| 致谢 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 绪论 | 第19-30页 |
| 1.1 几丁质酶 | 第19-20页 |
| 1.1.1 几丁质 | 第19页 |
| 1.1.2 几丁质酶 | 第19-20页 |
| 1.2 几丁质酶抑制剂 | 第20-28页 |
| 1.2.1 天然产物几丁质酶抑制剂 | 第20-25页 |
| 1.2.1.1 糖类 | 第20-22页 |
| 1.2.1.2 生物碱类 | 第22页 |
| 1.2.1.3 肽类 | 第22-23页 |
| 1.2.1.4 酪氨酸衍生物 | 第23-24页 |
| 1.2.1.5 黄嘌呤衍生物 | 第24页 |
| 1.2.1.6 其他几丁质酶抑制剂 | 第24-25页 |
| 1.2.2 合成几丁质酶抑制剂 | 第25-27页 |
| 1.2.2.1 阿洛菌素及其类似物 | 第25页 |
| 1.2.2.2 精氨芬和阿尔加定及其类似物 | 第25-26页 |
| 1.2.2.3 噁二唑或噻二唑衍生物 | 第26-27页 |
| 1.2.2.4 其他合成化合物 | 第27页 |
| 1.2.3 几丁质酶抑制剂的研究展望 | 第27-28页 |
| 1.3 本课题的研究意义 | 第28页 |
| 1.4 研究内容与思路 | 第28-30页 |
| 第二章 A0101产几丁质酶抑制剂的分离纯化及其鉴定 | 第30-40页 |
| 2.1 引言 | 第30页 |
| 2.2 实验材料 | 第30-31页 |
| 2.2.1 活性菌株和几丁质酶 | 第30页 |
| 2.2.2 主要试剂和仪器 | 第30-31页 |
| 2.3 实验方法 | 第31-35页 |
| 2.3.1 胶体几丁质的配制 | 第31页 |
| 2.3.2 几丁质酶粗酶液的制备 | 第31-32页 |
| 2.3.3 配制磷酸缓冲液 | 第32页 |
| 2.3.4 DNS显色剂的配制 | 第32页 |
| 2.3.5 酶活力测定方法 | 第32页 |
| 2.3.6 抑制率测定方法 | 第32-33页 |
| 2.3.7 菌株A0101发酵产物中活性成分的分离纯化实验 | 第33-35页 |
| 2.3.7.1 液体发酵实验 | 第33页 |
| 2.3.7.2 发酵液预处理 | 第33页 |
| 2.3.7.3 醇沉处理 | 第33页 |
| 2.3.7.4 透析 | 第33页 |
| 2.3.7.5 有机溶剂浸提 | 第33页 |
| 2.3.7.6 硅胶柱层析 | 第33-34页 |
| 2.3.7.7 SephadexG-15凝胶柱层析实验 | 第34-35页 |
| 2.3.7.8 HPLC检测 | 第35页 |
| 2.3.8 菌株A0101发酵产物中活性成分鉴定方法 | 第35页 |
| 2.4 实验结果 | 第35-39页 |
| 2.4.1 菌株A0101发酵产物中活性成分的分离纯化 | 第35-37页 |
| 2.4.1.1 醇沉处理 | 第35页 |
| 2.4.1.2 透析 | 第35-36页 |
| 2.4.1.3 有机溶剂浸提 | 第36页 |
| 2.4.1.4 硅胶柱层析 | 第36-37页 |
| 2.4.1.5 SephadexG-15凝胶柱层析 | 第37页 |
| 2.4.2 菌株A0101发酵产物中活性成分结构分析 | 第37-39页 |
| 2.5 本章小结 | 第39-40页 |
| 第三章 菌株A0101产几丁质酶抑制剂发酵条件初步研究 | 第40-53页 |
| 3.1 引言 | 第40页 |
| 3.2 实验材料 | 第40-42页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第40-41页 |
| 3.2.1.1 供试酶液及菌株来源 | 第40页 |
| 3.2.1.2 高氏一号培养基 | 第40-41页 |
| 3.2.2 主要试剂和仪器 | 第41-42页 |
| 3.3 实验方法 | 第42-44页 |
| 3.3.1 形态和培养特征研究 | 第42页 |
| 3.3.1.1 形态观察 | 第42页 |
| 3.3.1.2 生长曲线和几丁质酶抑制活性的测定 | 第42页 |
| 3.3.2 A0101培养方法 | 第42-43页 |
| 3.3.2.1 斜面培养 | 第42页 |
| 3.3.2.2 种子及发酵培养 | 第42-43页 |
| 3.3.3 抑制率测定方法参考“第二章2.3.6抑制率测定方法” | 第43页 |
| 3.3.4 发酵条件优化的考察因素及实验方法 | 第43-44页 |
| 3.3.4.1 不同碳源对活性菌株发酵液抑制活性的影响实验 | 第43页 |
| 3.3.4.2 不同氮源对活性菌株发酵液抑制活性的影响实验 | 第43页 |
| 3.3.4.3 培养温度对活性菌株发酵液抑制活性的影响实验 | 第43页 |
| 3.3.4.4 转速对活性菌株发酵液抑制活性的影响实验 | 第43页 |
| 3.3.4.5 培养基初始pH对活性菌株发酵液抑制性的影响实验 | 第43页 |
| 3.3.4.6 接种量对产酶抑制剂的影响实验 | 第43页 |
| 3.3.4.7 培养基装样量对活性菌株发酵液抑制活性的影响实验 | 第43-44页 |
| 3.4 结果与分析 | 第44-52页 |
| 3.4.1 A0101形态观察 | 第44页 |
| 3.4.2 A0101生长曲线和几丁质酶抑制活性的测定结果 | 第44-45页 |
| 3.4.3 发酵条件的优化 | 第45-52页 |
| 3.4.3.1 不同碳源对活性菌株发酵液抑制活性的影响 | 第45-46页 |
| 3.4.3.2 不同氮源对活性菌株发酵液抑制活性的影响 | 第46-47页 |
| 3.4.3.3 不同培养温度对活性菌株发酵液抑制活性的影响 | 第47-48页 |
| 3.4.3.4 不同培养转速对活性菌株发酵液抑制活性的影响 | 第48-49页 |
| 3.4.3.5 不同培养基初始pH对活性菌株发酵液抑制活性的影响 | 第49-50页 |
| 3.4.3.6 不同接种量对活性菌株发酵液抑制活性的影响 | 第50-51页 |
| 3.4.3.7 不同装样量对活性菌株发酵液抑制活性的影响 | 第51-52页 |
| 3.5 本章小结 | 第52-53页 |
| 第四章 A0101产几丁质酶抑制剂性质研究 | 第53-60页 |
| 4.1 引言 | 第53页 |
| 4.2 实验材料 | 第53-54页 |
| 4.2.1 供试菌株和几丁质酶 | 第53页 |
| 4.2.2 实验仪器 | 第53-54页 |
| 4.3 实验方法 | 第54-55页 |
| 4.3.1 化性质实验 | 第54-55页 |
| 4.3.1.1 pH对A0101产几丁质酶抑制剂抑制活性的影响实验 | 第54页 |
| 4.3.1.2 温度对A0101产几丁质酶抑制剂抑制活性的影响实验 | 第54页 |
| 4.3.1.3 金属离子对A0101产几丁质酶抑制剂抑制活性的影响实验 | 第54页 |
| 4.3.1.4 溶解性实验 | 第54-55页 |
| 4.3.2 抗菌谱实验 | 第55页 |
| 4.3.2.1 涂布培养 | 第55页 |
| 4.3.2.2 杯碟法抑菌实验 | 第55页 |
| 4.4 结果与分析 | 第55-58页 |
| 4.4.1 A0101产几丁质酶抑制剂理化性质实验结果 | 第55-57页 |
| 4.4.1.1 pH对A0101产几丁质酶抑制剂抑制活性的影响 | 第55-56页 |
| 4.4.1.2 温度对A0101产几丁质酶抑制剂抑制活性的影响 | 第56-57页 |
| 4.4.1.3 金属离子对A0101产几丁质酶抑制剂抑制活性的影响 | 第57页 |
| 4.4.1.4 溶解性实验 | 第57页 |
| 4.4.2 抗菌谱实验 | 第57-58页 |
| 4.5 本章小结 | 第58-60页 |
| 第五章 B2-9产几丁质酶抑制剂分离纯化初探 | 第60-74页 |
| 5.1 引言 | 第60页 |
| 5.2 实验材料 | 第60-62页 |
| 5.3 实验方法 | 第62-66页 |
| 5.3.1 活性菌株B2-9的形态和培养特征观察 | 第62页 |
| 5.3.2 活性菌株B2-9革兰氏染色 | 第62页 |
| 5.3.4 B2-9生长曲线和几丁质酶抑制活性的测定 | 第62页 |
| 5.3.5 B2-9产几丁质酶抑制剂温度稳定性研究 | 第62页 |
| 5.3.6 B2-9产几丁质酶抑制剂酸碱稳定性研究 | 第62页 |
| 5.3.7 B2-9产几丁质酶抑制剂分离纯化实验 | 第62-66页 |
| 5.3.7.1 液体发酵 | 第62-63页 |
| 5.3.7.2 发酵液预处理 | 第63页 |
| 5.3.7.3 有机溶剂浸提 | 第63页 |
| 5.3.7.4 DEAE-52柱层析实验操作 | 第63-64页 |
| 5.3.7.5 阳离子交换柱层析实验操作 | 第64-65页 |
| 5.3.7.6 紫外全波长扫描 | 第65页 |
| 5.3.7.7 半制备C_(18)柱层析 | 第65-66页 |
| 5.3.7.8 SephadexG-25凝胶柱层析 | 第66页 |
| 5.3.7.9 HPLC检测 | 第66页 |
| 5.4 结果与分析 | 第66-73页 |
| 5.4.1 B2-9形态和培养特征观察结果 | 第66-67页 |
| 5.4.2 B2-9革兰氏染色实验结果 | 第67页 |
| 5.4.3 菌株B2-9生长曲线和几丁质酶抑制活性的测定 | 第67-68页 |
| 5.4.4 菌株B2-9产几丁质酶抑制剂温度稳定性实验结果 | 第68-69页 |
| 5.4.5 菌株B2-9产几丁质酶抑制剂pH耐受性实验结果 | 第69-70页 |
| 5.4.6 B2-9产几丁质酶抑制剂分离纯化初探实验结果 | 第70-73页 |
| 5.4.6.1 有机溶剂浸提 | 第70-71页 |
| 5.4.6.2 DEAE-52柱层析实验结果 | 第71页 |
| 5.4.6.3 阳离子交换柱层析实验结果 | 第71页 |
| 5.4.6.4 紫外全波长扫描实验结果 | 第71页 |
| 5.4.6.5 半制备C_(18)柱层析验结果 | 第71-72页 |
| 5.4.6.6 SephadexG-25凝胶柱层析实验结果 | 第72-73页 |
| 5.5 本章小结 | 第73-74页 |
| 第六章 结论与展望 | 第74-76页 |
| 6.1 结论 | 第74-75页 |
| 6.2 展望 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-81页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第81页 |
