| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词 | 第11-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-23页 |
| 1.1 类胡萝卜素 | 第12-18页 |
| 1.1.1 类胡萝卜素的种类和结构 | 第12页 |
| 1.1.2 类胡萝卜素的用途 | 第12-14页 |
| 1.1.3 类胡萝卜素的生物合成 | 第14-17页 |
| 1.1.4 类胡萝卜素的基因工程研究进展 | 第17-18页 |
| 1.2 耐盐杜氏藻与类胡萝卜素的生物合成 | 第18-20页 |
| 1.2.1 杜氏藻 | 第18-19页 |
| 1.2.2 杜氏藻是类胡萝卜素表达的有效宿主细胞 | 第19-20页 |
| 1.2.3 杜氏藻的基因工程研究进展 | 第20页 |
| 1.3 类胡萝卜素异构酶（CRTISO）基因的研究进展 | 第20-21页 |
| 1.4 本论文的研究内容和意义 | 第21-23页 |
| 第二章 巴氏杜氏藻CRTISO基因的克隆 | 第23-50页 |
| 2.1 引言 | 第23页 |
| 2.2 实验仪器与材料 | 第23-27页 |
| 2.2.1 主要仪器设备 | 第23-24页 |
| 2.2.2 藻种与培养基 | 第24-25页 |
| 2.2.3 菌种与载体 | 第25页 |
| 2.2.4 实验试剂和试剂盒 | 第25-26页 |
| 2.2.5 常用试剂的配制 | 第26-27页 |
| 2.2.6 引物合成和测序服务 | 第27页 |
| 2.3 实验方法 | 第27-44页 |
| 2.3.1 巴氏藻的培养方法 | 第27页 |
| 2.3.2 感受态细胞大肠杆菌DH5α的制备 | 第27-28页 |
| 2.3.3 目的DNA片段的回收、连接、转化与测序 | 第28-30页 |
| 2.3.4 DbCRTISO基因EST序列的克隆 | 第30-32页 |
| 2.3.5 3’-RACE克隆DbCRTISO的3’端cDNA | 第32-35页 |
| 2.3.6 5’-RACE克隆DbCRTISO的5’端cDNA | 第35-37页 |
| 2.3.7 DbCRTISO基因ORF的克隆 | 第37-38页 |
| 2.3.8 基因组步移克隆DbCRTISO的基因组序列 | 第38-43页 |
| 2.3.9 基因组步移克隆DbCRTISO的启动子 | 第43-44页 |
| 2.4 实验结果与分析 | 第44-49页 |
| 2.4.1 DbCRTISO基因cDNA的获得 | 第44-46页 |
| 2.4.2 DbCRTISO基因组序列的获得 | 第46-48页 |
| 2.4.3 DbCRTISO启动子的获得 | 第48-49页 |
| 2.5 本章小结 | 第49-50页 |
| 第三章 巴氏杜氏藻CRTISO基因的生物信息学分析 | 第50-59页 |
| 3.1 引言 | 第50页 |
| 3.2 生物信息学分析方法 | 第50-51页 |
| 3.2.1 ORF预测及氨基酸序列的分析 | 第50页 |
| 3.2.2 序列同源性比对与保守结构域分析 | 第50页 |
| 3.2.3 多重序列比对与构建系统进化树 | 第50-51页 |
| 3.2.4 基因结构的分析 | 第51页 |
| 3.2.5 启动子的转录因子结合位点分析 | 第51页 |
| 3.3 生物信息学分析结果 | 第51-58页 |
| 3.3.1 DbCRTISO基因ORF的预测及氨基酸序列分析 | 第51页 |
| 3.3.2 序列同源性比对与保守结构域分析 | 第51-53页 |
| 3.3.3 多重序列比对与系统进化树构建 | 第53-54页 |
| 3.3.4 DbCRTISO的基因结构分析 | 第54-57页 |
| 3.3.5 DbCRTISO启动子的转录因子结合位点分析 | 第57-58页 |
| 3.4 本章小结 | 第58-59页 |
| 第四章 巴氏杜氏藻类胡萝卜素合成的关键酶基因在大肠杆菌中的功能互补表达 | 第59-78页 |
| 4.1 引言 | 第59-60页 |
| 4.2 实验仪器与材料 | 第60-63页 |
| 4.2.1 主要仪器设备 | 第60-61页 |
| 4.2.2 质粒和宿主细胞 | 第61页 |
| 4.2.3 实验试剂和试剂盒 | 第61页 |
| 4.2.4 常用试剂的配制 | 第61-63页 |
| 4.3 实验方法 | 第63-70页 |
| 4.3.1 DbCRTISO在大肠杆菌BL21(DE3)的异源表达 | 第63-66页 |
| 4.3.2 重组质粒pACCRT-E-DbPDZC的构建 | 第66-68页 |
| 4.3.3 转化子培养及类胡萝卜素产物的定性和定量分析 | 第68-70页 |
| 4.4 实验结果与分析 | 第70-77页 |
| 4.4.1 DbCRTISO在大肠杆菌BL21(DE3)的异源表达 | 第70-71页 |
| 4.4.2 重组质粒pACCRT-E-DbPDZC的构建结果 | 第71-72页 |
| 4.4.3 转化子类胡萝卜素提取物的定性和定量分析 | 第72-77页 |
| 4.5 本章小结 | 第77-78页 |
| 结论与展望 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-87页 |
| 附录 | 第87-92页 |
| 攻读硕士学位期间取得的研究成果 | 第92-93页 |
| 致谢 | 第93-94页 |
| 附表 | 第94页 |
