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拟南芥LEA7基因功能的研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-7页
目录第7-10页
缩写词第10-12页
1 前言第12-20页
   ·干旱胁迫应答过程中的生理生化变化第12-14页
     ·根系形态对干旱胁迫的反应第13页
     ·叶片形态对干旱胁迫的反应第13页
     ·渗透调节因子对干旱胁迫的反应第13-14页
     ·抗氧化保护剂对干旱胁迫的反应第14页
   ·与抗旱相关的转录因子第14-16页
   ·LEA 蛋白第16-20页
     ·LEA 蛋白的分布及其定位第16页
     ·LEA 蛋白的特征第16页
     ·LEA 蛋白的分类第16-17页
     ·LEA 蛋白的功能第17-18页
     ·LEA 基因的表达机制第18-20页
2 研究意义第20-22页
3 材料与方法第22-34页
   ·实验材料第22页
     ·植物材料第22页
     ·质粒载体和菌株第22页
   ·实验试剂第22页
   ·实验常用的溶液第22-23页
   ·抗生素第23页
   ·培养基第23-24页
   ·实验所用引物第24-25页
     ·T-DNA 插入纯合突变体鉴定引物第24页
     ·构建载体所用引物第24页
     ·RT-PCR 鉴定基因表达所用引物第24-25页
     ·qRT-PCR 鉴定基因表达所用引物第25页
   ·实验方法第25-34页
     ·拟南芥种植方法第25页
     ·拟南芥 DNA 提取方法第25-26页
     ·拟南芥 DNA 纯合体的鉴定方法第26页
     ·PCR 扩增体系第26页
     ·总 RNA 的提取和 cDNA 的合成第26-27页
     ·实时定量 PCR 检测基因表达第27-28页
     ·半定量 RT-PCR 检测基因表达第28页
     ·表皮条生物学分析第28页
     ·测定植株失水率试验第28-29页
     ·远红外热图分析实验第29页
     ·ABA 和渗透因子对拟南芥种子萌发及幼苗生长的影响第29-30页
     ·重组质粒载体的构建第30页
     ·PCR 产物的回收和纯化第30-31页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第31页
     ·大肠杆菌感受态细胞的转化第31页
     ·重组质粒的鉴定第31页
     ·农杆菌介导的植株转化第31-32页
     ·拟南芥转基因超表达植物的筛选第32页
     ·GUS 组织表达分析第32-34页
4 实验结果与分析第34-48页
   ·LEA 基因的表达及其突变体鉴定第34-36页
     ·LEA 基因受渗透胁迫因子以及 ABA 的诱导第34-35页
     ·LEA 基因 T-DNA 插入突变体的鉴定第35页
     ·LEA 家族相关基因表达情况第35-36页
   ·LEA7 基因的表达水平检测第36-37页
   ·LEA7 超表达和突变体植株表型分析第37-43页
     ·ABA 对超表达和突变体幼苗及根生长的影响第37-39页
     ·渗透胁迫因子对超表达和突变体幼苗及根生长的影响第39-42页
     ·LEA7 超表达和突变体植株失水和红外分析第42-43页
     ·LEA7 超表达和突变体植株气孔开度分析第43页
   ·GUS 染色检测 LEA7 基因的表达第43-44页
   ·LEA7 基因受渗透胁迫及 ABA 的诱导第44-48页
5 讨论第48-50页
   ·ABA 和逆境胁迫诱导 LEA 蛋白的积累第48页
   ·超表达 LEA7 增强转基因植物对多重胁迫刺激的耐受能力第48-49页
   ·LEA7 基因在拟南芥植株的多个组织中普遍表达第49-50页
6 结论第50-52页
参考文献第52-58页
致谢第58-59页

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