| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 缩略语对照表 | 第6-10页 |
| 第一章 绪论 | 第10-23页 |
| 1.1 金属螯合亲和色谱 | 第10-12页 |
| 1.1.1 亲和色谱技术概述 | 第10-11页 |
| 1.1.2 金属螯合亲和色谱技术的发展 | 第11-12页 |
| 1.2 金属螯合亲和色谱的原理 | 第12-14页 |
| 1.2.1 IMAC的基本原理 | 第12-13页 |
| 1.2.2 IMAC的作用机理 | 第13-14页 |
| 1.3 金属螯合亲和色谱介质的组成 | 第14-17页 |
| 1.3.1 固相载体 | 第14-15页 |
| 1.3.2 间隔臂 | 第15页 |
| 1.3.3 螯合配基 | 第15-16页 |
| 1.3.4 金属离子 | 第16-17页 |
| 1.4 金属螯合亲和色谱介质的合成 | 第17-18页 |
| 1.5 影响蛋白质在IMAC介质上吸附与解吸的因素 | 第18-19页 |
| 1.5.1 蛋白质表面配体的影响 | 第18页 |
| 1.5.2 溶液pH值的影响 | 第18-19页 |
| 1.5.3 离子强度的影响 | 第19页 |
| 1.5.4 竞争洗脱剂的影响 | 第19页 |
| 1.6 金属螯合亲和色谱介质的应用进展 | 第19-21页 |
| 1.6.1 蛋白质的分离与纯化 | 第20页 |
| 1.6.2 蛋白质的识别和鉴定 | 第20-21页 |
| 1.6.3 其他领域的应用 | 第21页 |
| 论文的研究思路和目的 | 第21-23页 |
| 第二章 新型镍离子亲和色谱介质的制备 | 第23-36页 |
| 2.1 前言 | 第23页 |
| 2.2 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.2.1 材料 | 第23页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第23-24页 |
| 2.2.3 主要仪器 | 第24-25页 |
| 2.3 实验方法 | 第25-30页 |
| 2.3.1 Lys(Boc)-OEt的合成 | 第25-26页 |
| 2.3.2 Fmoc-Lys-OEt的合成 | 第26页 |
| 2.3.3 新型镍离子亲和色谱介质的制备 | 第26-29页 |
| 2.3.4 微球氨基检测与镍离子的检测 | 第29页 |
| 2.3.5 亲和介质的再生 | 第29页 |
| 2.3.6 固定化镍离子含量测定 | 第29-30页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第30-34页 |
| 2.4.1 合成产物表征 | 第30页 |
| 2.4.2 微球检测结果 | 第30-32页 |
| 2.4.3 镍离子检测结果 | 第32-33页 |
| 2.4.4 亲和介质再生 | 第33页 |
| 2.4.5 载镍量测定结果 | 第33-34页 |
| 2.4.6 缓冲液的pH对镍离子的影响 | 第34页 |
| 2.5 本章小结 | 第34-36页 |
| 第三章 新型镍离子亲和色谱介质的亲和性能测试 | 第36-50页 |
| 3.1 前言 | 第36页 |
| 3.2 实验材料 | 第36-38页 |
| 3.2.1 材料与试剂 | 第36-37页 |
| 3.2.2 主要仪器 | 第37页 |
| 3.2.3 溶液的配制 | 第37-38页 |
| 3.3 实验方法 | 第38-40页 |
| 3.3.1 His-Lys-Tyr三肽的合成 | 第38-39页 |
| 3.3.2 Phe-His-Thr三肽的合成 | 第39页 |
| 3.3.3 样品的制备 | 第39页 |
| 3.3.4 含组氨酸短肽的亲和性能测试 | 第39-40页 |
| 3.3.5 混合肽分离纯化的初步研究 | 第40页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第40-48页 |
| 3.4.1 合成产物表征 | 第40-41页 |
| 3.4.2 各成分HPLC分析结果 | 第41-43页 |
| 3.4.3 纯化三肽的分析结果 | 第43-46页 |
| 3.4.4 混合肽的分离纯化结果 | 第46-48页 |
| 3.5 本章小结 | 第48-50页 |
| 第四章 镍离子亲和色谱介质用于纯化艾塞那肽片段的研究 | 第50-66页 |
| 4.1 前言 | 第50-51页 |
| 4.2 实验材料 | 第51-53页 |
| 4.2.1 材料与试剂 | 第51页 |
| 4.2.2 仪器 | 第51页 |
| 4.2.3 缓冲液的配制 | 第51-53页 |
| 4.3 实验方法 | 第53-55页 |
| 4.3.1 艾塞那肽1 | 第53-55页 |
| 4.3.2 艾塞那肽1片段与2 | 第55页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第55-65页 |
| 4.4.1 各样品HPLC分析结果 | 第55-57页 |
| 4.4.2 上样缓冲体系pH值对艾塞那肽1 | 第57-58页 |
| 4.4.3 不同缓冲体系对艾塞那肽1 | 第58-61页 |
| 4.4.4 洗脱方式对艾塞那肽1 | 第61-62页 |
| 4.4.5 艾塞那肽1 | 第62-65页 |
| 4.5 本章小结 | 第65-66页 |
| 第五章 总结与展望 | 第66-68页 |
| 5.1 总结 | 第66-67页 |
| 5.2 展望 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 附录 | 第74-80页 |
| 致谢 | 第80-82页 |
| 攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第82页 |