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早期断奶仔猪血清代谢组学研究及谷氨酰胺对日粮消化吸收和代谢的影响

致谢第1-15页
摘要第15-19页
ABSTRACT第19-24页
英文缩略语表第24-27页
第一章 绪论第27-48页
 1 仔猪早期断奶对胃肠道的影响第27-30页
   ·胃肠道pH的变化第27-28页
   ·胃肠道结构的变化第28-29页
   ·胃肠道消化酶活力的变化第29页
   ·肠道微生物区系变化第29-30页
 2 血液游离氨基酸在评价机体营养状况及指导营养支持中的意义第30-31页
 3 谷氨酰胺的生物学功能第31-36页
   ·谷氨酰胺的化学结构和来源第31-32页
   ·谷氨酰胺在肠道中作为主要的能源物质第32-33页
   ·谷氨酰胺对肠道功能的调节作用第33页
   ·谷氨酰胺的抗氧化作用第33-34页
   ·谷氨酰胺的代谢及对整个机体代谢的影响第34-36页
 4 代谢组第36-46页
   ·代谢组学的概念与发展第36-37页
   ·代谢组学的优缺点第37-38页
   ·代谢组学研究的仪器分析技术第38-41页
     ·气质联用和二维气质联用第38-39页
     ·液质联用第39-40页
     ·基于核磁共振方法第40-41页
     ·MS与MR联用技术在代谢组学研究中的应用第41页
   ·代谢组学研究的数据处理方法第41-44页
     ·非监督方法第42页
     ·有监督方法第42-44页
   ·代谢组学在营养学研究中的运用第44-46页
     ·营养和膳食(日粮)作用的代谢分析第44页
     ·肠道微生物和宿主代谢互作第44-46页
 5 本试验的研究目标、研究内容和拟解决的关键问题第46-48页
   ·研究目标第46页
   ·研究内容第46-47页
   ·拟解决的关键问题第47-48页
第二章 仔猪早期断奶氨基酸代谢谱变化研究第48-67页
 1 材料与方法第49-51页
   ·试验动物第49页
   ·实验设计第49-50页
   ·血清样品的采集和保存第50页
   ·葡萄糖、总蛋白和白蛋白含量的测定第50页
   ·血浆游离氨基酸浓度测定第50页
   ·数据处理和模式识别第50-51页
     ·数据处理第50页
     ·模式识别第50-51页
 2 结果第51-62页
   ·断奶仔猪血清葡萄糖、总蛋白和白蛋白浓度第51-52页
   ·断奶仔猪血清氨基酸浓度第52-54页
   ·断奶仔猪血清氨基酸代谢谱多元统计分析第54-62页
     ·主成分分析第54-58页
     ·偏最小二乘法判别分析第58-62页
 3 讨论第62-66页
 4 小结第66-67页
第三章 基于气相/质谱联用的代谢组学方法研究仔猪对早期断奶和谷胺酰胺添加的影响第67-88页
 1 材料与方法第68-73页
   ·试验材料第68页
     ·试验动物第68页
     ·试验日粮第68页
   ·试验程序第68-69页
   ·试验设计第69-70页
   ·血清样品的采集和保存第70页
   ·样本处理第70-71页
   ·GC-MS分析第71页
   ·传统生化试剂盒检测第71页
   ·数据处理与模式识别第71-73页
 2 结果第73-83页
   ·生长性能第73页
   ·GC/MS分析方法验证第73页
   ·样品的代谢组学分析第73-76页
   ·断奶相关的代谢产物变化第76-77页
   ·谷氨酰胺处理对断奶相关代谢产物变化的影响第77-78页
   ·哺乳组、对照组、谷氨酰胺组断奶相关代谢物的比较第78-82页
   ·传统试剂盒法测定的血清代谢物浓度第82-83页
 3 讨论第83-87页
 4 小结第87-88页
第四章 谷氨酰胺对断奶仔猪营养物质消化吸收的影响第88-112页
 1 材料与方法第89-95页
   ·试验材料第89-90页
     ·试验动物第89页
     ·试验饲粮第89-90页
   ·试验设计与样品采集第90-91页
     ·实验一第90-91页
     ·实验二第91页
   ·饲养管理第91页
   ·饲粮组分表观消化率的测定第91页
   ·组织准备和空肠酶活力测定第91-92页
   ·总RNA的提取及反转录第92页
   ·引物设计第92-93页
   ·反应体系及条件第93-94页
   ·数据处理第94-95页
 2 结果第95-107页
   ·谷氨酰胺对饲粮表观消化率的影响第95-97页
   ·谷氨酰胺对断奶仔猪生长性能的影响第97页
   ·谷氨酰胺对断奶仔猪回肠末端表观消化率的影响第97-99页
   ·荧光定量PCR标准曲线与熔解曲线分析结果第99-103页
   ·谷氨酰胺对空肠吸收与健康相关因子的影响第103-105页
   ·谷氨酰胺对空肠谷氨酰胺和能量代谢酶活力的影响第105-107页
 3 讨论第107-111页
 4 小结第111-112页
第五章 L-谷氨酰胺对断奶仔猪的影响:血清代谢谱比较和肝脏代谢调节分析第112-131页
 1 材料与方法第112-116页
   ·试验材料第112-113页
     ·试验动物第112页
     ·试验饲粮第112-113页
   ·实验设计与饲养管理第113页
   ·采样与保存第113页
   ·样本处理第113页
   ·GC-MS分析第113-114页
   ·常规检测盒法测定血清代谢物第114页
   ·组织准备和酶分析第114页
   ·肝脏总RNA的提取及反转录第114-115页
   ·荧光定量PCR反应引物与体系第115页
   ·数据处理与模式识别第115-116页
 2 结果第116-127页
   ·生产性能第116页
   ·血清代谢组学分析第116-117页
   ·谷氨酰胺处理对血清代谢谱的影响第117-122页
   ·主成分分析第122-124页
   ·利用试剂盒检测血清代谢物第124-125页
   ·谷氨酰胺对猪肝脏代谢酶活性的影响第125页
   ·谷氨酰胺对肝脏PK,mTOR,PPARγ mRNA水平的影响第125-127页
 3 讨论第127-130页
 4 小结第130-131页
第六章 谷氨酰胺对氧化应激引起的细胞凋亡影响第131-148页
 1 材料与方法第131-138页
   ·试验材料第131-132页
     ·试验试剂第131-132页
     ·主要仪器设备第132页
   ·细胞培养第132页
   ·Gln和H_2O_2处理HT-29细胞第132页
   ·丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性测定第132-133页
     ·裂解细胞第132-133页
     ·丙二醛含量测定第133页
     ·超氧化物歧化酶活性测定第133页
   ·总RNA提取方法第133-134页
     ·前期准备第133-134页
     ·细胞总RNA的提取步骤第134页
   ·反转录第134-135页
   ·荧光定量PCR第135-137页
     ·引物设计和合成第135-136页
     ·荧光定量PCR扩增体系和反应条件第136-137页
   ·流式细胞仪分析第137页
   ·数据处理第137-138页
 2 结果第138-145页
   ·培养细胞第138页
   ·Gln对H_2O_2诱导的氧化状态改变的影响第138-139页
   ·Gln对H_2O_2诱导的细胞凋亡相关基因表达的影响第139-142页
   ·流式细胞仪分析第142-145页
 3 讨论第145-147页
 4 小结第147-148页
第七章 本研究主要结论与创新点及下一步研究思路第148-150页
 1 主要结论第148页
 2 创新点第148-149页
 3 下一步的研究思路第149-150页
参考文献第150-167页
博士期间研究成果及发表的论文第167页

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