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别藻蓝蛋白的生物合成及其稳定性研究

摘要第3-5页
Abstract第5-7页
第1章 前言第11-25页
    1.1 序言第11-12页
    1.2 藻胆体第12-13页
    1.3 藻胆蛋白第13-15页
    1.4 连接蛋白第15-16页
    1.5 别藻蓝蛋白第16-21页
        1.5.1 别藻蓝蛋白的组装第16-19页
        1.5.2 别藻蓝蛋白的重组表达第19-21页
    1.6 本论文研究内容和意义第21-25页
第2章 响应面法优化重组大肠杆菌生物合成别藻蓝蛋白(holo-apcA)的发酵条件第25-54页
    2.1 实验材料与仪器设备第26-28页
        2.1.1 实验材料第26-27页
        2.1.2 主要仪器与试剂第27-28页
    2.2 试验方法第28-39页
        2.2.1 试验设计第28-33页
        2.2.2 α亚基表达体 (holo-apcA) 同等活力菌种的制备与保存第33-34页
        2.2.3 重组别藻蓝蛋白在大肠杆菌体内的诱导表达第34页
        2.2.4 重组别藻蓝蛋白的分离与纯化第34-36页
        2.2.5 荧光强度的测定第36页
        2.2.6 紫外光谱的测定第36页
        2.2.7 蛋白浓度测定方法第36-38页
        2.2.8 响应面(CCD)分析法第38-39页
    2.3 结果与分析第39-52页
        2.3.1 预试验第39-41页
        2.3.2 单因素试验第41-43页
        2.3.3 培养基优化中心组合设计试验第43-45页
        2.3.4 发酵条件优化中心组合设计试验第45-51页
        2.3.5 外界条件优化验证试验结果与分析第51-52页
    2.4 讨论第52-54页
第3章 嗜热藻 BP-1 重组别藻蓝蛋白β亚基耐热性机制研究第54-67页
    3.1 实验材料与仪器设备第55-56页
        3.1.1 实验材料第55页
        3.1.2 主要仪器与试剂第55-56页
    3.2 试验方法第56-60页
        3.2.1 试验材料的制备第56-60页
        3.2.2 重组别藻蓝蛋白的分离与纯化第60页
        3.2.3 荧光强度的测定第60页
        3.2.4 紫外光谱的测定第60页
        3.2.5 热稳定性分析第60页
    3.3 结果与分析第60-65页
        3.3.1 嗜热藻 BP-1 与集胞藻 6803 重组别藻蓝蛋白β亚基氨基酸序列比对结果与分析第60-62页
        3.3.2 嗜热藻 BP-1 与集胞藻 6803 重组别藻蓝蛋白β亚基差异位点定点突变结果及表达蛋白特性测定第62-63页
        3.3.3 嗜热藻 BP-1 与集胞藻 6803 重组别藻蓝蛋白β亚基及定点突变体热稳定性测定第63-65页
    3.4 讨论第65-67页
第4章 色基结合率与别藻蓝蛋白稳定性的相关性研究第67-103页
    4.1 实验材料与仪器设备第67-72页
        4.1.1 实验材料第67-70页
        4.1.2 主要仪器与试剂第70-72页
    4.2 试验方法第72-81页
        4.2.1 试验设计第72-76页
        4.2.2 试验材料的制备第76-77页
        4.2.3 重组别藻蓝蛋白的分离与纯化第77页
        4.2.4 天然别藻蓝蛋白的分离与纯化第77-79页
        4.2.5 荧光强度的测定第79页
        4.2.6 紫外光谱的测定第79页
        4.2.7 蛋白浓度测定方法第79页
        4.2.8 摩尔消光系数与荧光量子产率的测定第79-80页
        4.2.9 分子筛法测定蛋白分子量第80-81页
    4.3 结果与分析第81-100页
        4.3.1 重组别藻蓝蛋白的色基结合率第81-82页
        4.3.2 不同来源裂合酶催化效果比较第82-84页
        4.3.3 体外催化合成第84-91页
        4.3.4 体外自组装第91-92页
        4.3.5 不同色基结合率的重组别藻蓝蛋白三聚体稳定性分析第92-100页
    4.4 讨论第100-103页
第5章 结论与建议第103-106页
    5.1 结论第103-104页
    5.2 创新点第104页
    5.3 意义第104页
    5.4 建议第104-106页
参考文献第106-113页
论文发表情况第113-114页
致谢第114页

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