引言 | 第4-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
英文缩略语 | 第10-15页 |
第一部分:人不同主动脉疾病主动脉组织标本中LOX和microRNA-30a的表达差异 | 第15-34页 |
1 前言 | 第15-17页 |
2 材料与方法 | 第17-28页 |
2.1 实验标本采取及保存 | 第17页 |
2.2 HE染色材料及方法 | 第17-19页 |
2.2.1 主要仪器 | 第17页 |
2.2.2 主要试剂 | 第17页 |
2.2.3 试验方法 | 第17-19页 |
2.3 Verheoff弹力纤维染色染色(EVG染色) | 第19-21页 |
2.3.1 主要仪器试剂 | 第19-20页 |
2.3.2 实验步骤 | 第20-21页 |
2.4 免疫组化分析 | 第21-23页 |
2.4.1 主要仪器 | 第21-22页 |
2.4.4 实验方法 | 第22-23页 |
2.5 qRT-PCR检测miR30a的表达 | 第23-27页 |
2.5.1 主要仪器 | 第23-24页 |
2.5.2 主要试剂 | 第24页 |
2.5.3 实验内容 | 第24页 |
2.5.4 实验步骤 | 第24-27页 |
2.6 统计学方法 | 第27-28页 |
3 实验结果 | 第28-31页 |
3.1 主动脉标本的采取固定 | 第28页 |
3.2 HE/EVG染色结果 | 第28页 |
3.3 免疫组化结果 | 第28-30页 |
3.4 qRT-PCR测定miR30a在不同组织标本中的表达差异 | 第30-31页 |
4 讨论 | 第31-33页 |
5 结论 | 第33-34页 |
第二部分:Luciferase验证miR30a与LOX的调节关系以及慢病毒转染干扰大鼠胸主动脉平滑肌细胞miR30a表达后LOX及相关蛋白的表达差异 | 第34-58页 |
1 前言 | 第34-35页 |
2 材料与方法 | 第35-50页 |
2.1 细胞培养获取、培养 | 第35-37页 |
2.1.1 主要仪器和试剂 | 第35页 |
2.1.2 实验步骤 | 第35-37页 |
2.2 Luciferase验证miR30a与LOX的调节关系 | 第37页 |
2.3 大鼠胸主动脉平滑肌细胞分组及慢病毒转染 | 第37-39页 |
2.3.1 将大鼠胸主动脉平滑肌细胞按照干预手段和时间点分组为:A~J组 | 第37-38页 |
2.3.2 实验所需主要仪器和试剂 | 第38页 |
2.3.2 实验步骤 | 第38-39页 |
2.4 Western-Blot检测各组大鼠胸主动脉平滑肌细胞干预后的蛋白表达 | 第39-46页 |
2.4.1 实验所用主要仪器和试剂 | 第39-41页 |
2.4.2 实验步骤 | 第41-46页 |
2.5 qRT-PCR检测各组大鼠胸主动脉平滑肌细胞干预后的蛋白表达 | 第46-49页 |
2.5.1 实验主要仪器和试剂 | 第46页 |
2.5.2 实验步骤 | 第46-47页 |
2.5.3 实验步骤 | 第47-49页 |
2.6 统计学方法 | 第49-50页 |
3 实验结果 | 第50-55页 |
3.1 大鼠胸主动脉平滑肌细胞的培养和转染 | 第50-51页 |
3.2 Luciferase验证miR30a与LOX的调节关系 | 第51页 |
3.3 各组大鼠胸主动脉平滑肌细胞接受慢病毒干预后的miR30a表达的qRT-PCR检测 | 第51-52页 |
3.4 各组大鼠胸主动脉平滑肌细胞接受慢病毒干预后LOX等相关蛋白表达的Western-Blot检测及qRT-PCR检测 | 第52-55页 |
4 讨论 | 第55-57页 |
5 结论 | 第57-58页 |
第三部分:慢病毒转染调节大鼠主动脉miR30a表达后大鼠主动脉夹层模型建成率和LOX及相关蛋白的表达变化 | 第58-70页 |
1 前言 | 第58-59页 |
2 实验动物、材料和方法 | 第59-62页 |
2.1 实验动物的分组和干预 | 第59-60页 |
2.2 大鼠主动脉CTA检查和后处理 | 第60页 |
2.3 大鼠主动脉DSA造影 | 第60页 |
2.4 Western-Blot检测各组大鼠主动脉组织内LOX的表达 | 第60页 |
2.5 qRT-PCR检测各组大鼠主动脉内miR30a的表达 | 第60页 |
2.6 统计学方法 | 第60-62页 |
3 实验结果 | 第62-68页 |
3.1 大鼠皮下植入微量控释泵(Alzet mini-osmotic pump model 2001D)及血压监测 | 第62-63页 |
3.2 经大鼠主动脉行大鼠主动脉造影和大鼠主动脉CTA检查后取大鼠主动脉标本,观察主动脉夹层模型建模情况 | 第63-66页 |
3.3 Western-Blot检测各组大鼠主动脉内LOX表达差异 | 第66-67页 |
3.4 qRT-PCR检测各组大鼠主动脉内miR30a表达差异 | 第67-68页 |
4 讨论 | 第68-69页 |
5 结论 | 第69-70页 |
本研究创新性的自我评价 | 第70-71页 |
参考文献 | 第71-74页 |
综述 | 第74-82页 |
参考文献 | 第77-82页 |
攻读学位期间所取得的研究成果 | 第82-84页 |
致谢 | 第84-85页 |
个人简介 | 第85页 |