| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 英文缩略词表 | 第12-13页 |
| 引言 | 第13-15页 |
| 1 材料与方法 | 第15-35页 |
| ·主要仪器设备 | 第15页 |
| ·主要试剂与材料 | 第15-17页 |
| ·主要试剂配制 | 第17-23页 |
| ·细胞培养所用试剂的配制 | 第17-18页 |
| ·细菌实验所用试剂的配制 | 第18页 |
| ·分子实验所用试剂的配制 | 第18-19页 |
| ·蛋白电泳所用溶液的配制 | 第19-23页 |
| ·激光共聚焦实验所用试剂的配制 | 第23页 |
| ·流式细胞术检测所用试剂的配制 FACS buffer(100mL) | 第23页 |
| ·方法 | 第23-35页 |
| ·细胞复苏，培养，传代与冻存 | 第23-24页 |
| ·小鼠脾脏淋巴细胞分离 | 第24-25页 |
| ·分子克隆质粒载体的构建 | 第25页 |
| ·质粒提取 | 第25页 |
| ·胶回收 | 第25页 |
| ·酶切 | 第25页 |
| ·连接 | 第25页 |
| ·感受态的制备 | 第25-26页 |
| ·转化 | 第26页 |
| ·质粒 DNA 转染细胞 | 第26页 |
| ·细胞裂解及蛋白抽提 | 第26-27页 |
| ·BCA 法测浓度 | 第27页 |
| ·SDS-page 与 Western Blot | 第27-29页 |
| ·CO-IP | 第29页 |
| ·原核蛋白诱导表达 | 第29页 |
| ·原核蛋白纯化 | 第29-30页 |
| ·GST pull down | 第30页 |
| ·免疫荧光激光共聚焦 | 第30页 |
| ·流式细胞术检测 EL4 细胞表面 OCILRP2 蛋白表达 | 第30-31页 |
| ·抗体包被的方法 | 第31页 |
| ·EL4 细胞/小鼠脾脏淋巴细胞的活化及其细胞因子的诱生 | 第31页 |
| ·EL4 细胞分泌 IL-2 水平的 ELISA 检测 | 第31页 |
| ·小鼠脾脏淋巴细胞分泌 IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ的 ELISA 检测 | 第31页 |
| ·细胞增殖实验 | 第31-32页 |
| ·细胞周期实验 | 第32页 |
| ·RNA 的提取 | 第32页 |
| ·cDNA 的合成 | 第32-33页 |
| ·Real time PCR 反应 | 第33页 |
| ·统计学方法 | 第33-35页 |
| 2 结果 | 第35-49页 |
| ·OCILRP2 相互作用蛋白的鉴定 | 第35-39页 |
| ·GST-DAP12 原核蛋白的表达 | 第35页 |
| ·GST-OCILRP2 原核蛋白的表达 | 第35-36页 |
| ·GST pull down 验证 DAP12 与 OCILRP2 蛋白的相互作用 | 第36页 |
| ·CO-IP 验证 DAP12 与 OCILRP2 蛋白的相互作用 | 第36-37页 |
| ·DAP12 与 OCILRP2 蛋白结合位置分析 | 第37页 |
| ·激光共聚焦分析 OCILRP2 与 DAP12 在胞膜上的共定位 | 第37-38页 |
| ·OCILRP2 与 DAP12 结合的工作模型 | 第38-39页 |
| ·CO-IP 实验鉴定 DAP12 与 Ras 不发生相互作用 | 第39页 |
| ·OCILRP2 对 T 细胞功能的影响 | 第39-46页 |
| ·EL4 细胞中 OCILRP2 的沉默效果 | 第39-40页 |
| ·CD3/CD28 抗体在不同浓度及不同时间点刺激 EL4 分泌 IL-2 水平(pg/mL）比较 | 第40-41页 |
| ·小鼠脾脏淋巴细胞分泌 IL-2、IL-4、IL-10、IFN-γ的 ELISA 检测（OD450） | 第41页 |
| ·CD3/CD28 抗体、OCILRP2 抗体及沉默组对 EL4 细胞增殖的影响 | 第41-42页 |
| ·CD3/CD28 抗体、OCILRP2 抗体、沉默质粒、PMA 对 EL4 细胞周期的影响 | 第42-44页 |
| ·OCILRP2 对细胞凋亡的影响 | 第44页 |
| ·CD3/28 抗体、PMA 刺激对 EL4 细胞表面 OCILRP2 蛋白表达的影响 | 第44-45页 |
| ·CD3/28 抗体、PMA 刺激对 EL4 细胞表面 DAP12 蛋白表达的影响 | 第45-46页 |
| ·OCILRP2 信号转导通路的分析 | 第46-49页 |
| ·Western Blot 检测 OCILRP2 在细胞内的信号转导 | 第46-47页 |
| ·CD3/CD28 抗体刺激组、CD3/CD28/OCILRP2 抗体刺激组、正常 EL4 细胞组核转录因子基因表达差异的定量分析 | 第47-49页 |
| 3 讨论 | 第49-53页 |
| 4 结论 | 第53-55页 |
| 5 参考文献 | 第55-57页 |
| 文献综述 | 第57-67页 |
| 参考文献 | 第64-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 在读期间发表的学术论文及研究成果 | 第68-69页 |
