摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
第1章 前言 | 第11-25页 |
1.1 序言 | 第11-12页 |
1.2 藻胆体 | 第12-13页 |
1.3 藻胆蛋白 | 第13-15页 |
1.4 连接蛋白 | 第15-16页 |
1.5 别藻蓝蛋白 | 第16-21页 |
1.5.1 别藻蓝蛋白的组装 | 第16-19页 |
1.5.2 别藻蓝蛋白的重组表达 | 第19-21页 |
1.6 本论文研究内容和意义 | 第21-25页 |
第2章 响应面法优化重组大肠杆菌生物合成别藻蓝蛋白(holo-apcA)的发酵条件 | 第25-54页 |
2.1 实验材料与仪器设备 | 第26-28页 |
2.1.1 实验材料 | 第26-27页 |
2.1.2 主要仪器与试剂 | 第27-28页 |
2.2 试验方法 | 第28-39页 |
2.2.1 试验设计 | 第28-33页 |
2.2.2 α亚基表达体 (holo-apcA) 同等活力菌种的制备与保存 | 第33-34页 |
2.2.3 重组别藻蓝蛋白在大肠杆菌体内的诱导表达 | 第34页 |
2.2.4 重组别藻蓝蛋白的分离与纯化 | 第34-36页 |
2.2.5 荧光强度的测定 | 第36页 |
2.2.6 紫外光谱的测定 | 第36页 |
2.2.7 蛋白浓度测定方法 | 第36-38页 |
2.2.8 响应面(CCD)分析法 | 第38-39页 |
2.3 结果与分析 | 第39-52页 |
2.3.1 预试验 | 第39-41页 |
2.3.2 单因素试验 | 第41-43页 |
2.3.3 培养基优化中心组合设计试验 | 第43-45页 |
2.3.4 发酵条件优化中心组合设计试验 | 第45-51页 |
2.3.5 外界条件优化验证试验结果与分析 | 第51-52页 |
2.4 讨论 | 第52-54页 |
第3章 嗜热藻 BP-1 重组别藻蓝蛋白β亚基耐热性机制研究 | 第54-67页 |
3.1 实验材料与仪器设备 | 第55-56页 |
3.1.1 实验材料 | 第55页 |
3.1.2 主要仪器与试剂 | 第55-56页 |
3.2 试验方法 | 第56-60页 |
3.2.1 试验材料的制备 | 第56-60页 |
3.2.2 重组别藻蓝蛋白的分离与纯化 | 第60页 |
3.2.3 荧光强度的测定 | 第60页 |
3.2.4 紫外光谱的测定 | 第60页 |
3.2.5 热稳定性分析 | 第60页 |
3.3 结果与分析 | 第60-65页 |
3.3.1 嗜热藻 BP-1 与集胞藻 6803 重组别藻蓝蛋白β亚基氨基酸序列比对结果与分析 | 第60-62页 |
3.3.2 嗜热藻 BP-1 与集胞藻 6803 重组别藻蓝蛋白β亚基差异位点定点突变结果及表达蛋白特性测定 | 第62-63页 |
3.3.3 嗜热藻 BP-1 与集胞藻 6803 重组别藻蓝蛋白β亚基及定点突变体热稳定性测定 | 第63-65页 |
3.4 讨论 | 第65-67页 |
第4章 色基结合率与别藻蓝蛋白稳定性的相关性研究 | 第67-103页 |
4.1 实验材料与仪器设备 | 第67-72页 |
4.1.1 实验材料 | 第67-70页 |
4.1.2 主要仪器与试剂 | 第70-72页 |
4.2 试验方法 | 第72-81页 |
4.2.1 试验设计 | 第72-76页 |
4.2.2 试验材料的制备 | 第76-77页 |
4.2.3 重组别藻蓝蛋白的分离与纯化 | 第77页 |
4.2.4 天然别藻蓝蛋白的分离与纯化 | 第77-79页 |
4.2.5 荧光强度的测定 | 第79页 |
4.2.6 紫外光谱的测定 | 第79页 |
4.2.7 蛋白浓度测定方法 | 第79页 |
4.2.8 摩尔消光系数与荧光量子产率的测定 | 第79-80页 |
4.2.9 分子筛法测定蛋白分子量 | 第80-81页 |
4.3 结果与分析 | 第81-100页 |
4.3.1 重组别藻蓝蛋白的色基结合率 | 第81-82页 |
4.3.2 不同来源裂合酶催化效果比较 | 第82-84页 |
4.3.3 体外催化合成 | 第84-91页 |
4.3.4 体外自组装 | 第91-92页 |
4.3.5 不同色基结合率的重组别藻蓝蛋白三聚体稳定性分析 | 第92-100页 |
4.4 讨论 | 第100-103页 |
第5章 结论与建议 | 第103-106页 |
5.1 结论 | 第103-104页 |
5.2 创新点 | 第104页 |
5.3 意义 | 第104页 |
5.4 建议 | 第104-106页 |
参考文献 | 第106-113页 |
论文发表情况 | 第113-114页 |
致谢 | 第114页 |