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Foxo1对小鼠卵巢颗粒细胞凋亡的调控研究

摘要第1-11页
ABSTRACT第11-15页
缩略语中英文对照表第15-17页
文献综述第17-97页
 第一章 卵泡的形成、发育和闭锁过程及其调控第17-55页
  1 卵泡发育的动态过程第17-26页
   ·卵泡的形成过程第17-19页
   ·卵泡的发育过程第19-22页
   ·卵泡的闭锁过程第22-25页
   ·卵泡生长发育过程的调控第25-26页
  2 卵泡闭锁的调控机制研究第26-43页
   ·卵泡闭锁与颗粒细胞凋亡第26-34页
   ·卵泡闭锁的生殖激素调控第34-37页
   ·卵泡闭锁的凋亡相关蛋白调控第37-39页
   ·卵泡闭锁的生长因子调控第39-40页
   ·卵泡闭锁的细胞因子调控第40-42页
   ·FSH调节卵泡闭锁和颗粒细胞凋亡的信号通路第42-43页
  参考文献第43-55页
 第二章 FOXO转录因子的功能研究进展第55-97页
  1 FOXO转录因子概述第55-60页
   ·Foxo转录因子的命名与分类第55-56页
   ·Foxo转录因子的结构第56-59页
   ·Foxo家族成员的基因定位与组织表达谱第59-60页
  2 FOXO转录因子的翻译后修饰第60-66页
   ·磷酸化第60-64页
   ·乙酰化第64-65页
   ·泛素化第65-66页
  3 Foxo转录因子的功能第66-82页
   ·Foxo与细胞生理第67-76页
   ·Foxo与疾病和衰老第76-80页
   ·Foxo与氧化应激和细胞损伤第80-81页
   ·Foxo与卵泡发育第81-82页
  4 FOXO1在卵泡闭锁中的研究现状和研究前景第82-83页
  参考文献第83-97页
试验研究第97-221页
 第三章 FOXO1对氧化应激引起的小鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响第97-157页
  摘要第97页
  ABSTRACT第97-98页
  前言第98-101页
  1 材料方法第101-122页
   ·试验动物与体内ROS的诱导第101页
   ·小鼠组织样的分类与收集第101-102页
   ·细胞内ROS的测定第102-103页
   ·组织内ROS的测定第103-105页
   ·小鼠颗粒细胞的原代培养第105页
   ·质粒的获取第105-108页
   ·颗粒细胞的转染与处理第108-109页
   ·卵巢石蜡切片的制备第109-110页
   ·TUNEL染色第110-111页
   ·Western Blot分析第111-115页
   ·颗粒细胞总RNA的提取第115-116页
   ·反转录cDNA的合成第116-117页
   ·实时荧光定量PCR(Quantitative Real Time PCR,qRT-PCR)第117-119页
   ·免疫组化第119-120页
   ·颗粒细胞的免疫荧光染色第120-122页
   ·数据分析第122页
  2 试验结果第122-143页
   ·给小鼠注射氧化剂3-NP后引起卵泡中MGC的凋亡第122-123页
   ·氧化应激会影响小鼠卵泡MGC中Foxo家族成员的表达第123-127页
   ·氧化应激可诱导体外培养MGC的凋亡第127-131页
   ·体外培养MGC中Foxo1的表达受氧化应激诱导第131-134页
   ·在MGC中超表达Foxo1能引起促凋亡基因的表达上调第134-136页
   ·敲减Foxo1表达可阻断H_2O_2诱导的MGC凋亡第136-140页
   ·胰岛素能抑制H_2O_2诱导的MGC凋亡第140-143页
  3 讨论第143-150页
  参考文献第150-157页
 第四章 FOXO1参与了FSH挽救小鼠颗粒细胞凋亡的调控第157-221页
  摘要第157页
  ABSTRACT第157-158页
  前言第158-160页
  1. 材料方法第160-183页
   ·试验动物的处理第160-161页
   ·细胞培养第161-162页
   ·细胞的处理与转染第162-163页
   ·胞内ROS的测定第163页
   ·caspases活性测定第163-165页
   ·Western blotting第165-166页
   ·qRT-PCR检测第166-167页
   ·免疫荧光第167-168页
   ·HE染色第168-169页
   ·TUNEL染色第169页
   ·蛋白激酶活性测定第169-170页
   ·含小鼠Foxo1基因启动子的荧光素酶报告质粒的构建第170-175页
   ·小鼠Foxo1基因启动子FRE位点突变质粒的构建第175-179页
   ·荧光素酶报告基因测定第179-180页
   ·染色质免疫共沉淀第180-183页
   ·数据分析第183页
  2. 试验结果第183-208页
   ·FSH抑制了小鼠卵巢优势卵泡中MGC的凋亡第183-184页
   ·FSH降低了卵巢MGC中Foxo1的表达第184-189页
   ·FSH抑制了体外培养MGC的凋亡第189-194页
   ·FSH能下调体外培养MGC中Foxo1的表达第194-195页
   ·FSH可通过PKA-PI3K-AKT-Foxo1信号轴促进MGC的存活第195-199页
   ·Foxo1的组成型激活抵消了FSH对MGC凋亡的抑制作用第199-202页
   ·MGC中Foxo1的自身正反馈调节第202-208页
  3. 讨论第208-213页
  参考文献第213-221页
全文结论第221-223页
创新第223-225页
致谢第225-227页
攻读博士学位期间发表的论文第227-229页
附录第229-238页
 一 主要试剂与仪器第229-231页
 二 常用溶液的配制第231-238页

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