摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-16页 |
第一章 绪论 | 第16-31页 |
·高等植物线粒体基因组研究进展 | 第16-24页 |
·线粒体基因组全测序的高等植物 | 第16-17页 |
·植物线粒体基因组上的基因 | 第17-18页 |
·高等植物线粒体基因组特点 | 第18-23页 |
·展望 | 第23-24页 |
·植物细胞质雄性不育相关基因研究进展 | 第24-29页 |
·不同植物CMS 相关基因 | 第24-29页 |
·CMS 相关基因的主要特点 | 第29页 |
·本研究的目的和意义 | 第29页 |
·本研究的策略和方法 | 第29-31页 |
第二章 陆地棉细胞质雄性不育胞质和可育胞质线粒体DNA 的RFLP 分析 | 第31-49页 |
·材料 | 第31-34页 |
·植物材料 | 第31页 |
·试剂及仪器 | 第31-32页 |
·引物 | 第32-34页 |
·方法 | 第34-37页 |
·改良CTAB 法提取棉花基因组 | 第34页 |
·PCR 扩增线粒体基因 | 第34-35页 |
·线粒体基因探针的标记 | 第35页 |
·酶切基因组DNA | 第35-36页 |
·酶切产物的电泳 | 第36页 |
·转膜 | 第36页 |
·预杂交和杂交 | 第36页 |
·洗涤尼龙膜 | 第36页 |
·尼龙膜的封闭及与抗体反应 | 第36-37页 |
·尼龙膜的洗涤及检测 | 第37页 |
·结果分析 | 第37-44页 |
·棉花线粒体基因PCR 结果 | 第37-38页 |
·线粒体基因Southern blot 结果 | 第38-44页 |
·讨论 | 第44-48页 |
·棉花线粒体基因组DNA 的RFLP 标记 | 第44-45页 |
·atpA 基因在棉花可育系和保持系及不同CMS 系间的RFLPs | 第45-46页 |
·不同CMS 系中atp6 和coxII 基因Southern blot 结果的比较分析 | 第46页 |
·rrn18-rrn5 基因在棉花可育胞质和不育胞质间的 RFLP | 第46页 |
·Southern blot 实验要点讨论 | 第46-48页 |
·小结 | 第48-49页 |
第三章 棉花可育胞质和不育胞质线粒体基因组中ATPA 基因侧翼序列的克隆 | 第49-78页 |
·材料 | 第49-51页 |
·植物材料 | 第49页 |
·试剂 | 第49页 |
·引物 | 第49-50页 |
·载体和菌株 | 第50-51页 |
·方法 | 第51-55页 |
·反向PCR(IPCR)扩增atpA 基因侧翼序列 | 第51-53页 |
·TAIL-PCR 扩增atpA 基因侧翼序列 | 第53-55页 |
·结果分析 | 第55-74页 |
·优化的反向PCR 法扩增atpA 基因侧翼序列 | 第55-57页 |
·atpA EcoRI 限制片段序列分析 | 第57-65页 |
·TAIL-PCR 扩增结果 | 第65-68页 |
·atpA HindIII 限制片段序列分析 | 第68-72页 |
·CMS-D8 中atpA 基因EcoRI 限制片段的扩增 | 第72-74页 |
·讨论 | 第74-76页 |
·atpA 基因参与线粒体基因组DNA 重组 | 第74-75页 |
·nad6 基因编码区中的27 bp 序列参与线粒体基因组DNA 重组 | 第75-76页 |
·IPCR 结合TAIL-PCR 法扩增atpA 基因侧翼序列 | 第76页 |
·小结 | 第76-78页 |
第四章棉花可育胞质和不育胞质SCAR和SSR分子标记的开发 | 第78-90页 |
·材料 | 第78-80页 |
·植物材料 | 第78-79页 |
·试剂 | 第79页 |
·引物 | 第79-80页 |
·方法 | 第80-81页 |
·改良CTAB 法提取棉花基因组 | 第80页 |
·分子标记分析 | 第80-81页 |
·结果分析 | 第81-87页 |
·SSR160 分子标记序列分析及扩增结果 | 第81-83页 |
·SCAR555、SCAR515、SCARN6 分子标记序列分析及扩增结果 | 第83-86页 |
·CMS-D8 特异分子标记SCARD8 的开发 | 第86-87页 |
·讨论 | 第87-89页 |
·SSR160 标记序列分析 | 第87页 |
·SCAR515、SCAR555、SCARN6 标记序列分析 | 第87-88页 |
·SCAR 标记和SSR 标记在鉴别植物胞质中的应用 | 第88-89页 |
·小结 | 第89-90页 |
第五章 棉花ATPA 基因表达分析 | 第90-102页 |
·材料和方法 | 第90-94页 |
·实验材料 | 第90页 |
·试剂 | 第90页 |
·载体和菌株 | 第90页 |
·引物序列 | 第90-91页 |
·改良硼酸法提取RNA | 第91-92页 |
·cDNA 第一链合成 | 第92-93页 |
·RT-PCR 分析 | 第93页 |
·cRT-PCR 分析 | 第93页 |
·Northern blot 分析 | 第93-94页 |
·结果分析 | 第94-100页 |
·atpA 基因的RT-PCR 分析 | 第94-95页 |
·棉花atpA 基因的RNA 编辑 | 第95-96页 |
·棉花不育胞质atpA 基因全长拷贝和截短型拷贝cDNA 全长的克隆 | 第96-99页 |
·atpA 基因在棉花不育系、保持系和恢复系中的Northern blot 分析 | 第99-100页 |
·讨论 | 第100-101页 |
·cRT-PCR 法克隆棉花线粒体atpA 转录本全长 | 第100-101页 |
·棉花不同胞质atpA RNA 编辑率与CMS 的关系 | 第101页 |
·小结 | 第101-102页 |
第六章 棉花NAD6 基因表达分析 | 第102-109页 |
·材料和方法 | 第102-103页 |
·试验材料、试剂、载体和菌株 | 第102页 |
·引物序列 | 第102-103页 |
·RNA 提取、Northern blot 分析、RT-PCR 分析、cRT-PCR 分析 | 第103页 |
·结果分析 | 第103-107页 |
·nad6 基因的Northern blot 分析 | 第103页 |
·nad6 基因的RT-PCR 和cRT-PCR 分析 | 第103-105页 |
·棉花nad6 基因序列分析 | 第105-106页 |
·棉花nad6 基因的RNA 编辑 | 第106-107页 |
·讨论 | 第107-108页 |
·小结 | 第108-109页 |
结论 | 第109-110页 |
本研究的创新点 | 第110-111页 |
参考文献 | 第111-123页 |
致谢 | 第123-124页 |
作者简历 | 第124页 |