摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
缩略词 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-22页 |
1 细胞分裂素的合成与降解 | 第13-15页 |
1.1 细胞分裂素的类型 | 第13-14页 |
1.2 细胞分裂素的合成 | 第14页 |
1.3 细胞分裂素的降解 | 第14-15页 |
2 细胞分裂素的信号转导 | 第15页 |
3 细胞分裂素的转运 | 第15-21页 |
3.1 传统细胞分裂素转运蛋白 | 第16-17页 |
3.2 AtPUP14转运蛋白 | 第17页 |
3.3 ABC转运蛋白 | 第17-18页 |
3.4 AtABCG14转运蛋白 | 第18-21页 |
4 本研究的目的及科学意义 | 第21-22页 |
第二章 实验材料与方法 | 第22-40页 |
1 实验材料与方法 | 第22-23页 |
1.1 植物材料 | 第22页 |
1.2 菌种 | 第22页 |
1.3 实验试剂和仪器 | 第22-23页 |
2 实验方法 | 第23-40页 |
2.1 拟南芥的培养及种植 | 第23页 |
2.2 拟南芥材料的杂交 | 第23-24页 |
2.3 CTAB法提取拟南芥DNA | 第24页 |
2.4 Trizon法提取拟南芥RNA | 第24-25页 |
2.5 拟南芥cDNA的合成 | 第25-26页 |
2.6 荧光定量PCR分析 | 第26-27页 |
2.6.1 荧光定量PCR引物序列 | 第26-27页 |
2.6.2 荧光定量PCR反应体系 | 第27页 |
2.7 GUS染色 | 第27-28页 |
2.7.1 GUS染液的配制 | 第27-28页 |
2.7.2 拟南芥的GUS染液 | 第28页 |
2.8 拟南芥幼苗的嫁接 | 第28-29页 |
2.9 树脂切片的制作 | 第29-30页 |
2.10 表达载体的构建 | 第30-37页 |
2.10.1 基因/启动子的PCR克隆 | 第31-32页 |
2.10.2 酶切 | 第32页 |
2.10.3 切胶回收 | 第32-33页 |
2.10.4 连接 | 第33页 |
2.10.5 GATEWAY反应 | 第33-34页 |
2.10.6 大肠杆菌感受态的制备 | 第34页 |
2.10.7 大肠杆菌转化 | 第34-35页 |
2.10.8 阳性克隆的鉴定 | 第35-36页 |
2.10.9 质粒提取 | 第36页 |
2.10.10 农杆菌感受态的制备 | 第36-37页 |
2.10.11 农杆菌热激转化 | 第37页 |
2.11 农杆菌介导的拟南芥花侵染法转基因及其筛选方法 | 第37-38页 |
2.11.1 花侵染法转基因 | 第37-38页 |
2.11.2 转基因苗的筛选 | 第38页 |
2.12 拟南芥转基因材料的表型分析 | 第38-39页 |
2.13 稳定转基因遗传学材料的获得 | 第39页 |
2.14 C~(13)和C~(14)同位素示踪 | 第39-40页 |
第三章 结果与分析 | 第40-52页 |
1 atabcg14突变体与野生型植株嫁接的表型观察 | 第40-43页 |
2 检测嫁接体中细胞分裂素的组织表达 | 第43-44页 |
3 细胞分裂素响应基因在嫁接体地上组织的相对表达 | 第44-45页 |
4 AtABCG14基因在地上组织的组织表达 | 第45-47页 |
5 特异性启动子转基因材料的互补分析 | 第47-48页 |
6 嫁接体地上组织中细胞分裂素的类别与含量分析 | 第48-50页 |
7 细胞分裂素报告基因在嫁接体幼苗根部的表达 | 第50-52页 |
第四章 讨论 | 第52-55页 |
参考文献 | 第55-65页 |
附录 | 第65-67页 |
1 实验常用抗生素及药品母液配制方法 | 第65页 |
2 常用培养基的配制 | 第65-67页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第67-68页 |
致谢 | 第68-70页 |