摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-13页 |
1 引言 | 第13-28页 |
·猪肉生产与肉质 | 第13页 |
·肌内脂肪 | 第13-16页 |
·影响肌内脂肪的因素 | 第14-15页 |
·影响肌内脂肪的相关基因 | 第15-16页 |
·PID1基因研究现状 | 第16-17页 |
·动物转基因技术 | 第17-19页 |
·显微注射法 | 第17-18页 |
·逆转录病毒载体法 | 第18页 |
·胚胎干细胞介导法 | 第18-19页 |
·体细胞核移植法 | 第19页 |
·精子介导转基因 | 第19-22页 |
·精子介导转基因的机理 | 第19-20页 |
·精子介导转基因的方法 | 第20-22页 |
·磁性纳米颗粒转染 | 第22-24页 |
·转基因动物检测方法 | 第24-26页 |
·可视化识别检测 | 第24页 |
·基因组(DNA)水平检测 | 第24-25页 |
·转录(RNA)水平检测 | 第25页 |
·翻译(蛋白质)水平检测 | 第25-26页 |
·生物活性功能检测 | 第26页 |
·动物转基因技术的应用及存在的问题 | 第26-27页 |
·转基因技术的应用 | 第26页 |
·动物转基因技术存在的问题 | 第26-27页 |
·本研究的目的、意义 | 第27-28页 |
2 材料与方法 | 第28-59页 |
·试验材料 | 第28-35页 |
·试验动物与样品采集 | 第28页 |
·主要仪器设备 | 第28-29页 |
·主要试剂及耗材 | 第29-31页 |
·主要试剂的配制 | 第31-34页 |
·主要数据库及生物软件 | 第34-35页 |
·试验方法 | 第35-59页 |
·重组质粒的扩增与提取 | 第35-38页 |
·精子介导制备转基因猪 | 第38-39页 |
·出生仔猪标记及基因组提取 | 第39-40页 |
·PCR检测阳性率 | 第40-41页 |
·引物设计 | 第40页 |
·PCR扩增 | 第40-41页 |
·Southern blot检测阳性率 | 第41-46页 |
·转基因猪外源基因转录水平测定 | 第46-50页 |
·转基因猪外源基因翻译水平检测 | 第50-54页 |
·转基因猪生物功能检测 | 第54-56页 |
·荧光定量PCR检测外源基因拷贝数 | 第56-58页 |
·转基因猪安全性的检测 | 第58页 |
·数据分析 | 第58-59页 |
3 结果与分析 | 第59-75页 |
·质粒PCR重鉴定 | 第59页 |
·精子介导制备转基因猪 | 第59-60页 |
·PCR检测阳性率 | 第60-61页 |
·Southern blot检测阳性率 | 第61-63页 |
·探针模板制备及标记效率检测 | 第61页 |
·阳性率检测 | 第61-63页 |
·转基因猪外源基因转录水平测定 | 第63-66页 |
·总RNA提取以及mRNA反转录 | 第63-64页 |
·荧光定量PCR检测 | 第64-66页 |
·转基因猪外源基因翻译水平检测 | 第66-68页 |
·绿色荧光蛋白检测 | 第66-67页 |
·组织间PID1蛋白差异 | 第67-68页 |
·试验猪肉质测定 | 第68-69页 |
·外源基因拷贝数检测 | 第69-72页 |
·标准曲线方程的建立 | 第69-71页 |
·转基因猪外源基因拷贝数分析 | 第71页 |
·荧光定量PCR检测与Southern blot分析转基因拷贝数比较 | 第71-72页 |
·转基因猪生长发育及安全性的检测 | 第72-75页 |
·转基因猪生长发育情况 | 第72-73页 |
·PCR检测外源基因的逃逸情况 | 第73-74页 |
·精液品质检测 | 第74页 |
·F0代留种猪繁殖情况 | 第74-75页 |
4 讨论 | 第75-79页 |
·转基因方法的选择 | 第75页 |
·转基因检测方法 | 第75-77页 |
·PID1基因表达情况 | 第77-78页 |
·转基因安全性问题 | 第78-79页 |
5 结论 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-87页 |
致谢 | 第87-88页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第88页 |