| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 引言 | 第13-22页 |
| 1.凡纳滨对虾常见病害 | 第13-14页 |
| 1.1 病毒性疾病 | 第13页 |
| 1.2 细菌性疾病 | 第13-14页 |
| 1.3 寄生虫病 | 第14页 |
| 2 对虾免疫系统的调控机制 | 第14-17页 |
| 2.1 物理防御 | 第14页 |
| 2.2 细胞免疫 | 第14-15页 |
| 2.3 体液免疫 | 第15-17页 |
| 2.3.1 免疫识别 | 第15-16页 |
| 2.3.1.1 Toll样受体信号通路 | 第15页 |
| 2.3.1.2 JAK/STAT信号通路与ERK MAPK信号通路 | 第15-16页 |
| 2.3.2 酚氧化酶原激活系统 | 第16页 |
| 2.3.3 凝血系统 | 第16页 |
| 2.3.4 抗菌肽 | 第16-17页 |
| 3 益生元在水产动物上的应用 | 第17-19页 |
| 3.1 益生元简介 | 第17页 |
| 3.2 甘露寡糖（MOS）在水产养殖中的研究现状 | 第17-18页 |
| 3.3 菊粉（Inulin）在水产养殖中的研究现状 | 第18-19页 |
| 4 DNA分子标记 | 第19-21页 |
| 4.1 分子标记技术简介 | 第19页 |
| 4.2 SNPs标记 | 第19-21页 |
| 4.2.1 SNPs标记的特征 | 第19页 |
| 4.2.2 SNPs检测方法 | 第19-20页 |
| 4.2.2.1 直接测序法 | 第19-20页 |
| 4.2.2.2 构象检测法 | 第20页 |
| 4.2.2.3 聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP） | 第20页 |
| 4.2.2.4 基于杂交的检测法 | 第20页 |
| 4.2.3 SNP标记在凡纳滨对虾主要性状上的应用 | 第20-21页 |
| 5 本研究的目的与意义 | 第21-22页 |
| 第一章 感染WSSV及溶藻弧菌后凡纳滨对虾不同组织的Toll样受体基因表达变化研究 | 第22-36页 |
| 1 材料与方法 | 第22-27页 |
| 1.1 试验材料 | 第22-23页 |
| 1.2 试剂 | 第23页 |
| 1.2.1 主要试验试剂 | 第23页 |
| 1.2.2 主要试验试剂配制 | 第23页 |
| 1.3 方法 | 第23-27页 |
| 1.3.1 溶藻弧菌菌悬液的制备 | 第24页 |
| 1.3.2 WSSV病毒的制备 | 第24页 |
| 1.3.3 感染试验 | 第24页 |
| 1.3.4 总RNA的提取步骤 | 第24-25页 |
| 1.3.5 基因组RNA纯度和浓度的检测 | 第25页 |
| 1.3.5.1 2%甲醛变性胶电泳检测法 | 第25页 |
| 1.3.5.2 紫外分光光度计检测法 | 第25页 |
| 1.3.6 反转录 | 第25-26页 |
| 1.3.7 PCR扩增 | 第26-27页 |
| 1.3.7.1 引物设计 | 第26页 |
| 1.3.7.2 引物溶液的配制 | 第26-27页 |
| 1.3.7.3 最佳荧光定量PCR反应体系和反应条件的建立 | 第27页 |
| 1.4 数据统计与分析 | 第27页 |
| 2 结果与分析 | 第27-33页 |
| 2.1 凡纳滨对虾总RNA提取 | 第27-28页 |
| 2.2 凡纳滨对虾不同类型Toll样受体基因的组织表达情况 | 第28页 |
| 2.3 感染溶藻弧菌后凡纳滨对虾不同类型Toll样受体基因表达变化情况 | 第28-30页 |
| 2.4 感染WSSV后凡纳滨对虾不同类型Toll样受体基因表达变化情况 | 第30-32页 |
| 2.5 感染WSSV或溶藻弧菌14天后凡纳滨对虾3种Toll样受体基因表达情况 | 第32-33页 |
| 3 讨论 | 第33-36页 |
| 第二章 凡纳滨对虾Toll1基因SNPs与抗病性能的关联分析 | 第36-49页 |
| 1 材料与方法 | 第36-39页 |
| 1.1 试验材料 | 第36页 |
| 1.2 试剂 | 第36页 |
| 1.3 方法 | 第36-38页 |
| 1.3.1 引物设计 | 第36-37页 |
| 1.3.2 最佳PCR反应体系和反应条件的建立 | 第37-38页 |
| 1.3.3 Y1、Y2、Y3、Y4四对引物PCR产物电泳检测 | 第38页 |
| 1.4 直接测序 | 第38页 |
| 1.5 数据分析 | 第38-39页 |
| 1.5.1 凡纳滨对虾Toll1样受体基因的基因组序列分析 | 第38页 |
| 1.5.2 凡纳滨对虾Toll1受体基因SNPs位点的统计分析 | 第38-39页 |
| 1.5.3 凡纳滨对虾Toll1受体基因SNPs与抗病性状的关联性分析 | 第39页 |
| 2 结果 | 第39-47页 |
| 2.1 Toll1受体基因PCR扩增产物检测及序列比对 | 第39-40页 |
| 2.2 凡纳滨对虾Toll1样受体基因SNP分析结果 | 第40-45页 |
| 2.3 SNPs标记与抗WSSV性状的相关分析 | 第45-46页 |
| 2.4 SNP标记与抗溶藻弧菌性状的相关分析 | 第46-47页 |
| 3 讨论 | 第47-49页 |
| 3.1 凡纳滨对虾三个试验群体的遗传多样性分析 | 第47-48页 |
| 3.2 SNPs标记与抗病性状关联性分析 | 第48-49页 |
| 第三章 菊粉、甘露寡糖对凡纳滨对虾Toll样受体基因表达以及抗病性能的影响 | 第49-70页 |
| 1 材料和方法 | 第49-51页 |
| 1.1 试验饲料 | 第49-50页 |
| 1.2 试验用虾和养殖设施 | 第50页 |
| 1.3 饲养试验 | 第50页 |
| 1.4 WSSV和溶藻弧菌的感染试验 | 第50-51页 |
| 1.5 荧光定量分析 | 第51页 |
| 1.6 引物设计 | 第51页 |
| 1.7 数据分析 | 第51页 |
| 2 结果 | 第51-67页 |
| 2.1 菊粉、甘露寡糖对凡纳滨对虾生长性能的影响 | 第51-52页 |
| 2.2 菊粉对凡纳滨对虾鳃组织中三种Toll样受体基因的影响 | 第52-54页 |
| 2.3 菊粉对凡纳滨对虾血淋巴中三种Toll样受体基因的影响 | 第54-56页 |
| 2.4 甘露寡糖对凡纳滨对虾鳃组织中三种Toll样受体基因的影响 | 第56-58页 |
| 2.5 甘露寡糖对凡纳滨对虾血淋巴中三种Toll样受体基因的影响 | 第58-60页 |
| 2.6 感染WSSV、溶藻弧菌后，不同添加剂对凡纳滨对虾累计死亡率的影响 | 第60-61页 |
| 2.7 感染WSSV、溶藻弧菌后，不同添加剂对凡纳滨对虾鳃组织中三种Toll样受体基因的影响 | 第61-64页 |
| 2.8 感染WSSV、溶藻弧菌后，不同添加剂对凡纳滨对虾血淋巴中三种Toll样受体基因的影响 | 第64-67页 |
| 3 讨论 | 第67-70页 |
| 3.1 菊粉、甘露寡糖对凡纳滨对虾的生长性能及免疫性能的影响 | 第67-68页 |
| 3.2 菊粉、甘露寡糖对凡纳滨对虾3种Toll样受体基因的影响 | 第68-70页 |
| 第四章 菊粉、甘露寡糖对凡纳滨对虾相关免疫基因的影响 | 第70-83页 |
| 1 材料和方法 | 第70-71页 |
| 1.1 试验饲料 | 第70页 |
| 1.2 试验用虾和养殖设施 | 第70页 |
| 1.3 饲养试验 | 第70页 |
| 1.4 WSSV和溶藻弧菌的感染试验 | 第70页 |
| 1.5 荧光定量分析 | 第70-71页 |
| 1.6 引物设计 | 第71页 |
| 1.7 数据分析 | 第71页 |
| 2 结果 | 第71-81页 |
| 2.1 菊粉对凡纳滨对虾免疫相关基因表达量的影响 | 第71-74页 |
| 2.1.1 菊粉对凡纳滨对虾鳃组织中STAT基因的影响 | 第71-72页 |
| 2.1.2 菊粉对凡纳滨对虾血淋巴中proPO基因的影响 | 第72-73页 |
| 2.1.3 菊粉对凡纳滨对虾鳃组织中Crustin基因的影响 | 第73-74页 |
| 2.1.4 菊粉对凡纳滨对虾血淋巴中ERK基因的影响 | 第74页 |
| 2.2 不同添加剂量的甘露寡糖对凡纳滨对虾免疫相关基因的影响 | 第74-77页 |
| 2.2.1 甘露寡糖对凡纳滨对虾鳃组织中STAT基因的影响 | 第74-75页 |
| 2.2.2 甘露寡糖对凡纳滨对虾血淋巴中proPO基因的影响 | 第75-76页 |
| 2.2.3 甘露寡糖对凡纳滨对虾血淋巴中Crustin基因的影响 | 第76页 |
| 2.2.4 甘露寡糖对凡纳滨对虾血淋巴中ERK基因的影响 | 第76-77页 |
| 2.3 感染WSSV、溶藻弧菌，不同添加剂对凡纳滨对虾免疫相关基因的影响 | 第77-81页 |
| 2.3.1 感染WSSV、溶藻弧菌后，不同添加剂对凡纳滨对虾鳃组织中STAT基因的影响 | 第77-78页 |
| 2.3.2 感染WSSV、溶藻弧菌后，不同添加剂对凡纳滨对虾血淋巴中proPO基因的影响 | 第78-79页 |
| 2.3.3 感染WSSV、溶藻弧菌后，不同添加剂对凡纳滨对虾血淋巴中Crustin基因的影响 | 第79-80页 |
| 2.3.4 感染WSSV、溶藻弧菌后，不同添加剂对凡纳滨对虾血淋巴中ERK基因的影响 | 第80-81页 |
| 3 讨论 | 第81-83页 |
| 小结 | 第83-85页 |
| 参考文献 | 第85-94页 |
| 攻读硕士期间的论文完成情况 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95页 |
