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棉花胞质雄性不育系与保持系线粒体基因组差异研究

摘要第1-8页
Abstract第8-16页
第一章 绪论第16-31页
   ·高等植物线粒体基因组研究进展第16-24页
     ·线粒体基因组全测序的高等植物第16-17页
     ·植物线粒体基因组上的基因第17-18页
     ·高等植物线粒体基因组特点第18-23页
     ·展望第23-24页
   ·植物细胞质雄性不育相关基因研究进展第24-29页
     ·不同植物CMS 相关基因第24-29页
     ·CMS 相关基因的主要特点第29页
   ·本研究的目的和意义第29页
   ·本研究的策略和方法第29-31页
第二章 陆地棉细胞质雄性不育胞质和可育胞质线粒体DNA 的RFLP 分析第31-49页
   ·材料第31-34页
     ·植物材料第31页
     ·试剂及仪器第31-32页
     ·引物第32-34页
   ·方法第34-37页
     ·改良CTAB 法提取棉花基因组第34页
     ·PCR 扩增线粒体基因第34-35页
     ·线粒体基因探针的标记第35页
     ·酶切基因组DNA第35-36页
     ·酶切产物的电泳第36页
     ·转膜第36页
     ·预杂交和杂交第36页
     ·洗涤尼龙膜第36页
     ·尼龙膜的封闭及与抗体反应第36-37页
     ·尼龙膜的洗涤及检测第37页
   ·结果分析第37-44页
     ·棉花线粒体基因PCR 结果第37-38页
     ·线粒体基因Southern blot 结果第38-44页
   ·讨论第44-48页
     ·棉花线粒体基因组DNA 的RFLP 标记第44-45页
     ·atpA 基因在棉花可育系和保持系及不同CMS 系间的RFLPs第45-46页
     ·不同CMS 系中atp6 和coxII 基因Southern blot 结果的比较分析第46页
     ·rrn18-rrn5 基因在棉花可育胞质和不育胞质间的 RFLP第46页
     ·Southern blot 实验要点讨论第46-48页
   ·小结第48-49页
第三章 棉花可育胞质和不育胞质线粒体基因组中ATPA 基因侧翼序列的克隆第49-78页
   ·材料第49-51页
     ·植物材料第49页
     ·试剂第49页
     ·引物第49-50页
     ·载体和菌株第50-51页
   ·方法第51-55页
     ·反向PCR(IPCR)扩增atpA 基因侧翼序列第51-53页
     ·TAIL-PCR 扩增atpA 基因侧翼序列第53-55页
   ·结果分析第55-74页
     ·优化的反向PCR 法扩增atpA 基因侧翼序列第55-57页
     ·atpA EcoRI 限制片段序列分析第57-65页
     ·TAIL-PCR 扩增结果第65-68页
     ·atpA HindIII 限制片段序列分析第68-72页
     ·CMS-D8 中atpA 基因EcoRI 限制片段的扩增第72-74页
   ·讨论第74-76页
     ·atpA 基因参与线粒体基因组DNA 重组第74-75页
     ·nad6 基因编码区中的27 bp 序列参与线粒体基因组DNA 重组第75-76页
     ·IPCR 结合TAIL-PCR 法扩增atpA 基因侧翼序列第76页
   ·小结第76-78页
第四章棉花可育胞质和不育胞质SCAR和SSR分子标记的开发第78-90页
   ·材料第78-80页
     ·植物材料第78-79页
     ·试剂第79页
     ·引物第79-80页
   ·方法第80-81页
     ·改良CTAB 法提取棉花基因组第80页
     ·分子标记分析第80-81页
   ·结果分析第81-87页
     ·SSR160 分子标记序列分析及扩增结果第81-83页
     ·SCAR555、SCAR515、SCARN6 分子标记序列分析及扩增结果第83-86页
     ·CMS-D8 特异分子标记SCARD8 的开发第86-87页
   ·讨论第87-89页
     ·SSR160 标记序列分析第87页
     ·SCAR515、SCAR555、SCARN6 标记序列分析第87-88页
     ·SCAR 标记和SSR 标记在鉴别植物胞质中的应用第88-89页
   ·小结第89-90页
第五章 棉花ATPA 基因表达分析第90-102页
   ·材料和方法第90-94页
     ·实验材料第90页
     ·试剂第90页
     ·载体和菌株第90页
     ·引物序列第90-91页
     ·改良硼酸法提取RNA第91-92页
     ·cDNA 第一链合成第92-93页
     ·RT-PCR 分析第93页
     ·cRT-PCR 分析第93页
     ·Northern blot 分析第93-94页
   ·结果分析第94-100页
     ·atpA 基因的RT-PCR 分析第94-95页
     ·棉花atpA 基因的RNA 编辑第95-96页
     ·棉花不育胞质atpA 基因全长拷贝和截短型拷贝cDNA 全长的克隆第96-99页
     ·atpA 基因在棉花不育系、保持系和恢复系中的Northern blot 分析第99-100页
   ·讨论第100-101页
     ·cRT-PCR 法克隆棉花线粒体atpA 转录本全长第100-101页
     ·棉花不同胞质atpA RNA 编辑率与CMS 的关系第101页
   ·小结第101-102页
第六章 棉花NAD6 基因表达分析第102-109页
   ·材料和方法第102-103页
     ·试验材料、试剂、载体和菌株第102页
     ·引物序列第102-103页
     ·RNA 提取、Northern blot 分析、RT-PCR 分析、cRT-PCR 分析第103页
   ·结果分析第103-107页
     ·nad6 基因的Northern blot 分析第103页
     ·nad6 基因的RT-PCR 和cRT-PCR 分析第103-105页
     ·棉花nad6 基因序列分析第105-106页
     ·棉花nad6 基因的RNA 编辑第106-107页
   ·讨论第107-108页
   ·小结第108-109页
结论第109-110页
本研究的创新点第110-111页
参考文献第111-123页
致谢第123-124页
作者简历第124页

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