摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-11页 |
缩略语表 | 第11-12页 |
1 引言 | 第12-20页 |
·抗菌肽概述 | 第12-13页 |
·抗菌肽的理化特性 | 第12-13页 |
·抗菌肽在动物生产中的应用 | 第13页 |
·防御素概述 | 第13页 |
·防御素的分类 | 第13-15页 |
·α-防御素 | 第14-15页 |
·β-防御素 | 第15页 |
·θ-防御素 | 第15页 |
·防御素的生物学活性 | 第15-18页 |
·抗微生物活性 | 第15-16页 |
·细胞毒作用 | 第16页 |
·其他生物学功能 | 第16-18页 |
·绵羊β-防御素简介 | 第18页 |
·研究目的及意义 | 第18-20页 |
2 实验部分 | 第20-43页 |
·材料 | 第20-22页 |
·引物 | 第20页 |
·实验试剂 | 第20-22页 |
·仪器设备 | 第22页 |
·主要材料 | 第22页 |
·方法 | 第22-32页 |
·msBD-1基因的PCR扩增 | 第22-23页 |
·PCR产物的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第23-24页 |
·PCR产物的纯化 | 第24页 |
·pGEX-4T-1质粒的提取 | 第24-25页 |
·重组表达载体的构建 | 第25-28页 |
·msBD-1蛋白的表达 | 第28-31页 |
·重组蛋白表达最佳诱导条件的确定 | 第31-32页 |
·重组蛋白pGEX-4T-1-msBD-1的纯化 | 第32页 |
·实验结果 | 第32-40页 |
·msBD-1基因PCR结果 | 第32-33页 |
·pGEX-4T-1质粒提取结果 | 第33页 |
·目的片段与表达载体的分别双酶切结果 | 第33-34页 |
·菌液PCR筛选阳性克隆结果 | 第34-35页 |
·重组表达载体pGEX-4T-1-msBD-1双酶切结果 | 第35页 |
·pGEX-4T-1-msBD-1测序结果 | 第35-36页 |
·目的蛋白的SDS-PAGE及可溶性分析 | 第36-37页 |
·表达产物的Western-Blot分析 | 第37页 |
·表达产物的可溶性Western-Blot分析 | 第37-38页 |
·最佳诱导条件的确定 | 第38-40页 |
·讨论 | 第40-43页 |
·大肠杆菌表达系统的选择 | 第40-41页 |
·pGEX-4T-1表达载体的选择 | 第41-42页 |
·宿主菌的选择 | 第42页 |
·绵羊-β防御素-1蛋白的原核表达 | 第42-43页 |
3 结论 | 第43-44页 |
致谢 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-49页 |
附录 | 第49-52页 |
作者简介 | 第52页 |