摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 文献综述 | 第10-21页 |
1.1 微丝骨架简介 | 第10页 |
1.2 肌动蛋白结合蛋白 | 第10-19页 |
1.2.1 Villins | 第11-13页 |
1.2.2 Formins | 第13-15页 |
1.2.3 Fimbrins | 第15-16页 |
1.2.4 LIMs | 第16-17页 |
1.2.5 SCAB | 第17页 |
1.2.6 MAP | 第17-18页 |
1.2.7 CROLIN | 第18-19页 |
1.3 本研究的目的与意义 | 第19-21页 |
第二章 材料与方法 | 第21-31页 |
2.1 实验材料 | 第21-22页 |
2.1.1 植物材料 | 第21页 |
2.1.2 菌株与载体 | 第21页 |
2.1.3 酶与试剂 | 第21页 |
2.1.4 常用溶液 | 第21-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-31页 |
2.2.1 植物材料的培养 | 第22页 |
2.2.2 DNA的提取:CTAB法与粗提法 | 第22-23页 |
2.2.3 T-DNA插入突变体的鉴定 | 第23-24页 |
2.2.4 PCR | 第24页 |
2.2.5 RNA提取及反转录 | 第24-25页 |
2.2.6 RT-PCR | 第25页 |
2.2.7 DNA片段的回收 | 第25页 |
2.2.8 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第25页 |
2.2.9 大肠杆菌的质粒提取 | 第25-26页 |
2.2.10 农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第26页 |
2.2.11 浸花法 | 第26-27页 |
2.2.12 载体构建相关 | 第27页 |
2.2.13 转基因植物的筛选 | 第27页 |
2.2.14 组织定位染色 | 第27-28页 |
2.2.15 相关胁迫处理 | 第28-29页 |
2.2.16 蛋白预诱导 | 第29-31页 |
第三章 结果与分析 | 第31-55页 |
3.1 拟南芥官网预测V-CROLINs对非生物胁迫的响应 | 第31-33页 |
3.2 拟南芥V-CROLINs的组织定位 | 第33-34页 |
3.3 V-CROLINsT-DNA插入突变体生理功能的研究 | 第34-38页 |
3.3.1 T-DNA插入突变体的鉴定 | 第34-36页 |
3.3.2 crolin3crolin5双突纯合鉴定 | 第36页 |
3.3.3 UV-B辐射对拟南芥crolin3crolin5双突的影响 | 第36-38页 |
3.4 V-CROLINsRNAi株系生理功能的研究 | 第38-47页 |
3.4.1 RNAi株系在转录水平基因表达量的鉴定 | 第38-39页 |
3.4.2 RNAi株系根的发育 | 第39-40页 |
3.4.3 RNAi株系下胚轴的发育 | 第40页 |
3.4.4 对RNAi株系进行相关胁迫处理 | 第40-47页 |
3.5 V-CROLINsCRISPR突变体生理功能的研究 | 第47-53页 |
3.5.1 CRISPR载体的构建 | 第47-48页 |
3.5.2 通过CRISPR对V-CROLINs靶点进行编辑 | 第48-53页 |
3.5.3 V-CROLINs纯合株系根的发育 | 第53页 |
3.6 蛋白预诱导 | 第53-55页 |
第四章 讨论与展望 | 第55-58页 |
4.1 讨论 | 第55-57页 |
4.1.1 GUS组织定位染色 | 第55页 |
4.1.2 T-DNA插入突变体的表型探究 | 第55-56页 |
4.1.3 RNAi株系参与非生物胁迫响应 | 第56页 |
4.1.4 通过CRISPR技术获得突变体及表型探究 | 第56-57页 |
4.2 展望 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-65页 |
致谢 | 第65页 |