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疫霉菌RNA沉默抑制子PsPSR2及其同源效应分子的功能分析

摘要第1-11页
ABSTRACT第11-14页
上篇 文献综述第14-39页
 第一章 卵菌效应分子的研究进展第15-25页
   ·卵菌效应分子的类别第16页
   ·卵菌效应分子的转运机制第16-18页
   ·RxLR效应分子的蛋白结构与功能第18-20页
     ·RxLR效应分子的蛋白结构第18-19页
     ·RxLR效应分子的结构与功能第19-20页
   ·效应分子的功能分析第20-21页
   ·效应分子的亚细胞定位第21-22页
   ·效应分子的寄主靶标第22-23页
   ·存在问题和展望第23-25页
 第二章 RNA沉默抑制子的研究进展第25-39页
   ·植物RNA沉默机制第25页
   ·RNA沉默介导的植物抗病毒免疫反应第25-27页
   ·植物病毒沉默抑制子第27-30页
     ·植物病毒沉默抑制子的发现第27-28页
     ·植物病毒沉默抑制子的鉴定第28-30页
   ·植物病毒沉默抑制子的作用机制第30-37页
     ·VSRs结合长dsRNA第32-33页
     ·VSRs结合或封闭sRNAs第33-35页
     ·VSRs作用于沉默途径的效应因子第35-36页
     ·VSRs抑制RdDM途径第36-37页
   ·存在问题和展望第37-39页
下篇 研究内容第39-111页
 第一章 疫霉菌PsPSR2效应分子的生物信息学分析第41-59页
  摘要第41-42页
  ABSTRACT第42-43页
  1 材料与方法第43-46页
   ·数据库及序列收集第43-44页
   ·功能域分析第44页
   ·多重序列比对分析第44页
   ·进化树分析第44页
   ·转录模式分析第44-45页
   ·多态性分析第45页
   ·PsPSR2表达量分析第45-46页
  2 结果与分析第46-56页
   ·PsPSR2在大豆疫霉四个生理小种之间无多态性第46-48页
   ·PsPSR2在大豆疫霉基因组中同源基因的鉴定第48-49页
   ·PSPSR2在已测序卵菌基因组中同源基因的鉴定第49-51页
   ·PsPSR2及其同源基因间的进化关系第51页
   ·大豆疫霉PsPSR2结构域分析第51-55页
   ·大豆疫霉PsPSR2在大豆疫霉生活史的十个阶段的表达量分析第55页
   ·qRT-PCR验证PsPSR2及PsPSR2同源基因在侵染阶段的转录模式第55-56页
  3 讨论第56-59页
 第二章 大豆疫霉RNA沉默抑制子PsPSR2效应分子的功能分析第59-85页
  摘要第59页
  ABSTRACT第59-62页
  1 材料和方法第62-71页
   ·供试植物和供试菌株的保存和培养第62-63页
   ·载体构建和细菌转化第63-65页
   ·大豆疫霉瞬时沉默转化第65-68页
   ·利用烟草瞬时表达PsPSR2观察亚细胞定位第68页
   ·大豆疫霉的GFP转化菌株的生成第68-69页
   ·大豆发状根的诱导第69页
   ·检测发状根中PsPSR2表达第69页
   ·大豆疫霉对大豆发状根的侵染测定第69-70页
   ·辣椒疫霉对拟南芥的侵染测定第70-71页
   ·辣椒疫霉侵染期间植物防卫基因表达情况第71页
  2 结果与分析第71-83页
   ·PsPSR2毒性测定第71-72页
   ·PsPSR2在本氏烟草细胞中的亚细胞定位第72-73页
   ·荧光观察大豆疫霉的侵染过程第73-75页
   ·PsPSR2在大豆疫霉侵染大豆根部过程中的表达谱第75-76页
   ·表达PsPSR2大豆发状根的成功诱导第76-77页
   ·表达PsPSR2大豆发状根对大豆疫霉更感病第77-79页
   ·PsPSR2转基因拟南芥植株对辣椒疫霉敏感性增强第79-82页
   ·PsPSR2转基因拟南芥植物在疫霉侵染阶段水杨酸防卫途径被抑制第82-83页
  3 讨论第83-85页
 第三章 致病疫霉中PsPSR2同源效应分子PiPSR2的功能分析第85-111页
  摘要第85-86页
  ABSTRACT第86-88页
  1 材料和方法第88-98页
   ·供试植物和供试菌株的保存和培养第88页
   ·载体构建和细菌转化第88-90页
   ·PsPSR2-like效应分子的RNAi抑制活性测定第90-93页
   ·致病疫霉侵染试验第93-94页
   ·PiPSR2在致病疫霉侵染本氏烟草叶片不同时期的表达模式第94页
   ·烟草中瞬时表达PiPSR2的亚细胞定位观察第94页
   ·致病疫霉的游动孢子电穿孔转化第94-96页
   ·PiPSR2转基因拟南芥的制备第96-98页
  2 结果与分析第98-108页
   ·PsPSR2同源效应分子PITG_15152能抑制16C转基因本氏烟的局部沉默第98-100页
   ·PiPSR2在致病疫霉侵染本氏烟过程中的表达模式第100页
   ·PiPSR2在本氏烟草叶片表皮细胞中的亚细胞定位第100-101页
   ·PiPSR2的瞬时表达促进致病疫霉侵染烟草第101-103页
   ·PiPSR2是致病疫霉的毒性因子第103-106页
   ·PiPSR2转基因拟南芥的筛选第106-108页
  3 讨论第108-111页
参考文献第111-131页
全文总结第131-132页
附录第132-165页
 附录 基于RAPD-SCAR方法建立的大豆疫霉分子检测技术第133-161页
  摘要第133页
  ABSTRACT第133-136页
  1 材料与方法第136-144页
  2 结果与分析第144-152页
  3 讨论第152-155页
  参考文献第155-161页
 附录表1 引物列表第161-164页
 附录表2 菌株列表第164-165页
攻读博士学位期间发表的研究论文第165-167页
致谢第167页

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