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白桦纤维素合成酶基因克隆与表达特征分析

摘要第3-4页
Abstract第4页
1 绪论第8-13页
    1.1 白桦概述第8页
    1.2 纤维素生物合成研究进展第8-9页
        1.2.1 纤维素的结构及其作用第8页
        1.2.2 植物纤维素合成途径研究第8-9页
    1.3 植物纤维素合成酶基因研究第9-12页
        1.3.1 植物纤维素合成酶基因研究第9-11页
        1.3.2 纤维素合成酶基因的表达规律研究第11页
        1.3.3 林木纤维素合成酶基因研究第11-12页
        1.3.4 参与纤维素生物合成的其它基因研究第12页
    1.4 研究的目的与意义第12-13页
2 白桦纤维素合成酶基因的克隆与序列分析第13-44页
    2.1 实验材料与试剂第13-14页
        2.1.1 实验材料第13页
        2.1.2 仪器与试剂第13-14页
    2.2 实验方法第14-20页
        2.2.1 白桦RNA的提取与RNA质量检测第14-15页
        2.2.2 用RT-PCR方法获得白桦纤维素合成酶基因片段第15-17页
        2.2.3 目的基因片段的5'RACE-PCR扩增第17-18页
        2.2.4 目的基因片段的3'RACE-PCR扩增第18-19页
        2.2.5 白桦纤维素合成酶基因序列的拼接与分析第19-20页
    2.3 结果与分析第20-43页
        2.3.1 白桦初生木质部及叶片总RNA的提取第20页
        2.3.2 白桦CesA基因中间片段克隆第20-22页
        2.3.3 白桦CesA基因中间片段序列分析第22-24页
        2.3.4 BpCesA1基因5'RACE和3'RACE第24-25页
        2.3.5 BpCesA2基因5'RACE和3'RACE第25-26页
        2.3.6 BpCesA3基因5'RACE和3'RACE第26-28页
        2.3.7 BpCesA1基因全长序列分析第28-32页
        2.3.8 BpCesA2基因全长序列分析第32-36页
        2.3.9 BpCesA3基因全长序列分析第36-40页
        2.3.10 三条白桦纤维素合成酶基因进化分析第40-43页
    2.4 本章小结第43-44页
3 白桦纤维素合成酶基因表达特征分析第44-55页
    3.1 实验材料第44页
    3.2 试验方法第44-46页
        3.2.1 白桦初生木质部、叶片和叶柄总RNA的提取第44页
        3.2.2 cDNA的合成第44页
        3.2.3 引物设计第44-45页
        3.2.4 RT-PCR检测第45页
        3.2.5 实时定量PCR检测第45-46页
    3.3 结果与分析第46-54页
        3.3.1 不同时期叶片、叶柄和木质部总RNA的提取第46-47页
        3.3.2 RT-PCR检测基因的组织特异性表达第47-48页
        3.3.3 阳性克隆质粒的提取第48-50页
        3.3.4 实时定量PCR检测第50-54页
    3.4 本章小结第54-55页
4 讨论第55-59页
    4.1 纤维素合成酶基因的克隆第55-58页
        4.1.1 RNA提取与应该注意的问题第55页
        4.1.2 简并引物设计与基因片段的克隆第55-56页
        4.1.3 RACE技术克隆基因全长序列第56-57页
        4.1.4 基因序列分析第57-58页
    4.2 纤维素合成酶基因组织表达特异性第58-59页
结论第59-60页
参考文献第60-64页
攻读学位期间发表的学术论文第64-65页
致谢第65-66页

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