摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
1 绪论 | 第8-13页 |
1.1 白桦概述 | 第8页 |
1.2 纤维素生物合成研究进展 | 第8-9页 |
1.2.1 纤维素的结构及其作用 | 第8页 |
1.2.2 植物纤维素合成途径研究 | 第8-9页 |
1.3 植物纤维素合成酶基因研究 | 第9-12页 |
1.3.1 植物纤维素合成酶基因研究 | 第9-11页 |
1.3.2 纤维素合成酶基因的表达规律研究 | 第11页 |
1.3.3 林木纤维素合成酶基因研究 | 第11-12页 |
1.3.4 参与纤维素生物合成的其它基因研究 | 第12页 |
1.4 研究的目的与意义 | 第12-13页 |
2 白桦纤维素合成酶基因的克隆与序列分析 | 第13-44页 |
2.1 实验材料与试剂 | 第13-14页 |
2.1.1 实验材料 | 第13页 |
2.1.2 仪器与试剂 | 第13-14页 |
2.2 实验方法 | 第14-20页 |
2.2.1 白桦RNA的提取与RNA质量检测 | 第14-15页 |
2.2.2 用RT-PCR方法获得白桦纤维素合成酶基因片段 | 第15-17页 |
2.2.3 目的基因片段的5'RACE-PCR扩增 | 第17-18页 |
2.2.4 目的基因片段的3'RACE-PCR扩增 | 第18-19页 |
2.2.5 白桦纤维素合成酶基因序列的拼接与分析 | 第19-20页 |
2.3 结果与分析 | 第20-43页 |
2.3.1 白桦初生木质部及叶片总RNA的提取 | 第20页 |
2.3.2 白桦CesA基因中间片段克隆 | 第20-22页 |
2.3.3 白桦CesA基因中间片段序列分析 | 第22-24页 |
2.3.4 BpCesA1基因5'RACE和3'RACE | 第24-25页 |
2.3.5 BpCesA2基因5'RACE和3'RACE | 第25-26页 |
2.3.6 BpCesA3基因5'RACE和3'RACE | 第26-28页 |
2.3.7 BpCesA1基因全长序列分析 | 第28-32页 |
2.3.8 BpCesA2基因全长序列分析 | 第32-36页 |
2.3.9 BpCesA3基因全长序列分析 | 第36-40页 |
2.3.10 三条白桦纤维素合成酶基因进化分析 | 第40-43页 |
2.4 本章小结 | 第43-44页 |
3 白桦纤维素合成酶基因表达特征分析 | 第44-55页 |
3.1 实验材料 | 第44页 |
3.2 试验方法 | 第44-46页 |
3.2.1 白桦初生木质部、叶片和叶柄总RNA的提取 | 第44页 |
3.2.2 cDNA的合成 | 第44页 |
3.2.3 引物设计 | 第44-45页 |
3.2.4 RT-PCR检测 | 第45页 |
3.2.5 实时定量PCR检测 | 第45-46页 |
3.3 结果与分析 | 第46-54页 |
3.3.1 不同时期叶片、叶柄和木质部总RNA的提取 | 第46-47页 |
3.3.2 RT-PCR检测基因的组织特异性表达 | 第47-48页 |
3.3.3 阳性克隆质粒的提取 | 第48-50页 |
3.3.4 实时定量PCR检测 | 第50-54页 |
3.4 本章小结 | 第54-55页 |
4 讨论 | 第55-59页 |
4.1 纤维素合成酶基因的克隆 | 第55-58页 |
4.1.1 RNA提取与应该注意的问题 | 第55页 |
4.1.2 简并引物设计与基因片段的克隆 | 第55-56页 |
4.1.3 RACE技术克隆基因全长序列 | 第56-57页 |
4.1.4 基因序列分析 | 第57-58页 |
4.2 纤维素合成酶基因组织表达特异性 | 第58-59页 |
结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-64页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第64-65页 |
致谢 | 第65-66页 |