| 摘要 | 第5-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第1章 绪论 | 第14-28页 |
| 引言 | 第14页 |
| 1.1 葡萄糖氧化酶简介 | 第14-17页 |
| 1.1.1 葡萄糖氧化酶的主要来源、分子结构及催化原理 | 第14-16页 |
| 1.1.2 葡萄糖氧化酶的应用 | 第16-17页 |
| 1.2 过氧化氢酶简介 | 第17-19页 |
| 1.2.1 过氧化氢酶的主要来源、分子结构及催化原理 | 第17-18页 |
| 1.2.2 过氧化氢酶的应用 | 第18-19页 |
| 1.3 葡糖糖氧化酶-过氧化氢酶共固定化及其应用 | 第19-22页 |
| 1.3.1 酶的固定化 | 第19-20页 |
| 1.3.2 共固定化葡萄糖氧化酶-过氧化氢酶的研究进展 | 第20-21页 |
| 1.3.3 共固定化葡糖糖氧化酶和过氧化氢酶的应用 | 第21-22页 |
| 1.4 葡萄糖酸的应用及制备方法 | 第22-25页 |
| 1.4.1 葡萄糖酸的应用 | 第22页 |
| 1.4.2 葡萄糖酸的制备方法 | 第22-25页 |
| 1.5 本课题的研究意义和内容 | 第25-28页 |
| 1.5.1 研究意义 | 第25-26页 |
| 1.5.2 研究内容 | 第26-28页 |
| 第2章 聚乙烯醇-海藻酸钠共固定化葡萄糖氧化酶-过氧化氢酶 | 第28-41页 |
| 引言 | 第28-29页 |
| 2.1 材料与设备 | 第29页 |
| 2.1.1 材料与试剂 | 第29页 |
| 2.1.2 仪器与设备 | 第29页 |
| 2.2 实验方法 | 第29-31页 |
| 2.2.1 固定化酶的制备 | 第29-30页 |
| 2.2.2 固定化酶酶学性质研究 | 第30-31页 |
| 2.3 分析方法 | 第31-32页 |
| 2.3.1 葡萄糖氧化酶酶活力的测定 | 第31页 |
| 2.3.2 葡萄糖的测定 | 第31页 |
| 2.3.3 葡萄糖酸的测定 | 第31-32页 |
| 2.3.4 计算方法 | 第32页 |
| 2.4 结果与分析 | 第32-36页 |
| 2.4.1 葡萄糖酸标准曲线 | 第32-33页 |
| 2.4.2 固定化酶制备条件的确定 | 第33页 |
| 2.4.3 CAT与GOD酶活力之比的确定 | 第33-34页 |
| 2.4.4 聚乙烯醇浓度的确定 | 第34页 |
| 2.4.5 海藻酸钠浓度的确定 | 第34-35页 |
| 2.4.6 酶液质量浓度的确定 | 第35-36页 |
| 2.5 固定化酶酶学性质研究 | 第36-40页 |
| 2.5.1 固定化酶最适反应温度及其稳定性 | 第36-38页 |
| 2.5.2 固定化酶最适反应pH及其稳定性 | 第38-39页 |
| 2.5.3 酶催化动力学参数的变化 | 第39页 |
| 2.5.4 固定化酶微观形貌 | 第39-40页 |
| 2.6 本章小结 | 第40-41页 |
| 第3章 酶法原位分离技术酶制备葡萄糖酸 | 第41-50页 |
| 引言 | 第41-42页 |
| 3.1 实验部分 | 第42-43页 |
| 3.1.1 试剂和仪器 | 第42页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第42页 |
| 3.1.3 实验装置 | 第42-43页 |
| 3.2 实验方法 | 第43页 |
| 3.2.1 共固定化酶催化体系的制备 | 第43页 |
| 3.2.2 分批转化反应 | 第43页 |
| 3.2.3 树脂的预处理、筛选及洗脱 | 第43页 |
| 3.2.4 分析方法 | 第43页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第43-46页 |
| 3.3.1 通气量对转化的影响 | 第43-44页 |
| 3.3.2 催化剂量对转化的影响 | 第44-45页 |
| 3.3.3 底物浓度对转化的影响 | 第45-46页 |
| 3.3.4 pH调控对于转化的影响 | 第46页 |
| 3.4 分离耦合转化 | 第46-49页 |
| 3.4.1 离子交换树脂的选择 | 第47页 |
| 3.4.2 原位吸附转化 | 第47-48页 |
| 3.4.3 葡萄糖酸的洗脱 | 第48-49页 |
| 3.5 本章小结 | 第49-50页 |
| 第4章 葡萄糖氧化酶-过氧化氢酶交联酶聚集体的制备 | 第50-65页 |
| 引言 | 第50-51页 |
| 4.1 实验材料 | 第51-52页 |
| 4.1.1 材料与试剂 | 第51-52页 |
| 4.1.2 仪器与设备 | 第52页 |
| 4.2 实验方法 | 第52-53页 |
| 4.2.1 交联酶聚集体的制备 | 第52页 |
| 4.2.3 酶活力测定 | 第52页 |
| 4.2.4 酶活保留率和相对酶活的计算 | 第52-53页 |
| 4.2.5 交联酶聚集体酶学性质研究 | 第53页 |
| 4.2.6 交联酶聚集体的表征 | 第53页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第53-58页 |
| 4.3.1 沉淀剂的确定 | 第53-54页 |
| 4.3.2 GOD与CAT酶活力加入比例确定 | 第54-55页 |
| 4.3.3 酶保护剂的确定 | 第55-56页 |
| 4.3.4 PEG2000添加量的确定 | 第56-57页 |
| 4.3.5 戊二醛浓度的确定 | 第57-58页 |
| 4.3.6 交联时间的确定 | 第58页 |
| 4.4 交联酶聚集体酶学性质研究 | 第58-61页 |
| 4.4.1 最适反应温度变化和热稳定性 | 第58-60页 |
| 4.4.2 最适反应pH和pH稳定性 | 第60-61页 |
| 4.4.3 酶反应动力学参数的变化 | 第61页 |
| 4.5 交联酶聚集体的表征 | 第61-64页 |
| 4.5.1 红外光谱图和X-ray衍射图谱 | 第61-63页 |
| 4.5.2 CLEAs的微观形貌 | 第63-64页 |
| 4.6 本章小结 | 第64-65页 |
| 第5章 交联酶聚集体制备葡萄糖酸 | 第65-75页 |
| 引言 | 第65页 |
| 5.1 实验材料 | 第65-66页 |
| 5.1.1 实验试剂 | 第65页 |
| 5.1.2 实验设备 | 第65-66页 |
| 5.2 实验方法 | 第66-67页 |
| 5.2.1 交联酶聚集体的制备方法 | 第66页 |
| 5.2.2 分析方法 | 第66页 |
| 5.2.3 单因素实验 | 第66-67页 |
| 5.2.4 酶法制备葡萄糖酸工艺优化 | 第67页 |
| 5.2.5 操作稳定性 | 第67页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第67-74页 |
| 5.3.1 温度对于制备葡萄糖酸的影响 | 第67-68页 |
| 5.3.2 转速对于制备葡萄酸的影响 | 第68-69页 |
| 5.3.3 加酶量对于制备葡萄酸的影响 | 第69页 |
| 5.3.4 底物浓度对于制备葡萄酸的影响 | 第69-70页 |
| 5.3.5 酶法制备葡萄糖酸工艺优化 | 第70-71页 |
| 5.3.6 正交优化条件验证 | 第71页 |
| 5.3.7 3.0L反应器放大实验 | 第71-73页 |
| 5.3.8 操作稳定性研究 | 第73-74页 |
| 5.4 本章小结 | 第74-75页 |
| 第6章 结论与展望 | 第75-77页 |
| 6.1 结论 | 第75-76页 |
| 6.2 展望 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-86页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第86-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
