第一部分 文献综述 | 第8-34页 |
§1 卵母细胞IVM—IVF—IVC研究历史回顾 | 第8-11页 |
§2 卵泡卵母细胞的获取与体外成熟培养 | 第11-20页 |
§2.1 卵泡卵母细胞的获取 | 第11页 |
§2.1.1 屠宰后卵巢上采集 | 第11页 |
§2.1.2 活体卵巢上采集 | 第11页 |
§2.2 卵母细胞的体外成熟 | 第11-20页 |
§2.2.1 卵母细胞体外成熟的特征 | 第11-13页 |
§2.2.2 细胞质成熟与卵母细胞成熟 | 第13页 |
§2.2.3 影响卵母细胞体外成熟的因素 | 第13-19页 |
§2.2.3.1 卵母细胞来源 | 第13-14页 |
§2.2.3.2 卵母细胞体外成热培养体系 | 第14-19页 |
§2.2.4 卵母细胞体外成熟的判定 | 第19-20页 |
§3 精子体外获能与体外受精 | 第20-28页 |
§3.1 精子体外获能的机制 | 第20页 |
§3.2 影响精子体外获能因素 | 第20-22页 |
§3.3 精子体外能的方法 | 第22-24页 |
§3.3.1 精子的洗涤 | 第22-24页 |
§3.3.2 精子体外获能 | 第24页 |
§3.3.3 精子获能的判定 | 第24页 |
§3.4 体外受精 | 第24-28页 |
§3.4.1 授精前卵母细胞的处理 | 第24页 |
§3.4.2 提高精子活力的措施 | 第24-26页 |
§3.4.3 精卵比例 | 第26页 |
§3.4.4 精卵作用时间及培养条件 | 第26页 |
§3.4.5 影响体外受精的因素 | 第26-27页 |
§3.4.6 异常受精 | 第27-28页 |
§4 早期胚胎培养系统 | 第28-32页 |
§4.1 早期胚胎发育阻断 | 第28页 |
§4.2 影响早期胚胎体外发育的因素 | 第28-32页 |
§4.2.1 营养因素 | 第28-31页 |
§4.2.2 培养环境条件 | 第31-32页 |
§5 小结与展望 | 第32-34页 |
第二部分 试验研究 | 第34-47页 |
§1 前言 | 第34-35页 |
§2 材料 | 第35-37页 |
§2.1 主要仪器及设备 | 第35页 |
§2.2 主要试剂 | 第35-36页 |
§2.3 卵巢的采集与保存 | 第36页 |
§2.4 操作液 | 第36-37页 |
§2.4.1 采卵液 | 第36页 |
§2.4.2 卵母细胞成熟培养液 | 第36页 |
§2.4.3 牛冷冻精液 | 第36页 |
§2.4.4 冻精洗涤液 | 第36页 |
§2.4.5 精子获能与受精液 | 第36页 |
§2.4.6 体外受精胚胎早期培养液 | 第36-37页 |
§3 方法 | 第37-38页 |
§3.1 卵泡卵母细胞的采集 | 第37页 |
§3.2 卵母细胞筛选与成熟培养 | 第37页 |
§3.3 牛冷冻精子体外获能处理方法 | 第37-38页 |
§3.3.1 直接离心洗涤法 | 第37页 |
§3.3.2 上游法 | 第37页 |
§3.3.3 Percoll法 | 第37-38页 |
§3.4 体外受精 | 第38页 |
§3.5 颗粒细胞单层(GCM)制作 | 第38页 |
§3.6 受精卵的体外发育培养 | 第38页 |
§3.7 胚胎鉴定 | 第38页 |
§3.8 统计学分析 | 第38页 |
§4 结果 | 第38-42页 |
§4.1 卵巢表面卵泡卵母细胞的回收 | 第38-39页 |
§4.2 卵泡卵母细胞的体外成熟、体外受精及受精卵的早期培养 | 第39-42页 |
§4.2.1 成熟培养液中添加不同血清及激素对卵母细胞IVM、IVF及IVD的影响 | 第39页 |
§4.2.2 谷胱甘肽(GSH)对卵母细胞体外受精后发育的影响 | 第39-40页 |
§4.2.3 表皮生长因子和激素对卵母细胞IVM、IVF及IVD的影响 | 第40页 |
§4.2.4 冻精体外洗涤处理方法对卵母细胞体外受精及受精后发育的影响 | 第40-41页 |
§4.2.5 谷氨酰胺、表皮生长因子对牛体外受精胚胎发育的影响 | 第41-42页 |
§5 讨论 | 第42-46页 |
§5.1 不同血清和激素对卵母细胞体外成熟、体外受精及受精后发育的影响 | 第42页 |
§5.2 GSH对卵母细胞体外受精后发育的影响 | 第42-43页 |
§5.3 表皮生长因子和激素对卵母细胞体外成熟和受精后胚胎发育的影响 | 第43-44页 |
§5.4 冻精洗涤处理方法对牛卵母细胞体外受精及受精后发育的影响 | 第44-45页 |
§5.5 谷氨酰胺,表皮生长因子对牛体外受精胚发育的影响 | 第45-46页 |
§6 结论 | 第46-47页 |
附图 | 第47-49页 |
参考文献 | 第49-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
作者简介 | 第61页 |