摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第一章 引言 | 第12-20页 |
1.1 甲壳动物中雌激素的研究进展 | 第12-14页 |
1.2 雌激素在甲壳动物卵巢发育过程中的作用 | 第14-15页 |
1.3 甲壳动物雌激素的作用机制 | 第15-19页 |
1.3.1 雌激素核受体 | 第15-16页 |
1.3.2 雌激素膜受体 | 第16页 |
1.3.3 雌激素的作用机制 | 第16-18页 |
1.3.4 甲壳动物体内雌激素受体的研究进展 | 第18-19页 |
1.4 存在问题及展望 | 第19-20页 |
第二章 三疣梭子蟹卵巢发育过程中雌二醇的免疫定位 | 第20-31页 |
2.1 材料与方法 | 第20-22页 |
2.1.1 实验动物与暂养 | 第20-21页 |
2.1.2 实验取样与卵巢分期 | 第21页 |
2.1.3 主要试剂 | 第21页 |
2.1.4 免疫组化 | 第21-22页 |
2.2 结果 | 第22-29页 |
2.2.1 E_2在卵巢中的分布和变化 | 第22-23页 |
2.2.2 E_2在肝胰腺中的分布和变化 | 第23页 |
2.2.3 E_2在神经组织、大颚器的分布和变化 | 第23-29页 |
2.3 讨论 | 第29-31页 |
2.3.1 E_2的分布与变化与卵巢发育的关系 | 第29-30页 |
2.3.2 E_2在卵巢发育过程中的作用机制 | 第30-31页 |
第三章 雌二醇对三疣梭子蟹卵巢发育及其相关基因表达的影响 | 第31-40页 |
3.1 材料与方法 | 第31-33页 |
3.1.1 实验用蟹与养殖条件 | 第31-32页 |
3.1.2 实验设计和样品采样 | 第32页 |
3.1.3 RNA提取、引物设计和序列验证 | 第32-33页 |
3.1.4 实时荧光定量PCR | 第33页 |
3.1.5 数据分析 | 第33页 |
3.2 结果 | 第33-39页 |
3.2.1 不同浓度E_2对三疣梭子蟹成活率和卵巢发育的影响 | 第33-35页 |
3.2.2 不同浓度E_2对三疣梭子蟹卵巢发育相关基因表达的影响 | 第35-39页 |
3.3 讨论 | 第39-40页 |
第四章 离体条件下三疣梭子蟹ERR RNA干扰体系的建立及其功能的初探 | 第40-57页 |
4.1 实验材料与方法 | 第40-50页 |
4.1.1 实验动物 | 第40页 |
4.1.2 主要实验仪器 | 第40-41页 |
4.1.3 主要实验试剂 | 第41页 |
4.1.4 相关实验引物 | 第41-42页 |
4.1.5 主要试剂配方 | 第42页 |
4.1.6 总RNA提取及cDNA制备 | 第42-43页 |
4.1.7 ERR和GFP dsRNA的合成 | 第43-48页 |
4.1.8 梭子蟹卵巢组织离体培养 | 第48-49页 |
4.1.9 ERR体外沉默 | 第49页 |
4.1.10 数据分析 | 第49-50页 |
4.2 结果 | 第50-55页 |
4.2.1 总RNA的提取 | 第50页 |
4.2.2 ERR干扰模板的扩增 | 第50-51页 |
4.2.3 ERR dsRNA线性化模板的合成 | 第51-52页 |
4.2.4 ERR dsRNA的合成 | 第52页 |
4.2.5 卵巢组织体外培养 | 第52-53页 |
4.2.6 ERR体外沉默有效dsRNA片段 | 第53-54页 |
4.2.7 ERR的体外沉默 | 第54-55页 |
4.3 讨论 | 第55-57页 |
第五章 中华绒螯蟹卵巢发育期间两种雌激素受体在卵巢和肝胰腺的分布及变化 | 第57-69页 |
5.1 材料与方法 | 第58-60页 |
5.1.1 实验动物与暂养 | 第58页 |
5.1.2 实验取样与卵巢分期 | 第58页 |
5.1.3 主要试剂 | 第58-59页 |
5.1.4 免疫印迹 | 第59页 |
5.1.5 免疫组化 | 第59-60页 |
5.2 结果 | 第60-65页 |
5.2.1 ER的免疫印迹 | 第60页 |
5.2.2 ER在卵巢中的分布和变化 | 第60-62页 |
5.2.3 ER在肝胰腺中的分布和变化 | 第62-65页 |
5.3 讨论 | 第65-69页 |
5.3.1 ER的种类及分子量 | 第65-66页 |
5.3.2 ER在卵巢和肝胰腺中的分布变化与卵巢发育的关系 | 第66-67页 |
5.3.3 雌激素及ER对卵巢发育的作用机制 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-82页 |
小结 | 第82-83页 |
1. 本研究的主要结论 | 第82页 |
2. 本研究的创新点 | 第82-83页 |
3. 本研究的不足和展望 | 第83页 |
攻读硕士期间发表的相关论文及专利 | 第83-84页 |
致谢 | 第84-85页 |