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抗沙门氏菌PEG菌毛单克隆抗体的研制及初步临床应用

中文摘要第3-5页
Abstract第5-6页
符号说明第10-11页
文献综述第11-30页
    综述一 沙门氏菌PEG菌毛研究进展第11-15页
        1 PEG菌毛基因进化和推进蛋白分类第11-12页
        2 PEG菌毛的分子生物学特征第12-13页
        3 PEG菌毛的表达第13-14页
        4 PEG菌毛在致病性中发挥的作用第14页
        5 未来研究方向第14页
        6 展望第14-15页
    综述二 沙门氏菌检测方法研究进展第15-23页
        1 传统检测方法第15-16页
        2 免疫学检测技术第16-18页
        3 分子生物学技术第18-20页
        4 沙门氏菌其它检测方法第20-21页
        5 单克隆抗体在沙门氏菌检测中的应用第21-22页
        6 小结第22-23页
    参考文献第23-30页
第一章 沙门氏菌菌毛主要亚单位基因pegA的原核表达第30-43页
    1 材料第31-32页
        1.1 菌株及载体第31页
        1.2 培养基和主要试剂第31页
        1.3 主要仪器设备第31-32页
    2 方法第32-37页
        2.1 pegA基因目的片段的扩增第32页
        2.2 pMD19-T-pegA重组质粒的构建第32-34页
        2.3 pET-22b (+)-pegA重组质粒的构建第34-35页
        2.4 pegA基因的表达及SDS-PAGE分析第35-36页
        2.5 大量诱导表达重组蛋白及鉴定第36-37页
        2.6 Western blot检测纯化蛋白第37页
    3、结果第37-40页
        3.1 PCR扩增pegA基因第37页
        3.2 重组质粒pMD19-T-pegA酶切鉴定第37-38页
        3.3 重组质粒pET-22b(+)-pegA菌落PCR鉴定第38页
        3.4 重组质粒pMD19-T-pegA和pET-22b(+)-pegA的测序鉴定结果第38-39页
        3.5 融合蛋白诱导表达及分析第39-40页
        3.6 PegA蛋白量测定第40页
        3.7 Western blot鉴定结果第40页
    4、讨论第40-42页
    参考文献第42-43页
第二章 抗沙门氏菌PEG菌毛单克隆抗体的制备第43-56页
    1 材料第44-45页
    2、方法第45-50页
        2.1 抗原的制备第45页
        2.2 抗原乳化第45页
        2.3 动物免疫第45页
        2.4 骨髓瘤细胞SP2/O制备第45页
        2.5 饲养细胞的制备第45-46页
        2.6 脾淋巴细胞的制备第46页
        2.7 细胞融合与杂交瘤细胞的选择性培养第46-47页
        2.8 杂交瘤细胞株筛选第47-48页
        2.9 杂交瘤细胞的复苏第48页
        2.10 腹水的制备及效价检测第48-49页
        2.11 单抗亚类鉴定第49页
        2.12 单克隆抗体特异性检测第49-50页
    3、结果第50-53页
        3.1 免疫小鼠血清效价检测结果第50-51页
        3.2 间接ELISA最佳条件确定第51页
        3.3 细胞融合第51页
        3.4 腹水纯化及浓度测定第51-52页
        3.5 腹水抗体效价第52页
        3.6 抗体的亚类鉴定第52-53页
        3.7 单克隆抗体稳定性第53页
        3.8 单克隆抗体特异性检测第53页
    4、讨论第53-55页
    参考文献第55-56页
第三章 抗沙门氏菌PEG菌毛单克隆抗体的初步临床应用第56-61页
    1、材料第57页
        1.1 菌株和抗体第57页
        1.2 主要试剂第57页
        1.3 主要仪器设备第57页
    2、方法第57-58页
        2.1 冻存菌复苏培养第57页
        2.2 PegA单抗介导的玻板凝集方法的临床应用第57-58页
        2.3 沙门氏菌诊断血清平行对照第58页
    3、结果第58-59页
    4、讨论第59-60页
    参考文献第60-61页
全文总结第61-62页
致谢第62-63页

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