摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
缩略语(Abbreviation) | 第11-12页 |
1 文献综述 | 第12-23页 |
1.1 哺乳动物羧酸酯酶 | 第12-18页 |
1.1.1 概述 | 第12页 |
1.1.2 羧酸酯酶的分类和命名 | 第12-14页 |
1.1.3 羧酸酯酶的组织分布与表达谱 | 第14-15页 |
1.1.4 羧酸酯酶的基因结构与转录调控 | 第15-16页 |
1.1.5 羧酸酯酶的功能 | 第16-18页 |
1.2 猪肝羧酸酯酶 | 第18-22页 |
1.2.1 概述 | 第18-19页 |
1.2.2 猪肝羧酸酯酶同工酶的分类及各自特性差异 | 第19-21页 |
1.2.3 猪肝羧酸酯酶结构 | 第21页 |
1.2.4 猪肝羧酸酯酶的功能与应用 | 第21-22页 |
1.3 通城猪与大白猪简介 | 第22-23页 |
2 研究目的与意义 | 第23-24页 |
3 材料与方法 | 第24-38页 |
3.1 试验材料 | 第24-27页 |
3.1.1 质粒及菌株 | 第24页 |
3.1.2 主要试剂 | 第24-25页 |
3.1.3 主要仪器设备 | 第25页 |
3.1.4 试验动物 | 第25页 |
3.1.5 主要数据库及分析软件 | 第25页 |
3.1.6 试剂配制 | 第25-27页 |
3.2 试验方法 | 第27-38页 |
3.2.1 TR-qPCR检测PLE总mRNA表达水平 | 第27-29页 |
3.2.2 制备PLE同工酶通用抗体 | 第29-31页 |
3.2.3 提取肝脏S9 及WB检测PLE蛋白总表达量 | 第31-33页 |
3.2.4 检测四个年龄段肝脏S9 混合样品的比活力 | 第33页 |
3.2.5 T-A法克隆PLE及测序 | 第33-38页 |
4 结果与分析 | 第38-50页 |
4.1 RT-qPCR检测PLE组织表达差异 | 第38-39页 |
4.2 RT-qPCR检测肝脏中PLE mRNA总表达水平 | 第39-41页 |
4.2.1 通城猪四个年龄段PLE mRNA总表达水平 | 第39-41页 |
4.2.2 大白猪四个年龄段PLE mRNA总表达水平 | 第41页 |
4.2.3 品种间PLE mRNA总表达水平比较 | 第41页 |
4.3 WB检测肝脏中PLE蛋白表达水平 | 第41-44页 |
4.3.1 PLE通用抗体制备和特异性检测 | 第41-43页 |
4.3.2 WB检测两个品种猪四个年龄段肝脏S9 样品中PLE含量 | 第43-44页 |
4.4 四个年龄段通城猪和大白猪肝脏S9 水解p-NPA活性差异 | 第44-45页 |
4.4.1 四个年龄段通城猪肝脏S9 对p-NPA的水解活性 | 第44页 |
4.4.2 四个年龄段大白猪肝脏S9 对p-NPA的水解活性 | 第44页 |
4.4.3 品种间肝脏S9 样品水解活性比较 | 第44-45页 |
4.5 PLE的克隆和亚型分类及统计 | 第45-50页 |
4.5.1 PLE同工酶ORF的RT-PCR扩增结果 | 第45页 |
4.5.2 PLE同工酶ORF的克隆 | 第45-47页 |
4.5.3 PLE亚型统计和分类 | 第47页 |
4.5.4 四个年龄段通城猪和大白猪肝脏中PLE同工酶丰度变化 | 第47-50页 |
5 讨论 | 第50-53页 |
5.1 试验方案设计 | 第50页 |
5.2 PLE的组织分布规律 | 第50-51页 |
5.3 PLE的表达谱及品种差异比较 | 第51-52页 |
5.4 PLE同工酶的分类 | 第52-53页 |
6. 结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-64页 |
附录 | 第64-72页 |
在读期间发表文章题录 | 第72-73页 |
致谢 | 第73页 |