| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-19页 |
| ·多能性干细胞 | 第13-14页 |
| ·诱导多能性干细胞 | 第14-16页 |
| ·Oct4 转录因子 | 第16页 |
| ·细胞穿膜肽 | 第16-17页 |
| ·本课题的创意和研究内容 | 第17-19页 |
| ·本课题的创意 | 第17-18页 |
| ·本课题的研究内容 | 第18-19页 |
| 第二章 表达载体构建 | 第19-28页 |
| ·实验器材与方法 | 第19-20页 |
| ·实验材料 | 第19页 |
| ·所需主要仪器 | 第19-20页 |
| ·所需引物 | 第20页 |
| ·载体构建 | 第20-23页 |
| ·人类Oct4 基因PCR 获得 | 第20-21页 |
| ·酶切 | 第21-22页 |
| ·连接 | 第22页 |
| ·pET21-hOct4-11R-His 质粒的鉴定 | 第22-23页 |
| ·结果 | 第23-25页 |
| ·人类Oct4 基因PCR 获得结果 | 第23-24页 |
| ·pET21-11R-His 载体酶切结果 | 第24页 |
| ·质粒pET21-hOct4-11R-His 的鉴定 | 第24-25页 |
| ·pET21-hOct4-11R-His 酶切鉴定结果 | 第25页 |
| ·重组质粒测序结果 | 第25页 |
| ·讨论 | 第25-28页 |
| 第三章 蛋白表达纯化及鉴定 | 第28-38页 |
| ·实验器材 | 第28-31页 |
| ·实验材料 | 第28页 |
| ·实验所需仪器 | 第28页 |
| ·实验所需主要试剂 | 第28-29页 |
| ·主要试剂配置方法 | 第29-31页 |
| ·蛋白表达方法及纯化方法 | 第31-34页 |
| ·重组质粒的转化入表达菌株 | 第31页 |
| ·重组质粒在大肠杆菌Rosetta2(DE3)中的表达 | 第31-32页 |
| ·SDS-PAGE 电泳检测 | 第32-33页 |
| ·蛋白的透析与浓缩 | 第33页 |
| ·BCA（Bicinchoninic acid，二辛可宁酸）法测蛋白浓度 | 第33页 |
| ·Western Blotting 鉴定方法 | 第33-34页 |
| ·结果 | 第34-37页 |
| ·hOct4-11R-His 蛋白表达纯化结果 | 第34-36页 |
| ·hOct4-11R-His 蛋白Western Blotting 鉴定结果 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-38页 |
| 第四章 穿膜肽功能及诱导神经干细胞实验 | 第38-49页 |
| ·实验器材 | 第38-39页 |
| ·实验材料 | 第38页 |
| ·实验仪器 | 第38页 |
| ·实验试剂 | 第38-39页 |
| ·实时定量PCR 引物 | 第39页 |
| ·穿膜肽功能及蛋白诱导神经干细胞实验方法 | 第39-43页 |
| ·细胞培养 | 第39-40页 |
| ·ReNcell NSC 的传代 | 第40页 |
| ·EGFP-11R-His 蛋白及罗丹明标记的hOct4-11R-His 蛋白穿膜实验 | 第40-41页 |
| ·蛋白诱导ReNcell NSC 实验 | 第41页 |
| ·定量PCR 检测干细胞标志基因表达 | 第41-43页 |
| ·结果 | 第43-48页 |
| ·EGFP-11R-His 穿膜实验结果 | 第43-44页 |
| ·罗丹明标记的hOct4-11R-His 蛋白穿膜实验 | 第44页 |
| ·穿膜肽对ReNcell 神经干细胞穿膜效果 | 第44-45页 |
| ·hOct4-11R-His 诱导ReNcell 神经干细胞结果 | 第45-46页 |
| ·碱性磷酸酶染色(AP 染色)结果 | 第46-47页 |
| ·定量PCR 结果 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 附录：hOct4 测序报告 | 第54-55页 |
