摘要 | 第8-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
1 引言 | 第11-18页 |
1.1 贾第虫概述 | 第11-14页 |
1.1.1 贾第虫和贾第虫病 | 第11页 |
1.1.2 贾第虫的集聚体 | 第11页 |
1.1.3 贾第虫命名 | 第11-12页 |
1.1.4 贾第虫形态学 | 第12页 |
1.1.5 贾第虫生活史 | 第12-13页 |
1.1.6 贾第虫致病机制 | 第13页 |
1.1.7 贾第虫-宿主细胞间相互作用 | 第13-14页 |
1.1.8 贾第虫病与公共卫生 | 第14页 |
1.2 研究进展 | 第14-17页 |
1.2.1 贾第虫细胞骨架 | 第14页 |
1.2.2 贾第素 | 第14-15页 |
1.2.3 诊断方法 | 第15-17页 |
1.3 研究的目的意义 | 第17-18页 |
2 材料和方法 | 第18-31页 |
2.1 材料 | 第18-22页 |
2.1.1 试验虫种及载体 | 第18页 |
2.1.2 试验动物 | 第18页 |
2.1.3 引物序列 | 第18页 |
2.1.4 主要试剂 | 第18-19页 |
2.1.5 主要仪器设备 | 第19页 |
2.1.6 主要溶液的配制 | 第19-20页 |
2.1.7 贾第虫滋养体的培养 | 第20-22页 |
2.2 方法 | 第22-31页 |
2.2.1 贾第虫总RNA的提取 | 第22页 |
2.2.2 cDNA的合成 | 第22-23页 |
2.2.3 δ-贾第素基因及 γ-贾第素基因克隆载体的构建 | 第23-26页 |
2.2.4 δ-giardin基因及 γ-giardin基因重组表达载体的构建 | 第26页 |
2.2.5 目的蛋白的诱导表达与纯化 | 第26-28页 |
2.2.6 多克隆抗体的制备 | 第28页 |
2.2.7 免疫血清效价的测定 | 第28-29页 |
2.2.8 多克隆抗体的Western Blot鉴定 | 第29页 |
2.2.9 γ-贾第素蛋白免疫荧光定位分析 | 第29-31页 |
3 结果 | 第31-38页 |
3.1 δ-贾第素和 γ-贾第素基因扩增结果 | 第31页 |
3.2 重组克隆质粒的鉴定 | 第31-32页 |
3.3 δ-贾第素和 γ-贾第素生物信息学分析 | 第32页 |
3.3.1 δ-贾第素和 γ-贾第素二级结构预测 | 第32页 |
3.3.2 δ-贾第素和 γ-贾第素三级结构预测 | 第32页 |
3.4 重组表达质粒的鉴定 | 第32-33页 |
3.5 重组蛋白的诱导表达及纯化 | 第33-35页 |
3.5.1 重组蛋白的诱导条件优化及可溶性分析 | 第33-35页 |
3.5.2 表达产物的纯化 | 第35页 |
3.6 抗血清效价的测定 | 第35页 |
3.7 抗血清特异性分析 | 第35-36页 |
3.8 贾第虫滋养体 γ-贾第素的免疫荧光定位 | 第36-38页 |
4 讨论 | 第38-41页 |
4.1 δ-贾第素和 γ-贾第素的定位及功能 | 第38-39页 |
4.2 α-贾第素和 β-贾第素的定位及功能比较 | 第39页 |
4.3 研究前景与展望 | 第39-41页 |
5 结论 | 第41-42页 |
致谢 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-50页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第50页 |