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林麝源铜绿假单胞菌外膜蛋白的提取及免疫原性的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
符号说明第8-12页
1 文章综述第12-23页
   ·铜绿假单胞菌病概述第12-14页
     ·病原学第12-13页
     ·感染现状第13页
     ·血清型第13页
     ·致病机理和病理变化第13-14页
     ·防制措施第14页
   ·我国林麝养殖现状第14-15页
   ·铜绿假单胞菌的主要免疫原及相关疫苗第15-17页
     ·磷酸脂多糖第15-16页
     ·菌毛及鞭毛第16页
     ·外毒素A第16页
     ·外膜蛋白第16-17页
   ·铜绿假单胞菌外膜蛋白的研究进展第17-22页
     ·铜绿假单胞菌OMP的结构与组成第17-18页
     ·铜绿假单胞菌OMP通透性与耐药性第18-20页
     ·铜绿假单胞菌OMP的免疫原性及保护性第20-21页
     ·铜绿假单胞菌OMP疫苗的应用前景第21-22页
   ·本研究的目的及意义第22-23页
2 试验材料第23-26页
   ·供试菌株第23页
   ·试验动物第23页
   ·主要培养基及缓冲液第23-24页
     ·培养基等第23页
     ·SDS-PAGE及Western Blotting涉及溶液第23-24页
     ·ELISA涉及溶液第24页
   ·主要药品及试剂第24-26页
   ·试验仪器第26页
3 试验方法第26-33页
   ·菌株的筛选、毒力的测定及兔抗铜绿假单胞菌全菌免疫血清的制备第26-28页
     ·菌株的筛选第26-27页
       ·目的菌株再分离第26-27页
     ·铜绿假单胞菌半数致死量(LD_(50))的测定第27页
     ·兔抗铜绿假单胞菌全菌血清的制备及血清IgG的纯化第27-28页
   ·铜绿假单胞菌外膜蛋白的纯化及鉴定第28-31页
     ·增菌第28-29页
     ·收集菌体第29页
     ·超声破碎粗提取外膜蛋白第29页
     ·外膜蛋白的提取和纯化第29页
     ·外膜蛋白的SDS-PAGE分析第29-30页
     ·外膜蛋白免疫印迹分析(Western-blotting)第30-31页
   ·外膜蛋白免疫原性的研究第31-33页
     ·鼠抗血清的制备第31页
     ·间接ELISA的方法检测外膜蛋白主动免疫时抗体的动态变化第31-32页
     ·淋巴细胞增殖能力检测第32-33页
     ·外周血清中细胞因子含量检测第33页
   ·外膜蛋白保免疫护性的研究第33页
     ·外膜蛋白的主动免疫保护第33页
     ·外膜蛋白抗血清的被动免疫保护第33页
4 试验结果第33-47页
   ·菌株筛选结果第33-36页
     ·动物致病性试验结果第33-34页
     ·目的菌株再分离结果第34-35页
     ·sp-19株半数致死量(LD_(50))的测定第35页
     ·组织切片观察第35-36页
     ·兔抗sp-19株全菌血清的制备及纯化第36页
   ·铜绿假单胞菌外膜蛋白的纯化及鉴定第36-38页
     ·外膜蛋白SDS-PAGE分析第36-37页
     ·外膜蛋白免疫印迹分析(Western-blotting)第37-38页
   ·外膜蛋白免疫原性的研究第38-44页
     ·灭活检验第38页
     ·间接ELISA方法检测外膜蛋白主动免疫时抗体的动态变化第38-40页
     ·淋巴细胞增殖能力检测第40-43页
     ·细胞因子含量检测第43-44页
   ·外膜蛋白免疫保护性的研究第44-47页
     ·外膜蛋白的主动免疫保护第45页
     ·外膜蛋白抗血清的被动免疫保护第45-47页
5 讨论分析第47-51页
   ·菌株的筛选第47页
   ·铜绿假单胞菌外膜蛋白的纯化及鉴定第47-48页
   ·外膜蛋白免疫原性的研究第48-51页
     ·间接ELISA检测外膜蛋白的主动免疫时抗体的动态变化第49页
     ·淋巴细胞增殖能力检测第49页
     ·外周血清中细胞因子含量检测第49-50页
     ·外膜蛋白保免疫护性的研究第50-51页
6 结论第51页
7 创新性第51-52页
参考文献第52-59页
致谢第59页

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