摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-21页 |
1 鸭源巴氏杆菌研究概况 | 第10-11页 |
2 鸭源沙门氏菌研究概况 | 第11-13页 |
3 原生质体融合技术 | 第13-20页 |
·原生质体的制备和再生 | 第13-16页 |
·菌龄对原生质体制备的影响 | 第14页 |
·溶菌酶对原生质体制备的影响 | 第14-15页 |
·预处理方式对原生质体制备的影响 | 第15页 |
·渗透压稳定剂对原生质体制备的影响 | 第15-16页 |
·其他影响因素 | 第16页 |
·细菌原生质体的融合 | 第16页 |
·细菌原生质体融合及融合后再生 | 第16页 |
·亲本菌株标记的筛选 | 第16-17页 |
·细菌原生质体再生的影响因素 | 第17页 |
·融合子的筛选、检出及稳定性培养 | 第17-18页 |
·微生物原生质体融合的应用及细菌原生质体融合与其他微生物原生质体融合的区别 | 第18-19页 |
·原生质体融合技术的展望 | 第19-20页 |
4 本研究的目的意义 | 第20-21页 |
第二章 亲本菌株的筛选 | 第21-32页 |
1 材料 | 第21-23页 |
·供试菌株 | 第21页 |
·试剂 | 第21-22页 |
·诊断血清 | 第22页 |
·培养基 | 第22页 |
·实验仪器 | 第22-23页 |
2 方法 | 第23-25页 |
·两亲本菌株筛选 | 第23-25页 |
·抗生素浓度应用试验 | 第25页 |
3 结果 | 第25-30页 |
·鸭源沙门氏菌筛选结果 | 第25-30页 |
·亲本菌株抗生素浓度应用试验 | 第30页 |
4 讨论 | 第30-32页 |
第三章 鸭源沙门氏菌和鸭源巴氏杆菌原生质体融合及融合菌株筛选 | 第32-43页 |
1 材料 | 第32-34页 |
·供试菌株 | 第32页 |
·主要试剂 | 第32页 |
·培养基 | 第32-33页 |
·溶液配制 | 第33-34页 |
·主要仪器 | 第34页 |
2 方法 | 第34-38页 |
·鸭源沙门氏菌原生质体制备与再生 | 第34-35页 |
·鸭源巴氏杆菌原生质体制备与再生 | 第35-36页 |
·原生质体制备率和再生率计算公式 | 第36页 |
·原生质体融合及融合菌株的筛选 | 第36-37页 |
·融合菌株稳定性及形态鉴定 | 第37页 |
·融合菌株及亲本S_6、CBa生化试验 | 第37页 |
·融合菌株血清学鉴定 | 第37-38页 |
3 结果 | 第38-42页 |
·S_6和CBa原生质体制备率和再生率 | 第38-39页 |
·融合菌株菌落及染色镜检形态 | 第39-41页 |
·融合菌株及亲本S_6、CBa生化鉴定结果 | 第41-42页 |
·融合菌株血清学实验结果 | 第42页 |
4 讨论 | 第42-43页 |
第四章 融合菌株双重PCR检测 | 第43-49页 |
1 材料 | 第43-45页 |
·供试菌株 | 第43页 |
·主要试剂 | 第43-44页 |
·主要培养基 | 第44页 |
·主要仪器 | 第44-45页 |
2 方法 | 第45-46页 |
·融合菌株及亲本菌株基因组DNA提取 | 第45页 |
·双重PCR检测融合菌株 | 第45-46页 |
·PCR产物纯化回收 | 第46页 |
·目的片段连接转化与克隆表达 | 第46页 |
3 结果 | 第46-48页 |
·融合菌株双重PCR检测结果 | 第46-47页 |
·重PCR产物测序及比对结果 | 第47-48页 |
4 讨论 | 第48-49页 |
第五章 融合菌株及亲本菌株外膜蛋白SDS-PAGE电泳 | 第49-53页 |
1 材料 | 第49-50页 |
·供试菌株 | 第49页 |
·主要试剂 | 第49-50页 |
·主要培养基 | 第50页 |
·主要仪器 | 第50页 |
2 方法 | 第50-52页 |
·融合菌株及亲本菌株外膜蛋白提取 | 第50-51页 |
·SDS-PAGE电泳 | 第51-52页 |
3 结果 | 第52页 |
4 讨论 | 第52-53页 |
第六章 结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-59页 |
致谢 | 第59页 |