| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 1 前言 | 第9-18页 |
| 1.1 无乳链球菌国内外研究进展 | 第9-12页 |
| 1.1.1 无乳链球菌的特点 | 第9页 |
| 1.1.2 无乳链球菌致病性的研究进展 | 第9-12页 |
| 1.2 链球菌属sRNAs的研究 | 第12-16页 |
| 1.2.1 链球菌属中预测和鉴定sRNAs的方法 | 第13页 |
| 1.2.2 链球菌sRNAs的多样性 | 第13页 |
| 1.2.3 链球菌属调控网络中的sRNAs | 第13-16页 |
| 1.3 本研究的目的及意义 | 第16-18页 |
| 2 无乳链球菌ZQ0910转录组测序分析 | 第18-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第18页 |
| 2.1.1 菌株 | 第18页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第18页 |
| 2.1.3 主要溶液和培养基 | 第18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-25页 |
| 2.2.1 无乳链球菌ZQ0910生长曲线的制作 | 第18-19页 |
| 2.2.2 菌株活化及培养 | 第19页 |
| 2.2.3 取菌送测 | 第19页 |
| 2.2.4 测序数据分析 | 第19-20页 |
| 2.2.5 比对统计 | 第20页 |
| 2.2.6 基因统计 | 第20-22页 |
| 2.2.7 基因注释及功能预测 | 第22-23页 |
| 2.2.8 sRNA预测 | 第23-25页 |
| 2.3 结果 | 第25-33页 |
| 2.3.1 无乳链球菌ZQ0910总RNA质量检测 | 第25-26页 |
| 2.3.2 无乳链球菌ZQ0910转录组测序结果 | 第26-27页 |
| 2.3.3 样品间差异分析结果 | 第27-29页 |
| 2.3.4 样品间差异基因注释及功能预测 | 第29-33页 |
| 2.4 讨论 | 第33-35页 |
| 3 无乳链球菌ZQ0910毒力相关基因的克隆和验证 | 第35-56页 |
| 3.1 实验材料 | 第35-36页 |
| 3.1.1 菌株和质粒 | 第35页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第35页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第35-36页 |
| 3.1.4 主要溶液和培养基 | 第36页 |
| 3.2 实验方法 | 第36-42页 |
| 3.2.1 无乳链球菌ZQ0910的培养 | 第36页 |
| 3.2.2 无乳链球菌ZQ0910总RNA的提取 | 第36-37页 |
| 3.2.3 总RNA反转录成cDNA | 第37页 |
| 3.2.4 毒力相关基因的克隆 | 第37-41页 |
| 3.2.5 毒力相关基因的验证 | 第41-42页 |
| 3.3 结果 | 第42-54页 |
| 3.3.1 cylA基因的克隆与分析 | 第42-43页 |
| 3.3.2 cylG基因的克隆与分析 | 第43-44页 |
| 3.3.3 cylI基因的克隆与分析 | 第44-46页 |
| 3.3.4 cylJ基因的克隆与分析 | 第46-47页 |
| 3.3.5 cylK基因的克隆与分析 | 第47-48页 |
| 3.3.6 sodA基因的克隆与分析 | 第48-50页 |
| 3.3.7 PI-2b基因的克隆与分析 | 第50-52页 |
| 3.3.8 荧光定量验证结果 | 第52-54页 |
| 3.4 讨论 | 第54-56页 |
| 4 无乳链球菌ZQ0910 sRNA的验证 | 第56-63页 |
| 4.1 实验材料 | 第56页 |
| 4.1.1 菌株和质粒 | 第56页 |
| 4.1.2 候选sRNA序列 | 第56页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第56页 |
| 4.1.4 主要仪器 | 第56页 |
| 4.1.5 主要溶液和培养基 | 第56页 |
| 4.2 实验方法 | 第56-57页 |
| 4.2.1 无乳链球菌ZQ0910总RNA的提取 | 第56页 |
| 4.2.2 总RNA反转录成cDNA | 第56页 |
| 4.2.3 sRNA的RT-PCR | 第56-57页 |
| 4.3 结果 | 第57-62页 |
| 4.3.1 无乳链球菌ZQ0910总RNA的提取 | 第57页 |
| 4.3.2 无乳链球菌ZQ0910 cDNA模板合成 | 第57-58页 |
| 4.3.3 sRNA SAR-1、SAR-9、SAR-4、SAR-14、SAR-T克隆结果与分析 | 第58-62页 |
| 4.4 讨论 | 第62-63页 |
| 5 结论 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 作者简介 | 第75-76页 |
| 导师简介 | 第76页 |
