摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-12页 |
英文缩写词表 | 第12-13页 |
引言 | 第13-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-22页 |
1 布鲁氏病的研究进展 | 第14-18页 |
·布鲁氏菌病的概述 | 第14-15页 |
·布鲁氏菌的致病机制 | 第15-18页 |
2 MAPK信号通路概述 | 第18-20页 |
·MAPK信号通路结构 | 第19页 |
·MAPK信号通路的激活 | 第19-20页 |
3 细胞因子的概述 | 第20-22页 |
第二章 实验部分 | 第22-58页 |
实验一:布鲁氏菌2308株和OMP25缺失株侵染HPT-8 细胞后差异显著细胞因子的检测 | 第22-36页 |
摘要 | 第22-23页 |
1 材料与方法 | 第23-26页 |
·实验材料 | 第23页 |
·实验仪器和器材 | 第23页 |
·引物设计 | 第23页 |
·PCR鉴定布鲁氏菌 | 第23-24页 |
·细胞培养 | 第24-25页 |
·布鲁氏菌2308和OMP25缺失株侵染细胞 | 第25页 |
·观察侵染后HPT-8 细胞形态的变化 | 第25页 |
·检测细胞因子 | 第25-26页 |
2 实验结果 | 第26-34页 |
·检测2308和OMP25缺失株 | 第26-27页 |
·细胞形态的变化 | 第27-29页 |
·细胞因子的检测 | 第29-34页 |
3 讨论 | 第34-36页 |
实验二:2308株和OMP25缺失株侵染细胞后MAPK支路磷酸化的蛋白的筛选及鉴定 | 第36-46页 |
摘要 | 第36-37页 |
1 材料与方法 | 第37-40页 |
·实验材料 | 第37页 |
·实验仪器 | 第37页 |
·侵染细胞 | 第37-38页 |
·细胞蛋白定量 | 第38页 |
·检测蛋白的磷酸化 | 第38-39页 |
·抑制剂孵育细胞检测其对细胞分泌细胞因子的影响 | 第39-40页 |
2 实验结果 | 第40-44页 |
·检测细胞蛋白的浓度 | 第40页 |
·布鲁氏菌侵染细胞后磷酸化蛋白激活检测 | 第40-43页 |
·与分泌TNF-α相关的MAPK支路的确定 | 第43-44页 |
3 讨论 | 第44-46页 |
实验三:2308和OMP25缺失株侵染小鼠MAPK通路激活细胞因子的检测 | 第46-58页 |
摘要 | 第46-47页 |
1 材料与方法 | 第47-52页 |
·实验动物 | 第47页 |
·实验试剂 | 第47页 |
·实验仪器与设备 | 第47页 |
·感染小鼠 | 第47-48页 |
·血清采集和检测细胞因子 | 第48页 |
·切片的制作 | 第48-49页 |
·提取RNA : | 第49-51页 |
·RT-PCR检测TNF-α的表达 | 第51页 |
·免疫组化鉴定MAPK支路的激活 | 第51-52页 |
2 实验结果 | 第52-56页 |
·ELISA检测差异的细胞因子 | 第52页 |
·组织病理变化观察 | 第52-54页 |
·RT-PCR检测结果 | 第54-55页 |
·免疫组化结果 | 第55-56页 |
3 讨论 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-65页 |
总结 | 第65-66页 |
创新点 | 第66-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
作者简介 | 第68-69页 |
导师评阅表 | 第69页 |