牛副流感病毒3型实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立
| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 缩略语表 | 第6-10页 |
| 1 引言 | 第10-19页 |
| ·牛副流感的病原 | 第10-12页 |
| ·BPIV3的形态特征与理化特性 | 第10-11页 |
| ·BPIV3分子生物学特性 | 第11-12页 |
| ·牛副流感的流行病学 | 第12页 |
| ·牛副流感的临床症状 | 第12-13页 |
| ·牛副流感的病理变化 | 第13页 |
| ·牛副流感的诊断 | 第13-15页 |
| ·病毒的分离鉴定 | 第13-14页 |
| ·血清学诊断方法 | 第14页 |
| ·分子生物学诊断方法 | 第14-15页 |
| ·牛副流感的防治 | 第15-16页 |
| ·牛副流感的国内外研究进展 | 第16-17页 |
| ·牛副流感的国外研究进展 | 第16页 |
| ·牛副流感的国内研究进展 | 第16-17页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第17-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-26页 |
| ·材料 | 第19-20页 |
| ·BPIV3核酸、病料 | 第19页 |
| ·主要试剂和仪器设备 | 第19页 |
| ·引物与探针 | 第19-20页 |
| ·方法 | 第20-26页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第20页 |
| ·cDNA的合成 | 第20-21页 |
| ·常规PCR方法的建立 | 第21页 |
| ·标准阳性质粒模板的建立 | 第21-24页 |
| ·BPIV3的实时荧光PCR试验参数的优化 | 第24页 |
| ·标准曲线的制备 | 第24-25页 |
| ·敏感性试验 | 第25页 |
| ·特异性试验 | 第25页 |
| ·重复性试验 | 第25页 |
| ·临床样品检测 | 第25-26页 |
| 3 结果 | 第26-34页 |
| ·标准阳性质粒模板的制备 | 第26-27页 |
| ·常规PCR的扩增结果 | 第26页 |
| ·重组质粒鉴定结果 | 第26-27页 |
| ·目的基因片段测序结果 | 第27页 |
| ·质粒拷贝数计算结果 | 第27页 |
| ·实时荧光RT-PCR反应参数的优化结果 | 第27-30页 |
| ·引物浓度的优化结果 | 第27-28页 |
| ·探针浓度的优化结果 | 第28-29页 |
| ·常规PCR火温度优化结果 | 第29页 |
| ·实时荧光定量PCR方法反应体系与参数的建立 | 第29-30页 |
| ·标准曲线的制备结果 | 第30页 |
| ·敏感性试验结果 | 第30-31页 |
| ·特异性试验结果 | 第31-32页 |
| ·重复性试验结果 | 第32-33页 |
| ·临床样品检测结果 | 第33-34页 |
| 4 讨论 | 第34-36页 |
| 5 结论 | 第36-37页 |
| 致谢 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-42页 |
| 作者简介 | 第42页 |
