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陆地棉FLOWERING LOCUS T同源基因GhFT1的克隆及功能分析

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
实验中所涉及的缩略词第8-12页
引言第12-13页
第一章 文献综述第13-24页
   ·FT促进开花的分子机制第13-17页
     ·光周期途径第13-14页
     ·春化途径第14-15页
     ·自主途径第15页
     ·赤霉素途径第15-16页
     ·年龄途径第16-17页
     ·其他调控植物开花途径第17页
   ·FT同源基因促进植物开花第17-18页
   ·FT同源基因的其他功能第18-21页
     ·FT同源基因可抑制植物开花第18-19页
     ·FT同源基因参与植物花形态的建成第19页
     ·FT基因可促进侧枝的生长及芽的形成第19-20页
     ·FT同源基因改变植株形态第20页
     ·FT基因可提高作物产量第20-21页
     ·FT基因可以控制气孔开放第21页
   ·本课题的研究意义第21-24页
第二章 棉花成花素基因GhFT1的全长克隆第24-35页
   ·材料和试剂第24-25页
     ·植物材料第24页
     ·主要试剂第24页
     ·LB培养基的配置第24页
     ·质粒提取液的配置第24页
     ·X-gal和IPTG的配置第24页
     ·总DNA缓冲提取液CTAB的配置第24-25页
   ·实验方法第25-31页
     ·棉花RNA的提取第25页
     ·棉花cDNA第1链的合成第25-26页
     ·RACE技术扩增棉花成花素类似基因 5'非编码区第26-28页
     ·用改良的CTAB法提取棉花的DNA第28页
     ·棉花成花素基因GhFT1的克隆和序列分析第28-29页
     ·GhFT1基因的生物信息学分析第29-31页
   ·结果与分析第31-35页
     ·棉花叶片总RNA的提取第31页
     ·棉花GhFT1基因的克隆和序列分析第31-35页
第三章 棉花GhFT1基因的表达分析第35-39页
   ·材料和试剂第35页
     ·植物材料第35页
     ·主要试剂第35页
     ·主要仪器第35页
   ·实验方法第35-36页
     ·用试剂盒提取棉花的RNA第35页
     ·棉花cDNA第1链的合成第35-36页
     ·qRT-PCR分析GhFT1基因的时空表达情况第36页
   ·结果与分析第36-39页
第四章 棉花FT同源基因的多态性分析第39-44页
   ·材料第39页
     ·植物材料第39页
     ·主要试剂及菌种第39页
   ·实验方法第39-40页
     ·不同倍性棉花RNA的提取第39页
     ·棉花cDNA第一链的合成第39页
     ·不同倍性棉花多态性分析第39-40页
     ·不同倍性棉花FT基因的拷贝数分析第40页
   ·结果与分析第40-44页
     ·不同倍性棉花FT基因编码区多态性分析第40-41页
     ·不同倍性棉花FT基因结构比对分析第41-42页
     ·不同倍性棉花拷贝数分析第42-44页
第五章 GhFT1基因的原核表达分析第44-49页
   ·主要试剂与菌种第44页
     ·主要试剂第44页
     ·菌种第44页
   ·实验方法第44-46页
     ·引物设计与合成第44页
     ·GhFT1基因的原核表达载体构建及鉴定第44-45页
     ·GhFT1蛋白的原核诱导表达第45-46页
     ·GhFT1重组蛋白的可溶性分析第46页
     ·兔抗GhFT1抗血清的制备及酶联免疫吸附剂测定(enzyme linked-immunosorbent assay, ELISA)抗血清效价第46页
   ·结果与分析第46-49页
     ·原核表达载体的构建及酶切鉴定第46-47页
     ·不同诱导时间对融合表达蛋白的影响第47-48页
     ·GhFT1融合蛋白的可溶性分析第48页
     ·ELISA测定血清的抗体效价第48-49页
第六章 棉花GhFT1的功能分析第49-60页
   ·材料与方法第49页
     ·植物材料第49页
     ·主要试剂及菌株第49页
   ·实验方法第49-53页
     ·植物表达载体 35S::GhFT1的构建第49-51页
     ·植物融合表达载体 35S::GhFT1-GFP的构建第51页
     ·农杆菌介导的拟南芥遗传转化第51页
     ·转基因植株的鉴定与检测第51-53页
   ·结果与分析第53-60页
     ·植物表达载体 35S::GhFT1的构建第53-54页
     ·植物融合表达载体 35S::GhFT1-GFP的构建第54-55页
     ·转基因拟南芥的表型分析第55-58页
     ·GhFT1蛋白的亚细胞定位第58-59页
     ·35S::GhFT1-GFP植株表型分析第59页
     ·GhFT1基因可部分互补ft-10突变体晚花表型第59-60页
第七章 讨论与结论第60-63页
   ·讨论第60-62页
     ·GhFT1是FT的一个同源基因第60页
     ·GhFT1在棉花中的表达模式第60-61页
     ·GhFT1定位于细胞质和细胞核中第61页
     ·GhFT1可促进拟南芥早花第61-62页
   ·结论第62-63页
参考文献第63-71页
致谢第71-72页
作者简介第72-73页
附件第73页

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