摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
引言 | 第13-26页 |
第一节 甲壳类动物雌核发育的研究进展 | 第13-23页 |
1 雌核发育分类 | 第13-14页 |
·天然雌核发育 | 第13页 |
·人工诱导雌核发育 | 第13-14页 |
2 雌核发育技术 | 第14-16页 |
·精子遗传物质的灭活 | 第14-15页 |
·卵细胞染色体的二倍化 | 第15-16页 |
3 雌核发育二倍体鉴别 | 第16-17页 |
4 雌核发育后代的生长和发育 | 第17-18页 |
5 雌核发育研究的应用 | 第18-19页 |
6 动物性别决定机制概述 | 第19-20页 |
·遗传性别决定型(GSD) | 第19-20页 |
·XY型与XO型 | 第19-20页 |
·ZW型与ZO型 | 第20页 |
·单二倍体性决定型 | 第20页 |
·环境性别决定型(ESD) | 第20页 |
7 甲壳动物性别决定研究 | 第20-23页 |
·甲壳动物性染色体的研究 | 第21页 |
·甲壳动物性别决定相关因素 | 第21-23页 |
·促胸腺对甲壳类动物性别决定的影响 | 第21-22页 |
·环境对性别决定的影响 | 第22-23页 |
第二节 动物精子受精功能相关基因研究进展 | 第23-24页 |
1 精子运动能力及获能相关基因 | 第23页 |
2 精子顶体反应相关基因 | 第23-24页 |
3 精子穿入透明带相关基因 | 第24页 |
4 精卵融合相关基因 | 第24页 |
第三节 本研究的目的和意义 | 第24-26页 |
第一章 酶解制备游离青虾精子方法的研究 | 第26-32页 |
1 实验材料 | 第26-27页 |
·实验虾 | 第26-27页 |
·试剂 | 第27页 |
·仪器 | 第27页 |
2 试验方法 | 第27-28页 |
·精荚采集 | 第27页 |
·雄虾的饲养 | 第27页 |
·电脉冲刺激 | 第27页 |
·酶解精荚与精子染色观察 | 第27-28页 |
3 结果与分析 | 第28-30页 |
·正交试验 | 第28-29页 |
·台盼蓝染色观察 | 第29页 |
·优化验证实验 | 第29-30页 |
4 讨论 | 第30-32页 |
第二章X射线灭活青虾精子的研究 | 第32-39页 |
1 实验材料 | 第32-33页 |
·实验虾 | 第32页 |
·试剂 | 第32页 |
·仪器 | 第32-33页 |
2 试验方法 | 第33-35页 |
·雌、雄虾的饲养 | 第33页 |
·雄虾的饲养 | 第33页 |
·雌虾的饲养 | 第33页 |
·X射线照射活体雄性青虾 | 第33页 |
·雌雄交配产卵 | 第33页 |
·卵的发育 | 第33-34页 |
·彗星实验 | 第34-35页 |
·制片 | 第34页 |
·裂解 | 第34页 |
·解旋、电泳和中和 | 第34-35页 |
·染色、镜检及数据分析 | 第35页 |
3 结果与分析 | 第35-37页 |
·抱卵天数 | 第35页 |
·卵的畸形率 | 第35-36页 |
·彗星实验 | 第36-37页 |
4 讨论 | 第37-39页 |
第三章 青虾丝氨酸蛋白酶Mn SP基因的克隆与表达分析 | 第39-51页 |
1 实验材料 | 第39-40页 |
·实验虾 | 第39页 |
·试剂 | 第39-40页 |
·仪器 | 第40页 |
2 实验方法 | 第40-46页 |
·试验用品的预处理 | 第40页 |
·青虾总RNA的提取 | 第40页 |
·青虾总RNA浓度及质量检测 | 第40-41页 |
·总RNA第一链c DNA的合成 | 第41页 |
·青虾Mn SP基因中间片段的获得与验证 | 第41-42页 |
·PCR产物的克隆测序 | 第42-43页 |
·PCR扩增产物纯化回收 | 第42页 |
·载体连接 | 第42-43页 |
·产物转化及阳性克隆筛选 | 第43页 |
·青虾Mn SP基因c DNA全序列的获得 | 第43-45页 |
·青虾Mn SP基因的 3′ RACE | 第43-44页 |
·青虾Mn SP基因的 5′ RACE | 第44-45页 |
·生物信息学分析 | 第45页 |
·青虾Mn SP基因不同组织表达和时空表达的实时荧光定量PCR | 第45-46页 |
·引物设计与检验 | 第45-46页 |
·实时荧光定量PCR反应 | 第46页 |
·实时荧光定量PCR分析 | 第46页 |
3 结果与分析 | 第46-49页 |
·青虾各个样品提取的总RNA质量及浓度检测 | 第46页 |
·青虾Mn SP基因全长c DNA序列结构特征分析 | 第46-48页 |
·荧光定量PCR结果分析 | 第48-49页 |
·青虾Mn SP基因在成体不同组织中的表达 | 第48-49页 |
·青虾Mn SP基因在胚胎期、出膜幼体及变态后发育不同时期中的表达 | 第49页 |
4 讨论 | 第49-51页 |
全文结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-60页 |
附录 实验试剂与配置 | 第60-62页 |
致谢 | 第62-64页 |
已发表或已接收的文章 | 第64页 |