| 摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-17页 |
| 1.1 中度嗜盐菌简介 | 第12-13页 |
| 1.2 中度嗜盐菌的盐离子调控机制 | 第13-16页 |
| 1.2.1 初级钠离子泵 | 第13页 |
| 1.2.2 次级钠离子泵 | 第13-16页 |
| 1.3 本论文的研究目标和研究内容 | 第16-17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-34页 |
| 2.1 NEAU-ST10-39~T中Na~+/H~+逆向转运蛋白基因的克隆 | 第17-23页 |
| 2.1.1 材料 | 第17-19页 |
| 2.1.2 方法 | 第19-23页 |
| 2.2 NEAU-ST10-39~T中Na~+/H~+逆向转运蛋白基因的功能鉴定 | 第23-26页 |
| 2.2.1 材料 | 第23-24页 |
| 2.2.2 方法 | 第24-26页 |
| 2.3 NEAU-ST10-39~T中Hs_mrp2基因敲除菌株的构建 | 第26-34页 |
| 2.3.1 材料 | 第26-27页 |
| 2.3.2 方法 | 第27-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-59页 |
| 3.1 NEAU-ST10-39~T中Na~+/H~+逆向转运蛋白基因的克隆 | 第34-49页 |
| 3.1.1 基因组DNA的不完全酶切 | 第34页 |
| 3.1.2 载体p UC18的完全酶切和去磷酸化 | 第34-35页 |
| 3.1.3 阳性克隆的筛选 | 第35页 |
| 3.1.4 外源DNA的测序及序列分析 | 第35-49页 |
| 3.2 Hs_Mrp2的功能鉴定 | 第49-53页 |
| 3.2.1 Hs_Mrp2的耐盐碱测试 | 第49-51页 |
| 3.2.2 Hs_Mrp2阳离子/H~+逆向转运蛋白活性的测定 | 第51-53页 |
| 3.3 NEAU-ST10-39~T中Hs_mrp2基因敲除菌株的构建 | 第53-59页 |
| 3.3.1 重组DNA片段的构建结果 | 第53-55页 |
| 3.3.2 Hs_mrp2的单交换菌株的筛选 | 第55页 |
| 3.3.3 Hs_mrp2的双交换菌株的筛选 | 第55-56页 |
| 3.3.4 敲除菌株NEAU-ST10-39~T-Δmrp2 PCR及测序验证 | 第56-57页 |
| 3.3.5 敲除菌株NEAU-ST10-39~T-Δmrp2的回补菌株构建 | 第57页 |
| 3.3.6 敲除菌株NEAU-ST10-39~T-Δmrp2生理实验测定 | 第57-59页 |
| 4 讨论 | 第59-62页 |
| 5 结论 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第72页 |
