首页--农业科学论文--畜牧、动物医学、狩猎、蚕、蜂论文--动物医学(兽医学)论文--兽医基础科学论文--家畜微生物学(兽医病原微生物学)论文--病原细菌论文

单核细胞增生性李斯特菌srtA基因缺失株的构建及其部分生物学特性研究

全文摘要第1-7页
Abstract第7-12页
英文缩略词表第12-13页
引言第13-14页
第一章 文献综述第14-27页
 1. LM的一般特性第14-18页
   ·LM的生物学特征第14-15页
   ·LM的流行病学特征第15-16页
   ·李斯特菌病的临床症状第16页
   ·李斯特菌病的诊断与防治第16-18页
 2. LM的毒力因子及致病机制第18-24页
   ·LM侵入细胞相关的主要毒力因子第19-22页
   ·LM的毒力调控因子第22-24页
 3.分选酶的研究进展第24-27页
   ·分选酶的结构与功能第24-25页
   ·LM的分选酶蛋白第25页
   ·分选酶的应用前景第25-27页
第二章 试验部分第27-59页
 实验一 LM90SB2 srtA基因序列分析及原核表达第27-35页
  摘要第27-28页
  1.材料第28页
   ·菌株、质粒及引物第28页
   ·主要试剂和仪器第28页
  2.方法第28-31页
   ·LM90SB2基因组DNA的制备及srtA基因的扩增第28-29页
   ·E.coli DH5α、BL21(DE3)感受态细胞的制备(CaCl2)第29页
   ·srtA基因与pMD19-T的连接第29-30页
   ·重组原核表达质粒pET32a-srtA的构建第30页
   ·srtA基因在E.coli BL21(DE3)中的表达第30页
   ·Western-blotting鉴定重组蛋白第30-31页
  3.结果第31-34页
   ·LM90SB2 srtA基因的克隆及序列分析第31页
   ·原核表达质粒pET32a-srtA的鉴定第31-32页
   ·srtA基因在E.coli BL21(DE3)中表达产物SDS-PAGE分析结果第32-33页
   ·表达产物Western-blotting分析结果第33-34页
  4.讨论第34-35页
 实验二 LM90SB2-△srtA缺失株的构建第35-47页
  摘要第35页
  1.材料第35-37页
   ·菌株、质粒及引物第35-36页
   ·主要试剂与仪器第36-37页
  2.方法第37-40页
   ·srtA基因上下游同源臂的扩增及SOE-PCR第37-38页
   ·融合同源臂△srtA与pMD19-T的连接第38页
   ·重组穿梭质粒pKSV7-△srtA的构建第38页
   ·电转用LM 90SB2感受态细胞的制备第38-39页
   ·pKSV7-△srtA质粒电转化到LM90SB2感受态细胞中第39页
   ·同源重组第39-40页
   ·LM90SB2-△srtA基因缺失株的遗传稳定性鉴定及生长特性第40页
  3.结果第40-46页
   ·srtA基因上下游同源臂的扩增和SOE-PCR结果第40-41页
   ·重组质粒pMD19-T-△srtA和pKSV7-△srtA酶切鉴定结果第41-42页
   ·电转后阳性转化子的鉴定第42-43页
   ·同源重组结果的筛选与鉴定第43-45页
   ·LM90SB2-△srtA缺失株鉴定及遗传稳定性分析和生长曲线测定结果第45-46页
  4.讨论第46-47页
 实验三 LM90SB2-△srtA缺失株部分生物学特性研究第47-59页
  摘要第47页
  1.材料第47-48页
   ·菌株、细胞和实验动物第47-48页
   ·主要试剂和仪器第48页
  2.方法第48-51页
   ·生化特性鉴定第48-49页
   ·溶血效价的测定第49页
   ·耐酸耐碱生长曲线测定第49页
   ·生物膜形成能力的测定第49-50页
   ·对MBMEC、HBMEC、RAW264.7、SIEC的粘附、侵袭和胞内增殖实验第50页
   ·LD50的测定第50-51页
   ·感染小鼠后肝、脾、脑载菌量的测定第51页
  3.结果第51-57页
   ·生化鉴定结果第51页
   ·溶血效价的测定结果第51-52页
   ·耐酸耐碱生长曲线第52页
   ·生物膜形成能力的测定结果第52-53页
   ·对MBMEC、HBMEC、RAW264.7、SIEC的粘附率、侵袭率和胞内增殖能力第53-55页
   ·LD50的测定结果第55页
   ·感染小鼠后肝、脾、脑载菌量的测定结果第55-57页
  4.讨论第57-59页
全文结论第59页
主要创新点第59-60页
参考文献第60-68页
附录第68-70页
致谢第70-71页
作者简介第71-72页
附件第72页

论文共72页,点击 下载论文
上一篇:布鲁氏菌外膜蛋白OMP25对MAPK信号通路的影响
下一篇:丁硫克百威对棉花根际土壤微生态的影响及其降解动态研究