| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-24页 |
| 第一节 植物逆境生理 | 第10-14页 |
| 1. 高温胁迫对植物的影响 | 第10-13页 |
| ·高温胁迫对植物生长发育的影响 | 第10-11页 |
| ·高温胁迫对细胞膜结构的破坏 | 第11页 |
| ·高温抑制植物的光合作有和呼吸作用 | 第11页 |
| ·高温胁迫对植物外观形态的影响 | 第11-12页 |
| ·高温对植物体内水分影响 | 第12页 |
| ·高温胁迫对植物抗氧化系统的影响 | 第12页 |
| ·高温胁迫对植物激素的影响 | 第12-13页 |
| 2、其他逆境胁迫对植物的影响 | 第13-14页 |
| ·干旱胁迫对植物的影响 | 第13页 |
| ·低温胁迫对植物的影响 | 第13-14页 |
| ·高盐胁迫对植物的影响 | 第14页 |
| 第二节 热激蛋白(Hsps)研究进展 | 第14-24页 |
| 1. Hsp的发现 | 第14-15页 |
| 2. Hsp的分类 | 第15页 |
| 3. Hsp的结构上特点 | 第15-16页 |
| 4. Hsp的主要功能 | 第16-18页 |
| ·Hsp的分子伴侣功能 | 第16页 |
| ·Hsp与信号传递 | 第16-17页 |
| ·Hsp调控细胞凋亡 | 第17页 |
| ·Hsp与植物的抗逆性 | 第17-18页 |
| 5. Hsp90家族研究进展 | 第18-19页 |
| ·HSP90家族 | 第18-19页 |
| ·HSP90家族功能域 | 第19页 |
| 6 实时荧光定量PCR | 第19-22页 |
| ·实时荧光定量PCR的原理 | 第20页 |
| ·实时荧光定量PCR的检测方法 | 第20-21页 |
| ·实时定量PCR的优点 | 第21页 |
| ·实时定量PCR的缺点 | 第21-22页 |
| ·实时定量PCR技术的应用 | 第22页 |
| ·实时荧光定量PCR的展望 | 第22页 |
| 7. 本研究的目的与意义 | 第22-24页 |
| 第二章 OsHsp90基因的克隆及表达分析 | 第24-38页 |
| 1. 材料与方法 | 第24-31页 |
| ·植物材料、菌种和载体 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24页 |
| ·主要试剂及培养基 | 第24-25页 |
| ·主要试剂 | 第24-25页 |
| ·主要培养基 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-30页 |
| ·水稻日本晴逆境处理 | 第25-26页 |
| ·处理样品RNA提取 | 第26页 |
| ·RNA纯化 | 第26-27页 |
| ·RNA反转录 | 第27页 |
| ·OsHSP90基因的克隆 | 第27-30页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第30-31页 |
| ·引物设计 | 第30-31页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第31页 |
| ·实时荧光定量PCR数据处理 | 第31页 |
| 2. 结果与分析 | 第31-38页 |
| ·OsHSP90基因的克隆 | 第31-32页 |
| ·OsHSP90基因生物信息学分析 | 第32-35页 |
| ·OsHSP90基因的启动子序列分析 | 第32-33页 |
| ·OsHSP90蛋白的氨基酸序列分析及系统发育树的构建 | 第33-35页 |
| ·OsHSP90基因的在线表达分析 | 第35-36页 |
| ·OsHSP90基因在逆境条件下的表达分析 | 第36-38页 |
| 第三章 OsHSP90基因的原核表达及抗逆试验 | 第38-48页 |
| 1. 材料与方法 | 第38-43页 |
| ·菌株和质粒 | 第38页 |
| ·主要仪器 | 第38页 |
| ·主要试剂和培养基 | 第38-39页 |
| ·实验方法 | 第39-43页 |
| ·pET-32a：OsHSP90载体的构建 | 第39-40页 |
| ·融合蛋白的表达 | 第40-42页 |
| ·纯化融合蛋白 | 第42页 |
| ·表达水稻OsHSP90的大肠杆菌的抗逆实验 | 第42-43页 |
| 2. 结果与分析 | 第43-48页 |
| ·pET-32a：OsHSP90重组载体的构建 | 第43-44页 |
| ·融合蛋白的表达 | 第44-45页 |
| ·表达OsHSP90蛋白的大肠杆菌的抗逆分析 | 第45-48页 |
| 第四章 OsHSP90转基因植株的获得 | 第48-67页 |
| 1. 材料与方法 | 第48-61页 |
| ·植物材料、菌株及载体 | 第48-49页 |
| ·主要试剂及培养基 | 第49页 |
| ·主要试剂 | 第49页 |
| ·主要培养基 | 第49页 |
| ·主要仪器 | 第49-50页 |
| ·实验方法 | 第50-61页 |
| ·pCAMBIA1300：OsHSP90超表达载体及抑制表达载体的构建 | 第50-52页 |
| ·pCAMBIA1300：OsHSP90-GFP载体的构建 | 第52-55页 |
| ·农杆菌介导的转基因载体遗传转化 | 第55-56页 |
| ·转基因水稻的获得 | 第56-57页 |
| ·转基因水稻的检测 | 第57-59页 |
| ·水稻原生质体的制备及转化 | 第59-61页 |
| ·实时qRT-PCR检测转基因植株 | 第61页 |
| 2. 结果与分析 | 第61-67页 |
| ·pCAMBIA1300：OsHSP90超表达载体以及反义载体的构建 | 第61-62页 |
| ·重组pCAMBIA1300：OsHSP90-GFP载体的构建 | 第62-63页 |
| ·转基因水稻的获得 | 第63页 |
| ·OsHSP90阳性转基因植株的检测 | 第63-67页 |
| ·潮霉素抗性的快速检测 | 第63-64页 |
| ·PCR法鉴定转基因植株 | 第64-65页 |
| ·后代转基因种子潮霉素发芽检测 | 第65-66页 |
| ·转基因幼苗中OsHSP90基因的表达量检测 | 第66-67页 |
| 第五章 T2代纯合转基因植株逆境处理 | 第67-76页 |
| 1. 材料与方法 | 第67-68页 |
| ·实验材料 | 第67页 |
| ·药品及培养基 | 第67页 |
| ·实验方法 | 第67-68页 |
| 2. 结果与分析 | 第68-76页 |
| 第六章 总结与讨论 | 第76-79页 |
| 参考文献 | 第79-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
| 攻读硕士期间参与发表论文 | 第86页 |
