| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 引言 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-24页 |
| ·花色研究概述 | 第13-17页 |
| ·花色素及其生物合成途径 | 第13-14页 |
| ·F3’H 和 F3’5’H 的介绍 | 第14-15页 |
| ·花色形成的调控系统 | 第15-17页 |
| ·花青素生物途径中的 MYB 蛋白 | 第17页 |
| ·花色基因工程研究进展 | 第17-19页 |
| ·花色基因工程 | 第17-19页 |
| ·反义 RNA 技术 | 第18页 |
| ·共抑制现象 | 第18页 |
| ·导入外源目的基因 | 第18-19页 |
| ·转录因子的调节 | 第19页 |
| ·石蒜属植物的研究现状 | 第19-23页 |
| · | 第19-23页 |
| ·细胞学研究 | 第19-21页 |
| ·分子系统学研究 | 第21-22页 |
| ·石蒜属植物的种间育种 | 第22页 |
| ·石蒜属植物繁殖技术的研究 | 第22-23页 |
| ·本研究的目的与意义 | 第23-24页 |
| 第二章 换锦花花色相关的 LsF3’H 基因和 LsMYB4 基因 cDNA 的克隆分析 | 第24-42页 |
| ·材料与方法 | 第24-29页 |
| ·试验材料 | 第24-25页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·菌株与载体 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·PCR 引物 | 第24-25页 |
| ·试验方法 | 第25-29页 |
| ·换锦花花瓣总 RNA 提取 | 第25-26页 |
| ·换锦花 cDNA 第一链的合成 | 第26页 |
| ·换锦花 LsF3’H 和 LsMYB cDNA 片段的 PCR 扩增 | 第26页 |
| ·5’RACE 和 3’RACE 片段的获得 | 第26-27页 |
| ·大肠杆菌 DH5α感受态细胞的制备 | 第27-28页 |
| ·目的片段 PCR 产物的回收、转化和鉴定 | 第28页 |
| ·换锦花 LsF3’H 和 LsMYB 基因 cDNA 全长序列的验证 | 第28-29页 |
| ·换锦花 LsF3’H 和 LsMYB 基因 cDNA 的生物信息学分析 | 第29页 |
| ·结果与分析 | 第29-40页 |
| ·换锦花花瓣总 RNA 的提取 | 第29-30页 |
| ·换锦花 F3’H 的基因克隆 | 第30-35页 |
| ·换锦花 F3’H 全长 cDNA 的克隆 | 第30-31页 |
| ·换锦花 LsF3’H 氨基酸序列分析与进化分析 | 第31-35页 |
| ·换锦花 LsMYB 基因 cDNA 的克隆 | 第35-40页 |
| ·换锦花 LsMYB 基因 cDNA 全长的克隆 | 第35-37页 |
| ·换锦花 LsMYB 基因的序列及同源性分析 | 第37-38页 |
| ·换锦花 LsMYB 基因的生物信息学及进化分析 | 第38-40页 |
| ·结论与讨论 | 第40-42页 |
| 第三章 换锦花 LsF3’H 和 LsMYB4 基因的表达分析 | 第42-49页 |
| ·材料与方法 | 第42-44页 |
| ·试验材料 | 第42-43页 |
| ·植物材料 | 第42-43页 |
| ·主要试剂和仪器设备 | 第43页 |
| ·试验方法 | 第43-44页 |
| ·换锦花总 RNA 的提取 | 第43页 |
| ·cDNA 的合成 | 第43页 |
| ·实时荧光定量 PCR | 第43-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-48页 |
| ·换锦花 LsF3’H 基因的表达分析 | 第44-46页 |
| ·换锦花 LsF3’H 基因的组织特异性表达分析 | 第44-45页 |
| ·LsF3’H 基因在换锦花不同花发育时期的表达分析 | 第45页 |
| ·LsF3’H 基因在换锦花不同花色无性系的表达分析 | 第45-46页 |
| ·换锦花 LsMYB4 基因的表达分析 | 第46-48页 |
| ·换锦花 LsMYB4 基因的组织特异性表达分析 | 第46-47页 |
| ·换锦花 LsMYB4 基因在不同花发育时期的表达分析 | 第47页 |
| ·LsMYB4 基因在换锦花不同花色无性系的表达分析 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| 第四章 换锦花 LsF3’H 和 LsMYB4 过表达载体的构建 及异源表达研究 | 第49-57页 |
| ·材料与方法 | 第49-53页 |
| · | 第49页 |
| ·试验材料 | 第49页 |
| ·主要试剂和仪器设备 | 第49页 |
| ·试验方法 | 第49-53页 |
| ·带有酶切位点的换锦花 LsF3’H 和 LsMYB4 基因 cDNA 全长扩增 | 第49-50页 |
| ·超表达载体构建 | 第50-51页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第51页 |
| ·过表达载体转化农杆菌 | 第51页 |
| ·农杆菌叶盘转化法侵染烟草 | 第51-52页 |
| ·转基因烟草阳性植株的鉴定 | 第52-53页 |
| ·结果与分析 | 第53-55页 |
| ·带有酶切位点的 LsF3’H 和 LsMYB4 cDNA 全长验证 | 第53页 |
| ·LsF3’H 和 LsMYB4 基因过表达载体构建 | 第53-54页 |
| ·转基因烟草阳性植株的获得 | 第54-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| 第五章 结论 | 第57-58页 |
| ·主要研究成果 | 第57页 |
| ·今后的研究方向的研究目标 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-64页 |
| 附录 | 第64-66页 |
| 个人简介及论文发表情况和学术交流 | 第66-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
