| 符号说明 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-19页 |
| 1.1 拟南芥开花调控途径 | 第12页 |
| 1.2 拟南芥种子的发育 | 第12-13页 |
| 1.2.1 种子发育过程中主要有机物质的变化 | 第13页 |
| 1.3 植物乙烯的研究进展 | 第13-16页 |
| 1.3.1 乙烯的生物合成过程 | 第14-15页 |
| 1.3.2 乙烯的生理作用 | 第15-16页 |
| 1.4 拟南芥XBAT31基因功能的研究现状 | 第16-18页 |
| 1.4.1 植物XB3相关基因的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.4.2 拟南芥XBAT31的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.5 本实验的目的意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-36页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第19页 |
| 2.1.2 菌株与质粒 | 第19页 |
| 2.1.3 酶与各种生化试剂 | 第19页 |
| 2.1.4 引物 | 第19-20页 |
| 2.1.5 主要实验仪器 | 第20页 |
| 2.1.6 生物分析软件 | 第20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-36页 |
| 2.2.1 植物基因组的提取 | 第20-21页 |
| 2.2.2 RNA的提取纯化与反转录 | 第21-23页 |
| 2.2.2.1 TRIZOL法提取RNA | 第21页 |
| 2.2.2.2 RNA甲醛变性胶电泳检测 | 第21-22页 |
| 2.2.2.3 RNA浓度测定 | 第22页 |
| 2.2.2.4 RNA中基因组DNA的去除 | 第22-23页 |
| 2.2.2.5 cDNA第一链的合成 | 第23页 |
| 2.2.3 荧光定量PCR | 第23-24页 |
| 2.2.4 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第24页 |
| 2.2.4.1 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第24页 |
| 2.2.4.2 大肠杆菌细胞的转化 | 第24页 |
| 2.2.5 农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第24-25页 |
| 2.2.5.1 根癌农杆菌GV3101感受态细胞的制备 | 第24-25页 |
| 2.2.5.2 冻融法转化农杆菌细胞 | 第25页 |
| 2.2.6 拟南芥的转化及转基因拟南芥的鉴定 | 第25-27页 |
| 2.2.6.1 拟南芥的转化 | 第25-26页 |
| 2.2.6.2 转基因拟南芥的鉴定 | 第26-27页 |
| 2.2.7 拟南芥胚的剥取方法 | 第27页 |
| 2.2.8 质粒DNA的提取 | 第27-28页 |
| 2.2.9 DNA片段的回收 | 第28-29页 |
| 2.2.10 病原菌XCC8004的培养与接种 | 第29-31页 |
| 2.2.10.1 XCC8004黄单胞杆菌的培养 | 第29页 |
| 2.2.10.2 病原菌接种 | 第29-30页 |
| 2.2.10.3 苯胺蓝染色 | 第30-31页 |
| 2.2.11 乙烯三重反应 | 第31页 |
| 2.2.12 TALEN技术敲除基因 | 第31-36页 |
| 2.2.12.1 设计并构建TALEN打靶载体 | 第31-35页 |
| 2.2.12.2 将TALEN左右臂亚克隆至植物表达载体pCAMBIA 2300EC上并转化 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-49页 |
| 3.1 拟南芥XBAT31同源基因的进化关系分析 | 第36页 |
| 3.2 XBAT31基因RNAi株系鉴定 | 第36-37页 |
| 3.3 拟南芥XBAT31对XCC8004的免疫反应 | 第37-38页 |
| 3.4 XBAT31基因RNAi株系的生理表型鉴定 | 第38-43页 |
| 3.4.1 XBAT31基因RNAi株系开花期提前 | 第38-39页 |
| 3.4.1.1 XBAT31基因RNAi株系抽薹时间提前 | 第38-39页 |
| 3.4.1.2 XBAT31基因RNAi株系莲座叶数目减少 | 第39页 |
| 3.4.2 XBAT31基因RNAi株系莲座叶盘的面积变小 | 第39-40页 |
| 3.4.3 XBAT31基因RNAi株系株高降低 | 第40-41页 |
| 3.4.4 XBAT31基因RNAi株系的长角果数目减少 | 第41页 |
| 3.4.5 XBAT31基因RNAi株系长角果表型分析 | 第41-42页 |
| 3.4.6 XBAT31基因RNAi株系种子性状分析 | 第42-43页 |
| 3.5 XBAT31参与了乙烯信号传导途径 | 第43-46页 |
| 3.5.1 XBAT31基因RNAi株系的幼苗顶端弯钩角度 | 第44-45页 |
| 3.5.2 XBAT31基因RNAi株系的幼苗下胚轴长度 | 第45-46页 |
| 3.5.3 XBAT31基因RNAi株系的幼苗根长 | 第46页 |
| 3.6 TALEN技术敲除基因XBAT31 | 第46-49页 |
| 3.6.1 目的基因序列选择 | 第47页 |
| 3.6.2 构建TALEN打靶载体 | 第47-48页 |
| 3.6.3 将TALEN左右臂亚克隆至植物表达载体pCAMBIA 2300EC上 | 第48-49页 |
| 4 讨论 | 第49-51页 |
| 5 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第59页 |
