| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第1章 绪论 | 第10-19页 |
| 1.1 花鳗鲡渗透压调节的研究进展 | 第10-12页 |
| 1.2 激素受体基因的研究现状 | 第12-15页 |
| 1.2.1 激素受体基因的研究概述 | 第12-13页 |
| 1.2.2 鱼类激素受体基因与渗透调节的研究进展 | 第13-15页 |
| 1.3 热休克蛋白研究概况 | 第15-16页 |
| 1.3.1 热休克蛋白概述 | 第15页 |
| 1.3.2 鱼类热休克蛋白概述 | 第15-16页 |
| 1.4 研究目的、意义和主要内容 | 第16-18页 |
| 1.4.1 研究目的和意义 | 第16-17页 |
| 1.4.2 研究的主要内容 | 第17-18页 |
| 1.5 技术路线 | 第18-19页 |
| 第2章 花鳗鲡AVTRs和ITR基因的克隆与生物信息学分析 | 第19-36页 |
| 2.1 实验材料、仪器及试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第19页 |
| 2.1.2 主要仪器设备 | 第19-20页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-24页 |
| 2.2.1 总RNA提取与质量检测 | 第20-21页 |
| 2.2.2 cDNA的合成 | 第21页 |
| 2.2.3 AVTRs和ITR基因cDNA全长的扩增 | 第21-24页 |
| 2.2.4 AVTRs和ITR基因序列生物信息学分析 | 第24页 |
| 2.3 实验结果 | 第24-36页 |
| 2.3.1 花鳗鲡AVTRs和ITR基因全长分析 | 第24-27页 |
| 2.3.2 花鳗鲡AVTRs和ITR基因相似性及多重序列比对分析 | 第27-32页 |
| 2.3.3 花鲡AVTRs和ITR基因系统进化树的构建 | 第32-36页 |
| 第3章 花鳗鲡AVTRs和ITR基因应对盐度变化时的表达模式分析 | 第36-57页 |
| 3.1 实验材料、仪器与试剂 | 第36-37页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第36页 |
| 3.1.2 实验仪器设备 | 第36页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第36-37页 |
| 3.2 实验方法 | 第37-42页 |
| 3.2.1 不同盐度处理下花鳗鲡各组织RNA的提取以及cDNA的合成 | 第37页 |
| 3.2.2 实时荧光定量PCR | 第37-38页 |
| 3.2.3 花鳗鲡AVTRV1a2多克隆抗体的制备 | 第38-41页 |
| 3.2.4 蛋白质免疫印迹(Western blot) | 第41-42页 |
| 3.3 实验结果 | 第42-53页 |
| 3.3.1 花鳗鲡AVTRs和ITR基因的组织分布情况 | 第42-44页 |
| 3.3.2 不同盐度下花鳗鲡AVTRs和ITR基因的mRNA表达变化规律 | 第44-47页 |
| 3.3.3 花鳗鲡AVTRV1a2多克隆抗体制备结果 | 第47-50页 |
| 3.3.4 不同盐度下花鳗鲡脑AVTRV1a2蛋白表达情况 | 第50页 |
| 3.3.5 花鳗鲡AVTRs和ITR基因与渗透调节相关离子基因钠钾泵(Sodiumpotassium pump,Na~+K~+-ATPase,NKA)、囊性纤维化穿膜传导调节蛋白(Cysticfibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)、Na~+/H~+ exchanger 8(NHE8)的相关性分析 | 第50-53页 |
| 3.4 讨论 | 第53-57页 |
| 第4章 花鳗鲡AmHSP90、AmHSP70和AmHSC70基因的克隆与生物信息学分析 | 第57-65页 |
| 4.1 材料与方法 | 第57页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第57页 |
| 4.1.2 主要仪器设备 | 第57页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第57页 |
| 4.2 实验方法 | 第57-59页 |
| 4.2.1 总RNA的提取与全长的克隆 | 第57页 |
| 4.2.2 生物信息学分析方法 | 第57-59页 |
| 4.3 实验结果 | 第59-64页 |
| 4.3.1 花鳗鲡Amsp90、AmHSP70和AmHSC70基因全长及生物信息学分析 | 第59-62页 |
| 4.3.2 花鳗鲡AmHSP90、AmHSP70和AmHSC70多重序列比对分析 | 第62-63页 |
| 4.3.3 花鳗鲡AmHSP90、AmHSP70和AmHSC70基因同源性分析及系统进化树的构建 | 第63-64页 |
| 4.4 讨论 | 第64-65页 |
| 第5章 嗜水气单胞菌刺激下花鳗鲡AmHSP90、AmHSP70和AmHSC70基因表达模式分析 | 第65-71页 |
| 5.1 实验材料 | 第65页 |
| 5.2 实验方法 | 第65页 |
| 5.2.1 嗜水气单胞菌的培养 | 第65页 |
| 5.2.2 对照组花鳗鲡各组织RNA的提取以及cDNA的合成 | 第65页 |
| 5.2.3 实验组花鳗鲡各组织RNA的提取以及cDNA的合成 | 第65页 |
| 5.2.4 荧光定量PCR | 第65页 |
| 5.3 实验结果 | 第65-69页 |
| 5.3.1 荧光定量PCR检测AmHSP90、AmHSP70和AmHSC70 mRNA组织分布 | 第65-66页 |
| 5.3.2 嗜水气单胞菌刺激下AmHSP90、AmHSP70和AmHSC70 mRNA的表达模式 | 第66-69页 |
| 5.4 讨论 | 第69-71页 |
| 第6章 小结 | 第71-73页 |
| 6.1 花鳗鲡AVTRs和ITR的克隆、鉴定与表达分析 | 第71-72页 |
| 6.2 花鳗鲡三个热休克蛋白基因(AmHSP90、AmHSP70和AmHSC70)的克隆、鉴定与表达分析 | 第72页 |
| 6.3 研究展望 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-87页 |
| 在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第87-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
