摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
1 绪论 | 第8-12页 |
1.1 表观遗传学概述 | 第8页 |
1.2 组蛋白乙酰化 | 第8-11页 |
1.2.1 组蛋白乙酰基转移酶(HAT) | 第9页 |
1.2.2 组蛋白去乙酰化酶(HDAC) | 第9-11页 |
1.3 研究意义与目的 | 第11-12页 |
2 毛果杨HDA902基因克隆及生物信息学分析 | 第12-24页 |
2.1 实验材料 | 第12页 |
2.1.1 植物材料 | 第12页 |
2.1.2 载体与菌种 | 第12页 |
2.1.3 主要试剂 | 第12页 |
2.1.4 溶液配制 | 第12页 |
2.2 实验方法 | 第12-16页 |
2.2.1 生物信息学分析 | 第12-13页 |
2.2.2 毛果杨总RNA的提取 | 第13页 |
2.2.3 cDNA的合成 | 第13-14页 |
2.2.4 毛果杨HDA902基因的克隆 | 第14-16页 |
2.3 结果与分析 | 第16-22页 |
2.3.1 毛果杨HDA902基因的克隆 | 第16-17页 |
2.3.2 毛果杨HDA902基因ORF序列及其编码的氨基酸序列 | 第17-18页 |
2.3.3 毛果杨HDA902蛋白一级结构及理化性质分析 | 第18-19页 |
2.3.4 结构域分析 | 第19页 |
2.3.5 同源序列比对分析 | 第19-20页 |
2.3.6 系统进化树分析 | 第20-21页 |
2.3.7 启动子序列分析 | 第21-22页 |
2.4 本章小结 | 第22-24页 |
3 HDA902亚细胞定位 | 第24-29页 |
3.1 实验材料 | 第24页 |
3.1.1 实验耗材 | 第24页 |
3.1.2 载体 | 第24页 |
3.1.3 主要试剂 | 第24页 |
3.2 实验方法 | 第24-26页 |
3.2.1 PtHDA902基因片段与pCAMBIA1302载体的连接 | 第24-25页 |
3.2.2 转化大肠杆菌 | 第25页 |
3.2.3 阳性克隆PCR检测及酶切鉴定 | 第25-26页 |
3.2.4 PtHDA902的亚细胞定位 | 第26页 |
3.3 结果 | 第26-28页 |
3.3.1 构建GFP-PtHDA902融合蛋白表达载体 | 第26-27页 |
3.3.2 PtHDA902基因的亚细胞定位 | 第27-28页 |
3.4 本章小结 | 第28-29页 |
4 毛果杨HDA902基因的表达分析 | 第29-33页 |
4.1 实验材料 | 第29页 |
4.1.1 植物材料 | 第29页 |
4.1.2 主要试剂 | 第29页 |
4.2 实验方法 | 第29-30页 |
4.2.1 毛果杨RNA的提取与cDNA的合成 | 第29页 |
4.2.2 实时荧光定量PCR分析 | 第29-30页 |
4.3 结果与分析 | 第30-31页 |
4.3.1 PtHDA902基因在毛果杨中的组织特异性表达 | 第30页 |
4.3.2 PtHDA902基因盐胁迫下的表达 | 第30-31页 |
4.3.3 PtHDA902基因在低温胁迫下的表达 | 第31页 |
4.4 本章小结 | 第31-33页 |
5 毛果杨HDA902基因的功能分析 | 第33-50页 |
5.1 实验材料 | 第33-35页 |
5.1.1 植物材料 | 第33页 |
5.1.2 菌种 | 第33页 |
5.1.3 主要试剂 | 第33页 |
5.1.4 溶液配制 | 第33-34页 |
5.1.5 培养基 | 第34-35页 |
5.2 实验方法 | 第35-41页 |
5.2.1 构建植物表达载体pROK Ⅱ-PtHDA902 | 第35-36页 |
5.2.2 重组质粒pROK Ⅱ-PtHDA902转化农杆菌 | 第36-37页 |
5.2.3 PtHDA902转基因烟草的获得 | 第37-38页 |
5.2.4 PtHDA902转基因烟草在低温胁迫下的功能 | 第38-40页 |
5.2.5 PtHDA902转基因烟草在盐胁迫下的功能 | 第40-41页 |
5.2.6 PtHDA902转基因烟草在干旱胁迫下的功能 | 第41页 |
5.3 结果与分析 | 第41-49页 |
5.3.1 植物表达载体pROK Ⅱ-PtHDA902的构建 | 第41页 |
5.3.2 植物表达载体转化农杆菌 | 第41-42页 |
5.3.3 PtHDA902转基因烟草的鉴定 | 第42-43页 |
5.3.4 PtHDA902转基因烟草抗寒性分析 | 第43-47页 |
5.3.5 PtHDA902转基因烟草抗盐性分析 | 第47-48页 |
5.3.6 PtHDA902转基因烟草抗旱性分析 | 第48-49页 |
5.4 本章小结 | 第49-50页 |
结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-54页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第54-55页 |
致谢 | 第55-56页 |