摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
英文缩略语表 | 第8-11页 |
前言 | 第11-13页 |
第一章 绪论 | 第13-23页 |
1.1 胃癌及其治疗概况 | 第13-14页 |
1.1.1 胃癌简介 | 第13页 |
1.1.2 胃癌中常见的基因异常及其靶向治疗现状 | 第13-14页 |
1.2 选择性剪切的概述 | 第14-16页 |
1.2.1 选择性剪切的定义 | 第14-15页 |
1.2.2 异常的选择性剪切与肿瘤的关系 | 第15-16页 |
1.3 c-MET基因的概述 | 第16-22页 |
1.3.1 c-MET基因结构及其介导的信号通路 | 第16-18页 |
1.3.2 c-MET基因与癌症的关系 | 第18-19页 |
1.3.3 c-MET基因异常的选择性剪切与胃癌的关系 | 第19-21页 |
1.3.4 c-MET基因选择性剪切突变体的检测方法 | 第21-22页 |
1.4 立题背景及意义 | 第22-23页 |
第二章 c-MET基因存在的多种选择性剪切的发现 | 第23-33页 |
2.1 转录组测序的原理 | 第23页 |
2.2 材料与仪器 | 第23-24页 |
2.2.1 材料与试剂 | 第23-24页 |
2.2.2 仪器与耗材 | 第24页 |
2.3 转录组测序的步骤 | 第24-28页 |
2.3.1 BGC-823胃癌细胞系总RNA的提取及质量检测 | 第24-28页 |
2.3.1.1 细胞复苏,培养及传代 | 第24-25页 |
2.3.1.2 细胞总RNA提取 | 第25-26页 |
2.3.1.3 文库构建前总RNA质量检测 | 第26页 |
2.3.1.4 实验结果 | 第26-28页 |
2.3.2 文库构建 | 第28页 |
2.3.3 上机测序 | 第28页 |
2.4 测序结果分析 | 第28-31页 |
2.5 本章小结 | 第31-33页 |
第三章 胃癌样本中c-MET-e2-D的检测 | 第33-47页 |
3.1 c-MET2号外显子缺失质粒的构建 | 第33-38页 |
3.1.1 材料 | 第35页 |
3.1.2 试剂与仪器 | 第35-36页 |
3.1.3 溶液与培养基配制 | 第36页 |
3.1.4 实验步骤 | 第36-37页 |
3.1.5 实验结果 | 第37页 |
3.1.6 本节小结 | 第37-38页 |
3.2 在细胞系及胃癌样本中对c-MET-e2-D的验证 | 第38-47页 |
3.2.1 TaqMan探针法原理 | 第39-40页 |
3.2.2 材料 | 第40页 |
3.2.3 试剂与仪器 | 第40页 |
3.2.4 细胞系总RNA的提取 | 第40页 |
3.2.5 胃癌新鲜组织样本总RNA提取 | 第40-41页 |
3.2.6 胃癌石蜡组织样本总RNA提取 | 第41-43页 |
3.2.7 细胞系及胃癌样本中c-MET-e2-D的检测 | 第43页 |
3.2.8 实验结果与分析 | 第43-45页 |
3.2.9 本节小结 | 第45-47页 |
第四章 胃癌样本中c-MET-e2-D表达水平的检测及结果的相关性分析 | 第47-56页 |
4.1 材料与仪器 | 第48页 |
4.2 实验方法 | 第48-49页 |
4.2.1 在样本中检测c-MET、c-MET-e2-D及ACTB基因的表达 | 第48页 |
4.2.2 标准曲线的制备 | 第48-49页 |
4.3 数据分析方法 | 第49-52页 |
4.4 实验结果 | 第52-54页 |
4.4.1 c-MET-e2-D转录本在胃癌样本及正常样本中的表达 | 第52-53页 |
4.4.2 c-MET-e2-D基因的表达与肿瘤TNM分期的关系 | 第53-54页 |
4.4.3 在胃癌及正常组织中c-MET-e2-D与c-MET基因的关系 | 第54页 |
4.5 本章小结 | 第54-56页 |
全文总结 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-68页 |
攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第68-69页 |
致谢 | 第69页 |