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不同品种猪感染圆环病毒Ⅱ型后肺组织差异miRNA的鉴定及功能分析

中文摘要第1-10页
Abstract第10-12页
1 前言第12-24页
   ·猪圆环病毒病研究进展第12-16页
     ·猪圆环病毒的发现和命名第12页
     ·病原学特征第12-13页
     ·分子生物学特征第13页
     ·流行病学特征第13-14页
     ·猪圆环病毒Ⅱ型相关疾病第14-16页
   ·miRN A的研究进展第16-20页
     ·miRN A的发现与命名第16-17页
     ·miRN A的起源第17-18页
     ·miRN A的合成第18-19页
     ·RNA诱导沉默复合物(RISC)的生成第19-20页
     ·miRN A的调控第20页
   ·miRN A的高通量测序及生物信息学分析第20-23页
     ·小RNA测序第21页
     ·miRN A靶基因的预测第21-23页
     ·miRN A靶基因的鉴定第23页
   ·本研究目的意义第23-24页
2 材料与方法第24-36页
   ·实验材料第24-27页
     ·实验动物第24页
     ·样品采集第24页
     ·毒株第24页
     ·主要仪器设备第24-25页
     ·主要试剂及来源第25-26页
     ·主要数据库及生物信息学软件第26页
     ·常用试剂的配制第26-27页
   ·实验方法第27-36页
     ·引物序列及Tm值第27页
     ·肺组织总RNA的提取第27-29页
     ·cDNA文库构建第29-30页
     ·Illumina/Solexa测序数据分析第30-31页
     ·miRN A表达谱的qRT-PCR验证分析第31-33页
     ·上调差异表达miRNA富集通路及靶基因预测第33页
     ·上调差异表达miRNA可能靶基因分析第33-36页
3 结果与分析第36-55页
   ·总RNA的提取,小RNA文库的构建及Solexa测序分析第36-43页
     ·总RNA的检测第36页
     ·RNA质量检测及测序的文库构建第36-37页
     ·小RNA测序数据处理及片段长度分布统计第37-38页
     ·文库间公共与特有序列及基因组定位分析第38-42页
     ·小RNA序列的分类和注释分析第42-43页
   ·PCV2感染后肺组织miRNAs的鉴定第43-47页
     ·已知miRN A的比对第43页
     ·已知miRN A差异表达分析第43-45页
     ·差异表达miRNA聚类分析第45-47页
     ·新miRN A预测第47页
   ·已知miRN A表达的qRT-PCR验证第47-50页
     ·标准曲线的制备第47-48页
     ·差异表达miRNA的定量验证第48-50页
   ·上调差异表达miRNA富集通路及靶基因预测第50-55页
     ·四个上调表达miRNA的富集通路分析第50-52页
     ·四个上调表达miRNA的靶基因分析第52-54页
     ·miRN A靶基因NFAT5、IGF1定量分析第54-55页
4 讨论第55-60页
   ·Solexa测序数据分析第55页
   ·差异表达miRN A分析第55-57页
   ·四个上调表达miRNA功能分析第57-58页
   ·靶基因功能分析第58-60页
5 结论第60-61页
参考文献第61-70页
致谢第70-71页
攻读硕士期间发表论文情况第71页

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