| CONTENTS | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-19页 |
| ·非洲马瘟简介 | 第11页 |
| ·病毒的特性 | 第11-13页 |
| ·非洲马瘟病毒的基本结构 | 第11-12页 |
| ·病毒的理化性质 | 第12页 |
| ·病毒的主要结构蛋白和非结构蛋白 | 第12-13页 |
| ·非洲马瘟的流行病学 | 第13-15页 |
| ·非洲马瘟的宿主范围 | 第13页 |
| ·非洲马瘟的流行分布 | 第13-14页 |
| ·非洲马瘟的传播媒介 | 第14-15页 |
| ·非洲马瘟的临床症状 | 第15页 |
| ·非洲马瘟的病理变化 | 第15-16页 |
| ·剖检病变 | 第15-16页 |
| ·组织学病变 | 第16页 |
| ·病毒的诊断技术 | 第16-17页 |
| ·病原学诊断技术 | 第16-17页 |
| ·血清学诊断技术 | 第17页 |
| ·AHSV 疫苗 | 第17-18页 |
| ·目的与意义 | 第18-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-31页 |
| ·材料 | 第19-23页 |
| ·引物 | 第19页 |
| ·感受态与质粒 | 第19-21页 |
| ·AHSV-VP7 基因 | 第21页 |
| ·标准血清及血清样本 | 第21-22页 |
| ·试验试剂 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·试验方法 | 第23-31页 |
| ·对合成基因的扩增与鉴定 | 第23-24页 |
| ·AHSV-VP7 基因原核表达质粒的构建 | 第24-26页 |
| ·AHSV-VP7 蛋白的表达及鉴定 | 第26-27页 |
| ·AHSV-VP7 蛋白诱导条件的优化 | 第27页 |
| ·AHSV-VP7 蛋白的纯化 | 第27-28页 |
| ·AHSV-VP7 纯化蛋白的 Western-blot 分析 | 第28页 |
| ·非洲马瘟病毒 VP7 蛋白间接 ELISA 方法的建立 | 第28-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-41页 |
| ·目的基因的扩增 | 第31页 |
| ·pET-30a-VP7 重组质粒鉴定 | 第31-32页 |
| ·AHSV-VP7 最佳诱导条件的确定 | 第32-33页 |
| ·AHSV-VP7 重组蛋白的纯化 | 第33-35页 |
| ·AHSV-VP7 重组蛋白的 SDS-PAGE 分析 | 第33-34页 |
| ·AHSV-VP7 重组蛋白的 Western-blot 分析 | 第34-35页 |
| ·非洲马瘟 VP7 蛋白间接 ELISA 方法的建立 | 第35-41页 |
| ·抗原包被量及一抗最佳工作浓度的确定 | 第35-36页 |
| ·最佳包被条件的确定 | 第36页 |
| ·最佳封闭液的选择 | 第36-37页 |
| ·一抗最佳孵育时间的确定 | 第37页 |
| ·二抗最佳工作浓度的确定 | 第37-38页 |
| ·二抗最佳作用时间的确定 | 第38页 |
| ·临界值的判定 | 第38页 |
| ·特异性试验 | 第38-39页 |
| ·重复性试验 | 第39-40页 |
| ·间接 ELISA 方法与进口试剂盒的符合率 | 第40页 |
| ·AHSV-VP7 间接 ELISA 的应用 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41-43页 |
| ·AHSV-VP7 基因序列的选择 | 第41页 |
| ·AHSV-VP7 蛋白的表达 | 第41-42页 |
| ·AHSV-VP7 蛋白的纯化 | 第42页 |
| ·间接 ELISA 方法在 AHSV 的流行病学调查中的应用 | 第42页 |
| ·建立 AHSV 间接 ELISA 诊断方法的前景 | 第42-43页 |
| 5 结论 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-52页 |
| 附录 | 第52-54页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第54页 |
