化情况 | 第43-44页 |
| 2.6 普萘洛尔刺激下ERK1/2,p38,JNK1/2, CREB磷酸化水平变化情况 | 第44页 |
| 2.7 沙丁胺醇、普萘洛尔共作用下ERK1/2磷酸化水平变化情况 | 第44页 |
| 2.8 数据处理及分析 | 第44-45页 |
| 3 实验结果 | 第45-61页 |
| 3.1 不同时间下在异丙肾上腺素刺激下ERK1/2磷酸化水平变化情况 | 第45-53页 |
| 3.2 不同激动剂刺激下ERK1/2,p38,JNK1/2,CREB磷酸化水平变化情况 | 第53-61页 |
| 4 讨论 | 第61-63页 |
| 4.1 β2受体激动剂与MAPK信号通路的关系 | 第61-62页 |
| 4.2 β2受体激动剂与PKA信号通路的关系 | 第62页 |
| 4.3 β2受体活性与突变体之间的联系 | 第62-63页 |
| 5 小结 | 第63-64页 |
| 全文小结 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 在读期间发表的文章 | 第71-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
